पेप्टोन पानी नींव, तैयारी और उपयोग करता है

पेप्टोनडा पानी यह एक गैर-चयनात्मक तरल संवर्धन माध्यम है, जिसका उपयोग मुख्य रूप से खाद्य नमूनों या अन्य सामग्रियों के लिए एक मंदक के रूप में किया जाता है। रासायनिक दृष्टिकोण से इसका मतलब बहुत सरल है, इसमें मांस, सोडियम क्लोराइड और पानी के पेप्टोन होते हैं.

इसका एक निश्चित पोषण मूल्य है, जो नमूने को समृद्ध करने की अनुमति देता है। अगर वहाँ बैक्टिरिया बैक्टीरिया होते हैं तो इसका मतलब व्यवहार्यता को ठीक करने की शक्ति है। यह विशेष रूप से एंटरोबैक्टीरिया परिवार एंटरोबैक्टीरिया से संबंधित बैक्टीरिया की वसूली में उपयोगी है.

साल्मोनेलस की वसूली के मामले में, बफ़र्ड पेप्टोनडा वॉटर वेरिएंट के उपयोग की सिफारिश की जाती है; यह नमूने के पूर्व संवर्धन के साधन के रूप में कार्य करता है, इस मामले में इसमें अन्य तत्व होते हैं जैसे कि डिसोडियम फॉस्फेट और डिपोजेशियम फॉस्फेट.

आम तौर पर peptone पानी तटस्थ पीएच पर तैयार किया जाता है, हालांकि अन्य वेरिएंट पीएच है जहां आवश्यक 8.5 ± 0.2 (क्षारीय), जीवाणु जैसे alkalophilic अलग करने के लिए, करना है क्योंकि विब्रियो कोलेरा.

दूसरी ओर, इस माध्यम का उपयोग कार्बोहाइड्रेट किण्वन परीक्षणों के लिए आधार माध्यम के रूप में किया जा सकता है.

सूची

• 1 फाउंडेशन
• 2 तैयारी
  • 2.1 घर की तैयारी (गैर-वाणिज्यिक)
  • २.२ व्यावसायिक माध्यम का उपयोग कर तैयारी
  • 2.3 किण्वन परीक्षणों की तैयारी
  • 2.4 पेप्टोनडा पानी के अन्य प्रकार
• 3 का उपयोग करें
  • 3.1 मल के नमूने
  • 3.2 खाद्य नमूने
• 4 गुणवत्ता नियंत्रण
• 5 सीमाएँ
• 6 संदर्भ

आधार

Peptones, बैक्टीरियल वृद्धि, विशेष रूप से नाइट्रोजन और छोटी श्रृंखला एमिनो एसिड के लिए आवश्यक पोषक तत्वों प्रदान करते हैं, जबकि सोडियम क्लोराइड आसमाटिक संतुलन बनाए रखता है.

इसके अलावा, माध्यम औद्योगिक प्रक्रियाओं द्वारा क्षतिग्रस्त बैक्टीरिया कोशिकाओं को फैलाने, समरूप बनाने और मरम्मत करने की अनुमति देता है।.

एक मंदक के रूप में यह आदर्श है, प्रभावी रूप से शारीरिक समाधान (एसएसएफ) या फॉस्फेट बफर (पीबीएस) की जगह.

बैक्टीरिया की वृद्धि इसकी स्पष्टता को देखकर स्पष्ट होती है.

तैयारी

घर का बना तैयारी (गैर-वाणिज्यिक)

पेप्टोन का 1 ग्राम और सोडियम क्लोराइड का 8.5 ग्राम वजन, आसुत जल के 1 लीटर में भंग। पीएच को 7.0 से समायोजित किया जाना चाहिए। इसके लिए आप 1 एन सोडियम क्लोराइड का उपयोग कर सकते हैं.

