Kinyoun धुंधला नींव और तकनीक

किन्नौं धुंधला यह एक रंग तकनीक है जिसका उपयोग एसिड-फास्ट बैक्टीरिया और एसिड परजीवी को दागने के लिए किया जाता है। यह Ziehl-Neelsen के रंग के संशोधन से पैदा हुआ था; दोनों तकनीकों की व्याख्या एक ही तरीके से की जाती है, लेकिन वे दो तत्वों में भिन्न होती हैं: मुख्य अभिकर्मक की तैयारी में और उस में किन्यन तकनीक गर्मी का उपयोग नहीं करती है.

इस कारण इसे कोल्ड-मॉडिफाइड Ziehl-Neelsen या किन्यौन कोल्ड स्टेनिंग के रूप में भी जाना जाता है। यह के रंग के लिए संकेत दिया है माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस, माइकोबैक्टीरियम लेप्राई, एटिपिकल माइकोबैक्टीरिया, Nocardias सपा, क्रिप्टोस्पोरिडियम परवम, क्रिप्टोस्पोरिडियम मेलेग्रिडिस, क्रिप्टोस्पोरिडियम फेलिस, क्रिप्टोस्पोरिडियम मुरिस और साइक्लोस्पोरस साइनेटेंसिस.

यह ध्यान देने योग्य है कि नोकार्डियास इस तकनीक के साथ कमजोर रूप से दागते हैं क्योंकि वे आंशिक रूप से एसिड-प्रतिरोधी शराब हैं, इसलिए इस शैली के लिए कार्यप्रणाली का एक संशोधन है.

बदले में, कियॉन्डो कोल्ड तकनीक को ट्रिड्रोम तकनीक के साथ जोड़ दिया गया था जो डिडिएर द्वारा कोकसीडिया (क्रिप्टोस्पोरिडियम परवुम और इसोस्पोरा बेली) और माइक्रोस्पोरिडिया के बीजाणु (एंटरोसाइटोजून बायनेसी और एन्सेफैलिटोजून आंतों).

सूची

• 1 फाउंडेशन
• 2 तकनीक
  • 2.1 सामग्री
  • २.२ किन्नौं की तैयारी मेथी फुकसिन
  • 2.3 अल्कोहल-एसिड की तैयारी
  • 2.4 मेथिलीन ब्लू कंट्रास्ट डाई की तैयारी
  • 2.5 किन्नौं दाग तकनीक
  • 2.6 Nocardias के लिए विशेष किन्नौं तकनीक
  • 2.7 फ़िनोलिक और ट्राइक्रोमिक फ़्यूचिन की संयुक्त तकनीक डिडिएर द्वारा संशोधित
  • 2.8 गुणवत्ता नियंत्रण
• Ziehl तकनीक -Neelsen की तुलना में 3 Kinyoun तकनीक
• 4 संदर्भ

आधार

मुख्य धुंधला अभिकर्मक कार्बोलिक फ़्यूचिन या फ़्यूचिन फ़ेनिकडा है, जिसमें मोमी सेल की दीवार के भीतर विद्यमान कार्बोलिक एसिड से बंधने का गुण होता है, जो माइकोबैक्टीरिया के लिपिड (माइकोलिक एसिड) और कुछ परजीवी से समृद्ध होता है।.

वह संघ अम्ल विघटित होने के कारण प्रतिकार नहीं करता है; इसलिए, सूक्ष्मजीवों को एसिड-प्रतिरोधी शराब के रूप में परिभाषित किया गया है.

ज़ेहल-नीलसेन तकनीक के विपरीत - जो डाई को गर्मी के माध्यम से ठीक करता है - किन्यौन तकनीक में यह कदम आवश्यक नहीं है, क्योंकि इस तकनीक के लिए तैयार किए गए फिनोलिक फुकसिन समाधान में फिनोल की उच्च एकाग्रता होती है।.

