Vogel-Johnson Agar नींव, तैयारी और उपयोग करता है



वोगेल-जॉनसन एगर एक ठोस, चयनात्मक और विभेदक संस्कृति माध्यम है, जिसे विशेष रूप से अलगाव के लिए तैयार किया गया है स्टैफिलोकोकस ऑरियस. इस माध्यम को 1960 में ज़ोगोवित्ज़, इवांस और निवेन द्वारा 1955 में तैयार ग्लाइसीन टेलराइट एगर के संशोधन से वोगेल और जॉनसन द्वारा बनाया गया था।.

संशोधन में मध्यम में मौजूद mannitol की एकाग्रता को बढ़ाने और एक पीएच संकेतक के निगमन में शामिल था। वर्तमान सूत्र ट्रिप्टीन, यीस्ट एक्सट्रैक्ट, मैनिटोल, डिपोटेशियम फॉस्फेट, लिथियम क्लोराइड, ग्लाइसिन, फिनोल रेड, अगर, 1% पोटेशियम टेल्यूराइट घोल और पानी से बना है।.

यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि अन्य साधन हैं, जैसे कि वोगेल-जॉनसन अगर, के अलगाव के लिए चयनात्मक हैं एस ऑरियस, नमकीन मैनिटोल अगर और बेयर्ड पार्कर एगर जैसे। इस अर्थ में, यह कहा जा सकता है कि वोगेल-जॉनसन एगर की नींव नमकीन मैनिटोल एगर और बेयर्ड पार्कर अगर के बीच का मिश्रण है।.

की पहली कॉलोनियों में एस ऑरियस वे मैननिटोल को किण्वित करके और पीएच संकेतक को पीले रंग में बदल देते हैं। दूसरी ओर, दूसरे में एस ऑरियस यह टेल्यूरियम को टेलुराइट को कम करने और काली कालोनियों के लिए ग्रे बनाने की विशेषता है। दोनों गुणों को वोगेल-जॉनसन एगर में मनाया जाता है.

यह माध्यम, अपने समकक्षों की तरह, का पता लगाने के लिए उपयोगी है स्टैफिलोकोकस ऑरियस खाद्य नमूनों में, औद्योगिक उत्पादों के सैनिटरी नियंत्रण और नैदानिक ​​नमूनों में.

सूची

  • 1 फाउंडेशन
    • 1.1 पोषक तत्वों का योगदान
    • 1.2 चयनात्मक शक्ति
    • १.३ विभेदकारी शक्ति
    • 1.4 आसमाटिक संतुलन और जमना एजेंट
  • 2 तैयारी
    • 2.1 1% डब्ल्यू / वी पोटेशियम टेलराइट समाधान
    • २.२ वोगेल-जॉनसन अगर आधार माध्यम
  • 3 का उपयोग करें
  • 4 गुणवत्ता नियंत्रण
  • 5 संदर्भ

आधार

पोषक तत्वों का योगदान

वोगेल-जॉनसन माध्यम में ट्रिप्टीन और खमीर निकालने शामिल हैं; दोनों पदार्थ लंबी श्रृंखला वाले अमीनो एसिड प्रदान करते हैं जो बैक्टीरिया के विकास के लिए आवश्यक कार्बन और नाइट्रोजन स्रोतों के रूप में काम करते हैं। इस माध्यम में बढ़ने में सक्षम बैक्टीरिया इन पदार्थों से पोषक तत्वों को ले जाएगा.

चयनात्मक शक्ति

कोगुलस-पॉजिटिव स्टैफिलोकोसी के विकास के पक्ष में, वोगेल-जॉनसन एगर ग्राम-नकारात्मक बैक्टीरिया और यहां तक ​​कि कुछ ग्राम-पॉजिटिव बैक्टीरिया के विकास को बाधित करने में सक्षम है। अवरोधक पदार्थ पोटेशियम टेलूराइट, लिथियम क्लोराइड और ग्लाइसिन हैं.

