Tetrathionate शोरबा नींव, तैयारी और उपयोग करता है

टेट्रेटेट शोरबा या टीटी शोरबा साल्मोनेला उपभेदों के संवर्धन और वसूली के लिए एक चुनिंदा तरल संस्कृति का माध्यम है। यह म्यूलर द्वारा बनाया गया था और बाद में कॉफ़मैन द्वारा संशोधित किया गया था, इस कारण से वहाँ लोग हैं जो इसे मुलर-कॉफ़मैन ब्रोथ कहते हैं.

मूल माध्यम में प्रोटीओस पेप्टोन, कैल्शियम कार्बोनेट और सोडियम थायोसल्फेट थे। कॉफ़मैन ने पित्त लवण को जोड़ा और चमकीले हरे रंग के साथ एक और विधा बनाई। ये पदार्थ कोलीफॉर्म की वृद्धि को रोकते हैं, रोगजनक बैक्टीरिया के विकास के लिए मुक्त माध्यम छोड़ते हैं, इस मामले में साल्मोनेला.

संशोधन बहुत सफल रहा क्योंकि इसने माध्यम की संवेदनशीलता को काफी बढ़ा दिया। इसलिए, यह वर्तमान में किसी भी प्रकार के नमूने में साल्मोनेलस की खोज के लिए उपयोगी है, लेकिन विशेष रूप से ठोस या तरल मल और भोजन के लिए।.

इसकी तैयारी में दो चरण होते हैं; वाणिज्यिक माध्यम टेट्राथिओनेट शोरबा तैयार करने के लिए एक आधार है, और बाद में टेट्राथिओनेट बनने के लिए, मध्यम पूरा करने के लिए एक आयोडीन युक्त आयोडीन समाधान जोड़ा जाता है.

अमेरिकन पब्लिक हेल्थ एसोसिएशन (APHA) ने साल्मोनेला की खोज में नमूनों के संवर्धन के लिए चमकीले हरे रंग के साथ पूरक टिथियोनेट शोरबा के उपयोग की सिफारिश की है, क्योंकि यह टेट्राथिओनेट शोरबा और सेलेनाइट शोरबा की तुलना में अधिक चयनात्मक है।.

सामान्य तौर पर, टेट्राथिओनेट शोरबा आदर्श होता है जब जीनस साल्मोनेला के बैक्टीरिया कम मात्रा में संदिग्ध होते हैं या जो निरोधात्मक पदार्थों के संपर्क में या औद्योगिक प्रक्रियाओं द्वारा दुरुपयोग किए जाते हैं जो उनकी व्यवहार्यता को कम करते हैं.

सूची

• 1 फाउंडेशन
• 2 तैयारी
  • २.१ - टेट्राथियोनेट
  • 2.2-वेरिएंट टेट्राथियोनेट ब्रोथ हरे रंग के साथ
• 3 का उपयोग करें
• 4 गुणवत्ता नियंत्रण
• 5 सिफारिशें
• 6 संदर्भ

आधार

वर्तमान पेप्टोन कैसिइन अग्नाशयी पाचन और पशु ऊतक के पेप्टिक पाचन के अनुरूप हैं। ये बैक्टीरिया के विकास के लिए सामान्य रूप से कार्बन, नाइट्रोजन और पोषक तत्वों का स्रोत प्रदान करते हैं.

इसके भाग के लिए, सोडियम थायोसल्फेट टेट्राथिओनेट बनाने के लिए आयोडीन युक्त घोल के साथ प्रतिक्रिया करता है। यह कोलीफॉर्म की वृद्धि को रोकता है और बैक्टीरिया के विकास का पक्षधर है जिसमें एंजाइम टेट्राथिओनेट रिडक्टेस होते हैं, उनमें से जीन साल्मोनेला है, लेकिन प्रोटीन भी है.

पित्त लवण भी अधिकांश ग्राम पॉजिटिव बैक्टीरिया और कुछ ग्राम-नकारात्मक बैक्टीरिया (कोलीफॉर्म) के निरोधात्मक पदार्थ के रूप में कार्य करते हैं.

कैल्शियम कार्बोनेट टेट्राथिओनेट के अपघटन द्वारा उत्पन्न विषाक्त पदार्थों को अवशोषित करता है, जो सल्फ्यूरिक एसिड बनाता है। इस अर्थ में, कैल्शियम कार्बोनेट अम्लता को स्थिर माध्यम के पीएच को बनाए रखता है.

