यूरिया शोरबा नींव, तैयारी और उपयोग करता है

यूरिया शोरबा एक तरल संस्कृति का माध्यम है, जिसका उपयोग कुछ सूक्ष्मजीवों में एंजाइम मूत्र की उपस्थिति को प्रदर्शित करने के लिए किया जाता है। यूज एक माइक्रोबियल एंजाइम है जो संवैधानिक रूप से निर्मित होता है, अर्थात यह स्वतंत्र रूप से संश्लेषित होता है कि यह जिस पदार्थ पर कार्य करता है वह मौजूद है या नहीं।.

मूत्र का कार्य कार्बनिक यौगिकों के अपघटन से संबंधित है। सभी सूक्ष्मजीव इस एंजाइम को संश्लेषित करने में सक्षम नहीं हैं, इसलिए प्रयोगशाला में इसका निर्धारण कुछ जीवाणु उपभेदों की पहचान करने और यहां तक ​​कि एक ही जीन की प्रजातियों के बीच अंतर करने की अनुमति देता है।.

यूरिया परीक्षण दो प्रकार के होते हैं: स्टुअर्ट और क्रिस्टेंसन। वे अपनी रचना और संवेदनशीलता में भिन्न हैं। जीनस प्रोटीन की प्रजातियों द्वारा उत्पादित मूत्र की एक बड़ी मात्रा को दिखाने के लिए पहला विशेष है.

दूसरा अधिक संवेदनशील है और अन्य जीवाणु जननों द्वारा देर से उत्पन्न यूरिया की थोड़ी मात्रा का पता लगा सकता है, जैसे कि क्लेबसिएला, एंटरोबैक्टर, स्टैफिलोकोकस, ब्रुसेला, बोर्डेटेला, बैसिलस, माइक्रोकॉकस, हेलिकोबेक्टर और माइकोबैक्टीरियम.

स्टुअर्ट यूरिया शोरबा यूरिया, सोडियम क्लोराइड, डिपोटेशियम फॉस्फेट, मोनोपोटेशियम फॉस्फेट, खमीर निकालने, फिनोल लाल और आसुत जल से बना है.

जबकि क्रिस्टेंसन शोरबा या अगर यूरिया पेप्टोन, सोडियम क्लोराइड, मोनोपोटेशियम फॉस्फेट, ग्लूकोज, यूरिया, फिनोल लाल, आसुत जल और अगर-अग्र से बना है। उत्तरार्द्ध केवल अगर यह ठोस माध्यम है.

सूची

• 1 फाउंडेशन
  • 1.1 स्टुअर्ट यूरिया शोरबा
  • 1.2 क्रिस्टेंसन शोरबा या अगर यूरिया
  • 1.3 मीडिया (स्टुअर्ट और क्रिस्टेंसन) दोनों की व्याख्या
• 2 तैयारी
  • 2.1 स्टुअर्ट यूरिया शोरबा
  • 2.2 क्रिस्टेंसन शोरबा या अगर यूरिया
• ३ उपयोग
• 4 यूरिया परीक्षण बुवाई
• 5 गुणवत्ता नियंत्रण
• 6 संदर्भ

आधार

एंजाइम कार्बन डाइऑक्साइड, पानी और अमोनिया के दो अणुओं को बनाने के लिए यूरिया को हाइड्रोलाइज करता है। ये यौगिक अमोनियम कार्बोनेट नामक अंतिम उत्पाद बनाने के लिए प्रतिक्रिया करते हैं.

स्टुअर्ट यूरिया शोरबा

स्टुअर्ट यूरिया शोरबा 6.8 के पीएच के साथ अधिक बफर है। इसलिए, सूक्ष्मजीव को फिनोल को लाल करने के लिए बड़ी मात्रा में अमोनियम बनाने में सक्षम होना चाहिए। पीएच 8 से ऊपर उठना चाहिए.

इसलिए स्टुअर्ट यूरिया शोरबा प्रोटीन प्रजातियों के लिए चयनात्मक है, जो ऊष्मायन के 24 से 48 घंटों में सकारात्मक परिणाम देता है, और उन बैक्टीरिया के लिए प्रभावी नहीं है जो कम मात्रा में यूरिया पैदा करते हैं या जो धीरे-धीरे यूरिया का उत्पादन करते हैं.

ऐसा इसलिए है क्योंकि प्रोटीन प्रजातियां यूरिया को नाइट्रोजन स्रोत के रूप में उपयोग करने में सक्षम हैं। इसके विपरीत, अन्य मूत्र-उत्पादक बैक्टीरिया को एक अतिरिक्त स्रोत की आवश्यकता होती है.

हालांकि, पेरेज़ एट अल। (2002) ने निर्धारित किया कि स्टुअर्ट यूरिया शोरबा क्रिस्टेन्सन से यूरिया अगर के रूप में कुशल था, ताकि जेन कैंडिडा, क्रिप्टोकोकस, रोडोटरुला, ट्राइकोस्पोरन और सैक्रोमाइसेस के खमीर उपभेदों में यूरिया का निर्धारण किया जा सके।.