फिनोल सेल की दीवार की लिपिड सामग्री को भंग कर देता है, जो कार्बोच फ्यूसीनिन के प्रवेश की अनुमति देता है। डाई के प्रवेश के बाद, यह अल्कोहल-एसिड से धोने के बावजूद स्थिर रहता है.

इस तरह, एसिड-प्रतिरोधी सूक्ष्मजीव विशेषता लाल रंग पर ले जाते हैं, जबकि एसिड-प्रतिरोधी अल्कोहल नहीं होने वाली हर चीज फीकी पड़ जाती है और नीले रंग में रंग जाती है।.

तकनीक

सामग्री

- संशोधित फेनोलिक फुकसिन.

- शराब -acetic.

- मेथिलीन नीला.

किन्नौं की तैयारी मेथी फुकसिन

- बेसिक फुकसिन: 4 जीआर.

- फेनोल: 8 मिली.

- शराब (95%): 20 मिली.

- आसुत जल: 100 मिली.

अल्कोहल में मूल फ़्यूचिन को धीरे-धीरे भंग किया जाना चाहिए, लगातार मिश्रण करना। इसके बाद, क्रिस्टलीकृत फिनोल को 56 ° C पर पानी के स्नान में पिघलाया जाता है। एक बार भंग होने पर, ऊपर तैयार किए गए फ्यूचिन समाधान में 8 मिलीलीटर जोड़ें.

अल्कोहल-एसिड की तैयारी

- केंद्रित हाइड्रोक्लोरिक एसिड: 3 मिली.

- इथेनॉल (95%): 97 मिली.

इसे मापा, मिलाया और मिलाया जाना चाहिए.

मिथाइलीन ब्लू कंट्रास्ट डाई की तैयारी

- मिथाइलीन नीला: 0.3 ग्राम.

- आसुत जल: 100 मिली.

यह तौला और भंग किया जाता है.

किन्नौं दाग तकनीक

1 - नमूने से सीधे एक धब्बा तैयार करें, जो थूक, फुफ्फुसीय द्रव, मूत्र तलछट, मस्तिष्कमेरु द्रव या मल, दूसरों के बीच में हो सकता है; या प्राथमिक संस्कृति मीडिया में विकसित शुद्ध कालोनियों से प्राप्त सूक्ष्मजीवों के निलंबन से.

2- धब्बा को गर्मी से ठीक करें.

3- स्मियर को कलरिंग ब्रिज पर रखें और किन्नौं के फेनोलिक फुकसिन रीजेंट से कवर करें। इसे 3 या 5 मिनट तक बैठने दें.

4- डिस्टिल्ड वाटर से धोएं.

5- 3 मिनट के लिए एसिड अल्कोहल के साथ ब्लीच करें और डिस्टिल्ड वॉटर से दोबारा धोएं.

6- 1 या 2 मिनट के लिए फिर से एसिड अल्कोहल के साथ ब्लीच करें जब तक कि कोई और डाई न खींचे.

7- डिस्टिल्ड वॉटर से धोएं और स्लाइड को एक सीधी स्थिति में रखते हुए ड्रेन करें.

8- मेथिलीन ब्लू के साथ तैयारी को कवर करें और 4 मिनट के लिए छोड़ दें.

9- डिस्टिल्ड वाटर से धोएं और हवा को सूखने दें.

10- 40X पर और फिर 100X पर परीक्षा दें.

यदि आप एसिड-फास्ट सूक्ष्मजीवों के धुंधलापन को सुधारना और तेज करना चाहते हैं, तो किन्नौं के फेनोलिक फुकसिन के एक गीले एजेंट (जैसे कि टैरजिटॉल नंबर 7) की 1 बूंद 30 या 40 मिलीलीटर में मिलाएं।.

कुछ प्रयोगशालाएं चमकीले हरे या पिक्रिक एसिड के लिए मेथिलीन ब्लू कंट्रास्ट डाई बदलती हैं; पहला पृष्ठभूमि को हरा रंग देता है और दूसरा पीला रंग उत्पन्न करता है.