चमकीले हरे रंग के प्रतिरूपता के मामले में, यह पदार्थ जीनोम साल्मोनेला के अलावा अन्य सूक्ष्मजीवों को रोककर टेट्राथिओनेट शोरबा की चयनात्मक शक्ति को बढ़ाता है।.

तैयारी

-टेट्र्रेटेट शोरबा

आयोडीन आयोडीन समाधान

अफसोस:

• आयोडीन की 6 जीआर.
• 5 ग्राम पोटेशियम आयोडाइड.

पोटेशियम आयोडाइड को बाँझ आसुत पानी के लगभग 5 मिलीलीटर में भंग कर दिया जाता है, फिर मिश्रण को थोड़ा गर्म करके आयोडीन को थोड़ा जोड़ा जाता है। पूरी तरह से भंग होने के बाद यह बाँझ आसुत जल से भर जाता है जब तक कि यह 20 मिलीलीटर की अंतिम मात्रा तक नहीं पहुंचता.

टेट्राथियोनेट शोरबा के लिए आधा आधार

निर्जलित माध्यम का 46 ग्राम वजन और बाँझ आसुत जल के 1 लीटर में निलंबित करें। मिश्रण और गर्मी पूरी तरह से भंग होने तक, यह केवल कुछ मिनटों के लिए उबाल कर सकता है। एक आटोक्लेव में जीवाणुरहित न करें। माध्यम के आधार को लगभग 45 डिग्री सेल्सियस तक ठंडा करने की अनुमति है और उस समय आयोडीन युक्त समाधान के 20 मिलीलीटर को जोड़ा जाता है।.

समाधान को जोड़ने के बाद आयोडुरा को माध्यम में तुरंत इस्तेमाल किया जाना चाहिए। यदि आप संपूर्ण मिश्रण का उपयोग नहीं करना चाहते हैं, तो निम्नानुसार आगे बढ़ें:

आधार माध्यम का 10 मिलीलीटर ट्यूबों में वितरित किया जाता है, और आयोडीन युक्त समाधान का केवल 0.2 मिलीलीटर उन लोगों के साथ जोड़ा जाता है जिन्हें नमूनों के साथ टीका लगाया जाता है।.

जिनका उपयोग नहीं किया जा रहा है, उन्हें अभी भी एक रेफ्रिजरेटर में संग्रहीत किया जा सकता है, हालांकि, जैसा कि माध्यम निष्फल नहीं है, आदर्श को आवश्यक सटीक मात्रा तैयार करना है।.

आयोडीन युक्त आयोडीन विलयन को जोड़ने से पहले माध्यम का रंग दूधिया सफेद होता है और इसे घने अवक्षेप के साथ भूरा होने के बाद सफेद किया जाता है। मनाया गया अवक्षेप सामान्य है और कैल्शियम कार्बोनेट से मेल खाता है जो भंग नहीं होता है। माध्यम का अंतिम पीएच 8.4 pH 0.2 है.

-तेज हरे रंग के साथ टेट्राथिओनेट शोरबा संस्करण

चमकीले हरे रंग के साथ टेट्राथिओनेट शोरबा तैयार करने के लिए ऊपर वर्णित सभी चरणों को पूरा किया जाता है, लेकिन इसके अलावा, 0.1% पर तैयार उज्ज्वल हरे घोल के 10 मिलीलीटर मिश्रण में जोड़ा जाएगा।.

चमकीला हरा

यह समाधान इस प्रकार तैयार किया गया है:

100 ग्राम चमकीले हरे रंग का वजन और 100 मिलीलीटर आसुत जल में निलंबित करें। अपने कुल विघटन को प्राप्त करने के लिए उबलने तक गरम करें। एम्बर बोतल में सहेजें.

उपयोग

मल के नमूने (स्टूल कल्चर) के लिए प्रोटोकॉल निम्नानुसार है:

तैयार टेट्राथिओनेट शोरबा के 10 मिलीलीटर के साथ एक ट्यूब में ठोस स्टूल के 1 ग्राम या तरल मल के 1 मिलीलीटर का टीकाकरण करें। सख्ती से हिलाएं और 6-24 घंटे के लिए 43 डिग्री सेल्सियस पर एरोबियोसिस में सेते हैं.

इसके बाद, शोरबा के 10 से 20 μl का एक विभाज्य ले लो और इसे साल्मोनेला के लिए एक मध्यम चयनात्मक में उपसंस्कृत करें, जैसे कि एसएस अगर, एक्सएलडी अगर, उज्ज्वल हरा अगर, हेक्टोएन एंटरटेनर अगर।.