अध्ययन के लेखकों ने 24 और 48 घंटों के लिए ऊष्मायन करके मीडिया (स्टुअर्ट और क्रिस्टेंसन) दोनों के साथ 100% संयोग प्राप्त करने का दावा किया है; यह साबित करने के लिए कि वे सकारात्मक उपभेदों को ले गए जो मीडिया को एक मजबूत गुलाबी-फुकिया रंग में बदलने में कामयाब रहे.

यह स्पष्टीकरण आवश्यक है, क्योंकि लॉडर (1970) ने पुष्टि की कि लगभग सभी खमीर क्रिस्टीन के यूरिया अगर की जगह को हल्का गुलाबी करने का प्रबंधन करते हैं। इसका कारण यह है कि वे यूरिया को कम से कम मात्रा में और सतह पर अमीनो एसिड के ऑक्सीडेटिव डिकार्बोजाइलेशन द्वारा अमीनों के गठन को कम कर सकते हैं। इसकी व्याख्या सकारात्मक के रूप में नहीं की जानी चाहिए.

क्रिस्टेंसन से शोरबा या यूरिया अगर

क्रिस्टेंसन यूरिया शोरबा या अगर कम होता है, जो अमोनियम की थोड़ी मात्रा का पता लगाने में सक्षम होता है। इसके अलावा, यह माध्यम पेप्टोन और ग्लूकोज से समृद्ध है। ये यौगिक अन्य यूरोज-उत्पादक सूक्ष्मजीवों का कारण बनते हैं जो स्टुअर्ट शोरबा में विकसित नहीं होते हैं.

इसी तरह, क्रिस्टेंसन यूरिया परीक्षण तेजी से परिणाम प्रदान करता है, विशेष रूप से प्रोटीस के लिए, न्यूनतम समय के रूप में 30 मिनट और अधिकतम समय के रूप में 6 घंटे तक दृढ़ता से सकारात्मक देने में सक्षम है।.

सूक्ष्मजीवों का उत्पादन करने वाली शेष यूरिया 6 घंटे के बाद मध्यम रंग को बदल देती है, और दृढ़ता से 24, 48, 72 घंटे या अधिक के बाद, और यहां तक ​​कि कुछ उपभेद भी 5 या 6 दिनों के बाद कमजोर प्रतिक्रिया दे सकते हैं।.

दोनों मीडिया की व्याख्या (स्टुअर्ट और क्रिस्टेंसन)

माध्यम मूल रूप से पीले-नारंगी रंग का है और एक सकारात्मक प्रतिक्रिया मध्यम रंग को गुलाबी-फुकिया में बदल देगी। रंग की तीव्रता सीधे उत्पादित अमोनियम की मात्रा के लिए आनुपातिक है.

एक नकारात्मक प्रतिक्रिया खमीर के अलावा मूल रंग को छोड़ देगी, जो क्रिस्टेनसन यूरिया अगर के साथ हल्का गुलाबी रंग दे सकती है.

तैयारी

स्टुअर्ट यूरिया शोरबा

वाणिज्यिक घर के संकेत के अनुसार आवश्यक ग्राम वजन। अधिमानतः बाँझ आसुत जल में भंग। भंग करने के लिए गर्मी का उपयोग न करें, क्योंकि यूरिया गर्मी के प्रति संवेदनशील है.

झिल्ली निस्पंदन विधि का उपयोग बाँझ करने के लिए किया जाता है। इसके लिए, व्यास में 0.45 μ के छिद्र के साथ एक मिलिपोर फिल्टर का उपयोग किया जाता है। एक आटोक्लेव का उपयोग न करें। एक बार समाधान को फ़िल्टर करने के बाद, इसे बाँझ ट्यूबों में वितरित किया जाता है। विश्वसनीय परिणाम प्राप्त करने के लिए, इसे 1.5 मिलीलीटर के बीच न्यूनतम मात्रा के रूप में 3 मिलीलीटर प्रति ट्यूब अधिकतम मात्रा के रूप में स्थानांतरित किया जाना चाहिए।.

उपयोग करने से पहले एक रेफ्रिजरेटर और तापमान में स्टोर करें.

यदि निस्पंदन विधि उपलब्ध नहीं है, तो विश्वसनीय परिणाम प्राप्त करने के लिए माध्यम का तुरंत उपयोग किया जाना चाहिए.

यूरिया स्टुअर्ट शोरबा तैयार करने का एक और तरीका इस प्रकार है:

कुछ वाणिज्यिक घर यूरिया परीक्षण के लिए आधा आधार बेचते हैं, यूरिया सहित नहीं.

वाणिज्यिक घर द्वारा इंगित राशि का वजन किया जाता है। यह आसुत जल में भंग कर दिया जाता है और 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर आटोक्लेव में निष्फल होता है। इसे थोड़ा आराम करने दें और मध्यम गर्म होने पर 20% तैयार यूरिया के घोल में 100 मिलीलीटर मिलाएं और छानकर निष्फल कर दें.