अंतर शक्ति

पदार्थ जो इस अंतर को मध्यम बनाते हैं वे हैं मैनिटोल और पोटेशियम टेलराइट। मैनिटोल एक कार्बोहाइड्रेट है, और जब इसे किण्वित किया जाता है, तो एसिड उत्पन्न होते हैं जो मध्यम से लाल से पीले रंग में बदल जाते हैं, जो फिनोल लाल पीएच संकेतक की उपस्थिति के लिए धन्यवाद होता है.

जबकि, रंगहीन टेलराइट जब धात्विक मुक्त टेलूराइड में कम हो जाता है, तो काले रंग के लिए एक गहरे भूरे रंग का होता है.

स्टैफिलोकोकस ऑरियस mannitol किण्वित करता है और टेल्यूरियम को टेल्यूरियम में कम करता है। यही कारण है कि ठेठ कालोनियों के एस ऑरियस इस माध्यम में वे भूरे या काले होते हैं जो पीले रंग के माध्यम से घिरे होते हैं.

बैक्टीरिया जो इस माध्यम में विकसित होते हैं और टेलुराइट या किण्वन मैनिटोल को कम नहीं करते हैं, पेप्टोन के उपयोग द्वारा माध्यम के क्षारीयकरण के कारण, एक लाल रंग से घिरे पारदर्शी कालोनियों, यहां तक ​​कि मूल रंग की तुलना में अधिक तीव्र होगा।.

दूसरी ओर, बैक्टीरिया जो कि टेलुराइट को कम करते हैं, लेकिन किण्वन नहीं करते हैं, मैनिटिटॉल ग्रे या काले रंग की कॉलोनियों के रूप में बढ़ेगा, जो गहरे लाल रंग से घिरा होगा.

यदि माध्यम पोटेशियम टेलूराइट के अतिरिक्त, कालोनियों के बिना तैयार किए गए थे एस ऑरियस वे पीले कालोनियों के रूप में विकसित होंगे, जो एक पीले माध्यम से घिरे हुए हैं, जैसे कि नमकीन मैनिटोल अगर में.

आसमाटिक संतुलन और जमना एजेंट

डिपोटेशियम फॉस्फेट माध्यम के आसमाटिक संतुलन को बनाए रखता है और पीएच को तटस्थता 7.2 को समायोजित करता है। जबकि अगरर संस्कृति माध्यम को ठोस स्थिरता देता है.

तैयारी

1% पोटेशियम टेल्यूराइट घोल w / v

यह समाधान निर्जलित माध्यम में शामिल नहीं है, क्योंकि इसे आटोक्लेव में निष्फल नहीं किया जा सकता है। इस कारण इसे अलग से तैयार किया जाता है और निष्फल माध्यम में जोड़ा जाता है.

कुछ कमर्शियल हाउस रेडी-टू-यूज़ 1% पोटेशियम टेल्यूराइट सॉल्यूशन बेचते हैं। यदि आप प्रयोगशाला में तैयार करना चाहते हैं, तो निम्नानुसार आगे बढ़ें:

पोटेशियम टेलराइट का 1.0 ग्राम वजन और आसुत जल के 100 मिलीलीटर को मापें। पोटेशियम के टेल्यूराइट को पानी के एक भाग में घोलें और तब तक पानी की मात्रा पूरी करें जब तक आप 100 मिलीलीटर तक नहीं पहुंच जाते। निस्पंदन विधि द्वारा समाधान जीवाणुरहित.

वोगेल-जॉनसन एगर बेस मीडियम

निर्जलित माध्यम का 60 ग्राम वजन, और आसुत जल के 1 लीटर में भंग। मिश्रण को उबलने के लिए गर्म किया जाता है ताकि पूर्ण विघटन में सहायता मिल सके। विघटन प्रक्रिया के दौरान माध्यम अक्सर उत्तेजित होता है.

15 मिनट के लिए दबाव के 15 पाउंड और 121 डिग्री सेल्सियस पर एक आटोक्लेव में बाँझ। आटोक्लेव से निकालें और मध्यम 45 से 50 डिग्री सेल्सियस के तापमान तक पहुंचने तक खड़े होने की अनुमति दें। पहले से तैयार पोटेशियम टेलराइट घोल का 20 मिलीलीटर 1% में मिलाएं.