नोकार्डियास के लिए किन्नौं तकनीक विशेष

नोकार्डिया बैक्टीरिया के धुंधला को सुधारने के लिए, किन्नौं के धुंधला के एक संशोधन का उपयोग किया जाता है। तकनीक इस प्रकार है:

1- किन्नौं को फेनयुक्त फ्युचिन से धब्बा 3 मिनट के लिए ढक दें.

2- डिस्टिल्ड वाटर से धोएं.

3- 3% तैयार एसिड अल्कोहल के साथ थोड़ी देर तक ब्लीच न करें, जब तक कि कोई और डाई न डालें.

4- डिस्टिल्ड वॉटर से दोबारा धोएं.

5- मेथिलीन ब्लू के साथ तैयारी को कवर करें और 30 सेकंड के लिए छोड़ दें.

6- डिस्टिल्ड वाटर से धोएं और हवा को सूखने दें.

डिडिएर द्वारा संशोधित फेनोलिक और ट्राइक्रोमिक फ्यूचिन की संयुक्त तकनीक

यह तकनीक कोकसीडिया और बीजाणुओं की खोज में मल के नमूनों के विश्लेषण के लिए अनुशंसित है माइक्रोस्पोरिडियम सपा उसी समय इसके बाद की जाने वाली प्रक्रिया इस प्रकार है:

1- किन्नौं फेनोलिक फुकसिन से स्मीयर को 10 मिनट तक ढक कर रखें.

2- डाई निकालें और डिस्टिल्ड वॉटर से धोएं.

3- अल्कोहल हाइड्रोक्लोरिक एसिड के साथ 30 सेकंड के लिए ब्लीच.

4- डिस्टिल्ड वॉटर से दोबारा धोएं.

५- ३० डिग्री सेल्सियस पर ३० मिनट के लिए ट्राइक्रोम के घोल से स्मीयर को ढंक दें.

6- डिस्टिल्ड वॉटर से धोएं.

7- अल्कोहल एसिटिक एसिड के साथ 10 सेकंड के लिए कम करें.

8- 95% इथेनॉल का उपयोग करके 30 सेकंड के लिए धब्बा धो लें.

गुणवत्ता नियंत्रण

एक सकारात्मक नियंत्रण के रूप में, स्मीयर तनाव के साथ तैयार किए जाते हैं माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस और यह सुनिश्चित करने के लिए तैयार अभिकर्मकों के साथ सना हुआ है कि जीवाणु सही रंग लेते हैं (लाल-फुचिया).

नकारात्मक नियंत्रण भी किसी भी तनाव के साथ स्मीयर तैयार करके उपयोग किया जा सकता है जो एसिड प्रतिरोधी शराब नहीं है, इस प्रकार यह सत्यापित करते हुए कि पूरा नमूना विपरीत रंग लेता है.

Ziehl तकनीक -Neelsen की तुलना में किन्नौं तकनीक

किन्नौं तकनीक सरल है क्योंकि यह हीटिंग के चरण को समाप्त कर देती है, लेकिन इसका मुख्य लाभ यह है कि यह वाष्प के उत्सर्जन, अत्यधिक विषैले और लंबे समय में कैंसर का कारण बनता है। इसलिए, किन्नौं धुंधला धुंधला हो जाना कर्मियों के लिए सुरक्षित है.

यह ध्यान रखना महत्वपूर्ण है कि यह ध्यान रखना आवश्यक है कि अभिकर्मक त्वचा के सीधे संपर्क में नहीं आते हैं, क्योंकि वे संक्षारक हैं और ब्लीच ज्वलनशील है.

नुकसान के बारे में, एक नकारात्मक धब्बा जरूरी नहीं दर्शाता है कि सूक्ष्मजीव मौजूद नहीं है। इसके अलावा, सेल डिटरिटस की उपस्थिति झूठी सकारात्मकता पैदा कर सकती है, जो निदान में भ्रम पैदा करती है.

संदर्भ

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