वाणिज्यिक माध्यम का उपयोग कर तैयारी

निर्जलित माध्यम के 15 ग्राम वजन और आसुत जल के एक लीटर में भंग। मिश्रण को होमोजिनाइज़ करें। यदि आवश्यक हो, तो कुल विघटन में सहायता के लिए मिश्रण को 1 मिनट के लिए उबाला जाता है। आवश्यकतानुसार १०० मिली शीशियों या १० मिली ट्यूबों में परोसें। 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर आटोक्लेव.

रेफ्रिजरेटर में ठंडा और उपयोग या स्टोर करें। माध्यम का अंतिम पीएच 7.2 medium 0.2 है.

निर्जलित माध्यम का रंग हल्का बेज है और तैयार प्रकाश एम्बर है.

किण्वन परीक्षणों की तैयारी

ऊपर तैयारी निष्फल हो -before 1% की एक अंतिम एकाग्रता, और अधिक एंड्राडे सूचक (एसिड fuchsin) या फिनोल लाल (0.018 ग्राम / एल) के लिए कार्बोहाइड्रेट जोड़ा जाना चाहिए। ट्यूबों के लिए गैस गठन के अवलोकन के लिए एक घंटी डरहम जगह थे.

अन्य पेप्टोनडा जल संस्करण

-पेप्टोन का पानी बफर या बफर हो गया

यह कैसिइन एंजाइमी हायड्रोलायसेट, सोडियम क्लोराइड, पोटेशियम dihydrogen फॉस्फेट और हाइड्रोजन फॉस्फेट dodecahydrate सोडियम होता है। अंतिम पीएच 7.0 ± 0.2 है.

इसकी तैयारी के लिए, निर्जलित माध्यम के 20 ग्राम का वजन करें और आसुत जल के 1 लीटर में भंग करें। लगभग 5 मिनट तक खड़े रहने दें। पूरी तरह से भंग होने तक 1 मिनट के लिए गरम करें.

आवश्यकतानुसार उपयुक्त बोतलों में डालें। 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर आटोक्लेव का उपयोग कर जीवाणुरहित करें.

-क्षारीय पेप्टोनयुक्त पानी

निर्जलित माध्यम का 25 ग्राम वजन और 1 लीटर पानी में भंग। जैसा कि ऊपर वर्णित है आगे बढ़ें। पीएच 8.3 से 8.7 तक होता है.

उपयोग

नमूना सीधे रखकर इनोकुलम किया जाता है.

इसका उपयोग नमूनों को पतला करने के लिए किया जाता है, खासकर जब यह संदेह होता है कि क्षतिग्रस्त बैक्टीरिया हो सकते हैं। आमतौर पर तनु 1:10 और 1: 100 होती है.

35-37 डिग्री सेल्सियस पर एरोबियोसिस में 24 घंटे के लिए सेते हैं.

मल के नमूने

साल्मोनेला की तलाश कर रहे मल के नमूनों के लिए, पूर्व-संवर्धन माध्यम के रूप में बफर या बफ़र्ड पानी के उपयोग की सिफारिश की जाती है।.

ऐसा करने के लिए, इस प्रकार आगे बढ़ें:

यदि मल बनता है, तो नमूने का 1 ग्राम लें। यदि वे तरल हैं, तो 1 मिलीलीटर मल लें और 10 मिलीलीटर बफर वाले पानी के साथ एक ट्यूब में निलंबित करें। रेक्टल स्वैब के मामले में, स्वैब में मौजूद सामग्री को बफ़र्ड पेप्टोनेटेड पानी के साथ ट्यूब में डिस्चार्ज करें.

सभी मामलों में, नमूने को बहुत अच्छी तरह से मिलाएं और एकरूप करें.