मिक्स और बाँझ पेट्री डिश में डालना। उपयोग करने तक रेफ्रिजरेटर में बाद के भंडारण के लिए सजीले टुकड़े में ठोस और ऑर्डर करने की अनुमति दें.

तैयार माध्यम का अंतिम पीएच 7.2 prepared 0.2 पर होना चाहिए.

नमूना लगाने से पहले, तब तक प्रतीक्षा करें जब तक कि प्लेट परिवेश का तापमान न ले ले.

तैयार माध्यम का रंग लाल है.

उपयोग

हालांकि यह के अलगाव के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है एस ऑरियस किसी भी प्रकार के नमूनों में, इसका उपयोग ज्यादातर फार्मास्यूटिकल उत्पादों, सौंदर्य प्रसाधन और भोजन के सूक्ष्मजीवविज्ञानी विश्लेषण के लिए किया जाता है.

यह अनुशंसा की जाती है कि इनोक्यूलम घना हो। सीडिंग प्लैटिनम हैंडल के साथ स्ट्रिपिंग या ड्रिग्ल्स्की स्पैटुला के साथ सतह द्वारा किया जा सकता है.

एरोबियोसिस में 24 से 48 घंटों के लिए प्लेटों को 35-37 ° C पर ऊष्मायन किया जाता है.

गुणवत्ता नियंत्रण

वोगेल-जॉनसन माध्यम की गुणवत्ता नियंत्रण को पूरा करने के लिए, निम्नलिखित नियंत्रण उपभेदों का उपयोग किया जा सकता है:

स्टैफिलोकोकस ऑरियस एटीसीसी 25923, स्टैफिलोकोकस ऑरियस एटीसीसी 6538, स्टेफिलोकोकस एपिडर्मिडिस एटीसीसी 12228, एस्केरिचिया कोलाई एटीसीसी 25922 या प्रोटीन मिराबिलिस एटीसीसी 43071.

अपेक्षित परिणाम निम्नानुसार है: के उपभेदों के लिए एस ऑरियस पीले रंग के माध्यम से घिरी काली कालोनियों के साथ संतोषजनक वृद्धि। को एस एपिडर्मिडिस लाल माध्यम से घिरे पारभासी या काली उपनिवेशों के साथ नियमित वृद्धि.

इसी तरह, के लिए ई। कोलाई यह उम्मीद की जाती है कि कुल अवरोध होगा, और इसके लिए प्रोटीन मिराबिलिस आंशिक या कुल निषेध; अगर यह बढ़ता है तो यह बहुत कम करेगा और कालोनियों को मध्यम लाल रंग से घिरा होगा.

संदर्भ

  1. बीडी प्रयोगशालाओं। वीजे (वोगेल और जॉनसन आगर)। 2006. पर उपलब्ध: bd.com
  2. प्रयोगशालाओं ब्रिटानिया। वोगेल- जॉनसन आगर। 2015 में उपलब्ध: britanialab.com
  3. प्रयोगशालाओं ब्रिटानिया। पोटेशियम टेलराइट। 2015 में उपलब्ध: britania.com
  4. मल्टीमीडिया प्रयोगशाला। वोगेल- जॉनसन आगर मीडियम। 2018. पर उपलब्ध: himedialabs.com/TD/MU023.pdf
  5. वोगेल- जॉनसन आगर बेस। मर्क माइक्रोबायोलॉजी मैनुअल। 12 वें संस्करण, पीपी 502-503। इसमें उपलब्ध: उपयोगकर्ता / टीम / डाउनलोड
  6. विकिपीडिया के योगदानकर्ता, "ओगर वोगेल जॉनसन", विकिपीडिया को विश्वकोश लिव्रे,   disponível em: wikipedia.org.
  7. वेनेजुएला की मानक वाचा 1292-89। (1989)। खाद्य। अलगाव और गिनती स्टैफिलोकोकस ऑरियस. इसमें उपलब्ध:sencamer.gob.ve