समानांतर में, साल्मोनेला के लिए चयनात्मक मीडिया को संवर्धन के बिना प्रत्यक्ष नमूना (मल) के साथ टीका लगाया जाना चाहिए। रेक्टल स्वैब के नमूनों के लिए, ट्यूब में एकत्रित सामग्री को डाउनलोड करें और ऊपर वर्णित अनुसार आगे बढ़ें.

भोजन के नमूने के लिए 10 ग्राम ठोस भोजन या 10 मिलीलीटर तरल भोजन का वजन करें और 100 मिलीलीटर रेडी-टू-यूट टेट्राथिओनेट शोरबा के साथ एक बोतल डालें। ऊपर वर्णित तरीके से आगे बढ़ें लेकिन 37 ° C पर सेते हैं.

जैसा कि देखा जा सकता है, नमूना और शोरबा के बीच का संबंध हमेशा 1:10 होगा.

गुणवत्ता नियंत्रण

संस्कृति माध्यम का परीक्षण करने के लिए, ज्ञात नियंत्रण उपभेदों का उपयोग किया जा सकता है। सबसे अधिक उपयोग एटीसीसी प्रमाणित उपभेद हैं.

उपयोग किए जाने वाले उपभेद हैं साल्मोनेला टाइफिम्यूरियम एटीसीसी 14028, साल्मोनेला गर्भपात डीएसएम 4224, साल्मोनेला एंटरिटिडिस एटीसीसी 13076, एस्केरिचिया कोलाई एटीसीसी 25922, एंटरोकोकस फेसेलिस ATCC 19433 और स्टैफिलोकोकस ऑरियस एटीसीसी 25923.

साल्मोनेला उपभेदों के लिए एक उत्कृष्ट विकास की उम्मीद है, जबकि एस्केरिचिया कोलाई एक कमजोर या नियमित विकास हो सकता है, और ग्राम पॉजिटिव स्ट्रेन (एंटरोकोकस और स्टैफिलोकोकस) आंशिक रूप से या पूरी तरह से बाधित होते हैं.

सिफारिशें

-चूंकि यह माध्यम प्रोटीज के विकास को बाधित नहीं करता है, इसलिए इस माइक्रोबियल स्ट्रेन के विकास को रोकने के लिए कुछ प्रयोगशालाएं 40 मिलीग्राम / एल के नोवोबीसिन का उपयोग करती हैं। एंटीबायोटिक को आयोडीन युक्त आयोडीन समाधान से पहले जोड़ा जाना चाहिए.

-आयोडीन युक्त आयोडीन समाधान सहित माध्यम तैयार करने के बाद, यह टीकाकरण के 2 घंटे से अधिक नहीं होना चाहिए.

-ट्यूबों में माध्यम को वितरित करने के समय, गठित अवक्षेप को फिर से शुरू करने के लिए मिश्रण को लगातार समरूप बनाना चाहिए.

-कम दूषित नमूनों में टेट्राथिओनेट शोरबा 35-37 ° C पर ऊष्मायन किया जाता है, और अत्यधिक दूषित नमूनों में 43 ° C पर ऊष्मायन की सिफारिश की जाती है।.

संदर्भ

1. कोना प्रादेशिसा प्रयोगशाला। 2010. म्यूलर-कॉफ़मैन के अनुसार टेट्राथिओनेट शोरबा का आधार। इसमें उपलब्ध:
2. बीडी प्रयोगशालाओं 2003. टेट्रथियोनेट ब्रोथ बेस। इसमें उपलब्ध:
3. प्रयोगशालाओं ब्रिटानिया। 2015 टेथियनेट ब्रोथ बेस। इसमें उपलब्ध:
4. मीडिया बीबीएल। 2005. साल्मोनेला प्रजाति की खेती के लिए ट्यूब की तैयारी.
5. फोर्ब्स बी, साहम डी, वीसफेल्ड ए (2009)। बेली एंड स्कॉट का माइक्रोबायोलॉजिकल निदान। 12 एड। संपादकीय पानामेरिकाना एस.ए. अर्जेंटीना.
6. Flores-Abuxapqui J, Puc-Franco M, Heredia-Navarrete M, Vivas-Rosel M, Franco-Monsreal J. सोडियम सेलेनाइट और सोडियम के टेट्राथिनेट की मीडिया मीडिया के बीच तुलना, दोनों को 37 ° C और 42 ° C पर ऊष्मायन के लिए जोड़ा जाता है। के अलगाव साल्मोनेला एसपीपी वाहक मल का. रेव बायोमेड 2003; 14 (4): 215-220