यह बाँझ ट्यूबों में वितरित किया जाता है, जैसा कि पहले वर्णित है.

क्रिस्टेंसन से शोरबा या यूरिया अगर

-यूरिया के घोल की तैयारी

निर्जलित यूरिया के 29 ग्राम वजन और आसुत जल के 100 मिलीलीटर में भंग। स्टरलाइज़ करने के लिए निस्पंदन विधि का उपयोग करें। आटोक्लेव मत करो.

-यूरिया बेस अगार

आसुत जल के 950 मिलीलीटर में निर्जलित आधार अगर के 24 ग्राम को भंग करें। 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर आटोक्लेव में बाँझ। 50 डिग्री सेल्सियस के तापमान तक पहुंचने तक खड़े रहें और पहले से तैयार यूरिया को असमान रूप से जोड़ दें.

बाँझ ट्यूबों में 4 से 5 मिलीलीटर डालो और जमने तक झुकाएं। एक लंबी बांसुरी चोटी होनी चाहिए.

इस माध्यम को तरल रूप में भी तैयार किया जा सकता है.

अनुप्रयोगों

एंटरोबैक्टीरिया परिवार के अन्य जीन से प्रोटीस जीन को अलग करने में यूरिया परीक्षण बेहद प्रभावी है, जिसे प्रोटियस द्वारा प्रदान की गई तीव्र प्रतिक्रिया दी गई है.

यदि क्रिस्टेंसन की रचना का उपयोग किया जाता है, तो परीक्षण एक ही जीन की प्रजातियों के बीच अंतर करने में मदद करता है। उदाहरण के लिए, एस। हैमोलिटिकस और एस। वार्नेरी एसपर Staphylococcus कोगुलेज़ नकारात्मक और बीटाहेमोलिटिक, लेकिन वे इसमें भिन्न हैं एस। हैमोलिटिकस यह नकारात्मक यूरिया है और एस। वार्नर यह सकारात्मक यूरिया है.

दूसरी ओर, McNulty की उपस्थिति का अध्ययन करने के लिए सफलतापूर्वक 2% क्रिस्टेंसन यूरिया शोरबा का उपयोग किया हेलिकोबैक्टर पाइलोरी गैस्ट्रिक म्यूकोसा (एंट्रल क्षेत्र) से ली गई बायोप्सी के नमूनों में.

की उपस्थिति एच। पाइलोरी इसका एक सकारात्मक यूरिया परीक्षण है। परिणामों को देखने की अवधि सीधे सूक्ष्मजीवों की मात्रा के अनुपात में होती है.

जैसा कि देखा जा सकता है, यह निदान के लिए एक सरल विधि है हेलिकोबैक्टर पाइलोरी गैस्ट्रिक बायोप्सी में.

अंत में, यह परीक्षण जेनेरा ब्रुसेला, बोर्डेटेला, बैसिलस, माइक्रोकॉकस और माइकोबैक्टीरिया की प्रजातियों को अलग करने के लिए भी उपयोगी है।.

यूरिया परीक्षण बुवाई

परिणामों को अनुकूलित करने के लिए दो तरीकों के लिए एक मजबूत माइक्रोबियल इनोकुलम की आवश्यकता होती है। बैक्टीरियल कॉलोनियों को अधिमानतः कुछ अपवादों के साथ रक्त अगर और सबाउरड अगर यीस्ट से लिया जाता है। इनोकुलम तरल माध्यम में उत्सर्जित होता है.

स्टुअर्ट यूरिया शोरबा के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर 24 से 48 घंटों के लिए ऊष्मायन किया गया है, यह जानते हुए कि एक केवल जीनस प्रोटीन के उपभेदों की तलाश कर रहा है जब तनाव एक जीवाणु है। खमीर के लिए यह ऊष्मायन के 24 से 48 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस या कमरे के तापमान पर ऊष्मायन किया जा सकता है.

क्रिस्टेंसन यूरिया शोरबा के मामले में, 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर सेते हैं। यदि परीक्षण नकारात्मक है, तो इसे 6 दिनों तक ऊष्मायन किया जा सकता है। यदि परीक्षण 6 घंटे से पहले सकारात्मक है, तो यह इंगित करता है कि यह जीनस प्रोटीन का एक तनाव है.

क्रिस्टेंसन यूरिया एगर के मामले में, एवर बेवल को दृढ़ता से बिना छिद्रित किया जाता है। शोरबा ऊष्मायन और उसी तरह व्याख्या की जाती है.

गुणवत्ता नियंत्रण

माध्यम का परीक्षण करने के लिए नियंत्रण उपभेदों का उपयोग किया जा सकता है, जैसे कि प्रोटीन मिराबिलिस एटीसीसी 43071, क्लेबसिएला निमोनिया  एटीसीसी 7006003, एस्केरिचिया कोलाई ATCC 25922 और साल्मोनेला टाइफिम्यूरियम.  पहले दो को सकारात्मक परिणाम देने होंगे और अंतिम दो नकारात्मक परिणाम.

संदर्भ

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