18 से 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर सेते हैं। बाद में एक संवर्धन शोरबा में उप-खेती करें जैसे कि सेलेनाइट सिस्टीन शोरबा या टेट्राथिओनेट शोरबा 37 डिग्री सेल्सियस पर 18-24 घंटों के लिए। अंत में साल्मोनेला के लिए चयनात्मक मीडिया में खेती करें, जैसे कि एसएस अगर, एक्सएलडी अगर, हेक्टोन अगार, आदि।.

भोजन के नमूने

peptone पानी संवर्धन मध्यम या के रूप में सरल मंदक के रूप में प्रयोग किया जाता है, लेकिन जैसा कि पहले से ही वर्णित है, तो साल्मोनेला प्रजातियों की खोज कर रहे हैं, एक पूर्व संवर्धन के रूप में प्रयोग किया जाता है.

खाद्य पदार्थ इस प्रकार आगे बढ़ते हैं:

ठोस खाद्य पदार्थों के लिए नमूने के 25 ग्राम का वजन होता है और तरल खाद्य पदार्थों के लिए इसका 25 मिलीलीटर माप होता है। प्लेस ने कहा कि 225 मिली पेप्टोनेटेड पानी वाले फ्लास्क में भाग। मिक्स और नमूना समरूप.

यदि यह संदेह है कि माइक्रोबियल लोड उच्च धारावाहिक dilutions या decimals है कॉलोनी बनाने इकाइयों (CFU) की गिनती की सुविधा के लिए बनाया जा सकता है.

Dilutions की संख्या नमूना के प्रकार और विश्लेषणात्मक अनुभव पर निर्भर करेगा.

यदि इसके विपरीत यह संदेह है कि माइक्रोबियल लोड बहुत कम है, तो तनु बनाना आवश्यक नहीं है। इसके बाद, चयनात्मक मीडिया में उपसंस्कृति.

समुद्र से भोजन के मामले में, जैसे समुद्री भोजन, मछली, दूसरों के बीच में, की तलाश में विब्रियो कोलेरा या अन्य विब्रियो प्रजातियों, पीएच 8.5 (क्षारीय पेप्टोनेटेड पानी) के लिए समायोजित पेप्टोन पानी का उपयोग किया जाना चाहिए.

गुणवत्ता नियंत्रण

तैयार किए गए प्रत्येक बैच से, 37 डिग्री सेल्सियस पर एरोबायोसिस में 24 घंटे के लिए एक से दो ट्यूबों को बिना टीकाकरण के ऊष्मायन किया जाना चाहिए। समय के अंत में, कोई भी मैलापन या रंग परिवर्तन नहीं देखा जाना चाहिए.

इसके अलावा, प्रसिद्ध नियंत्रण उपभेदों का उपयोग उनकी प्रभावशीलता का मूल्यांकन करने के लिए किया जा सकता है:

इसके लिए, निम्नलिखित जीवाणु उपभेदों का उपयोग किया जा सकता है: एस्केरिचिया कोलाई एटीसीसी 25922, एस्केरिचिया कोलाई एटीसीसी 8927, स्टैफिलोकोकस ऑरियस एटीसीसी 6538, स्यूडोमोनास एरुगिनोसा एटीसीसी 9027, साल्मोनेला टाइफिम्यूरियम एटीसीसी 1428, साल्मोनेला एंटरिटिडिस एटीसीसी 13076.

सभी मामलों में एक संतोषजनक माइक्रोबियल विकास की उम्मीद की जाती है, जो माध्यम की अशांति से मनाया जाता है.

सीमाओं

-निर्जलित माध्यम बहुत हीड्रोस्कोपिक है, इसलिए इसे नमी से दूर रखा जाना चाहिए.

-यदि किसी प्रकार की गिरावट देखी जाती है, तो माध्यम का उपयोग नहीं किया जाना चाहिए.

-निर्जलित संस्कृति माध्यम को 10 - 35 ° C के बीच संग्रहित किया जाना चाहिए

-तैयार माध्यम को प्रशीतित रखा जाना चाहिए (2-8 ° C).

संदर्भ

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