उज्ज्वल हरी अगर नींव, तैयारी और उपयोग

चमकीला हरा अगर यह एक ठोस संस्कृति माध्यम है, जिसमें उच्च स्तर की चयनात्मकता है। यह विशेष रूप से जीनस साल्मोनेला के उपभेदों के अलगाव के लिए उपयोग किया जाता है, हालांकि कुछ अपवाद हैं, जैसे कि टाइफी और पैराटीफी प्रजातियां जो इस माध्यम में नहीं बढ़ती हैं.

जीनस साल्मोनेला की खोज अक्सर मल, पानी या भोजन के नमूनों में होती है। इस अर्थ में, यह माध्यम बहुत उपयोगी हो सकता है। इस आगर को 1925 में क्रिस्टेंसन, लेस्टर और जर्गेंस द्वारा बनाया गया था, जिसे बाद में कॉफ़मैन द्वारा संशोधित किया गया था.

यह जानवरों के ऊतक के पेप्टिक पाचन और कैसिइन के अग्नाशयी पाचन से प्लुरिप्टनस से बना होता है, इसमें खमीर निकालने, सोडियम क्लोराइड, लैक्टोज, सूक्रोज, फिनोल लाल, चमकदार हरे और अगर-अग्र भी होते हैं.

यह सबसे बैक्टीरिया के लिए एक बहुत ही दुर्गम माध्यम होने की विशेषता है, साल्मोनेला के विकास के पक्ष में है, हालांकि कुछ कॉलिफॉर्म इसमें निर्वाह करने में सक्षम हैं, कमजोर रूप से विकसित हो रहे हैं.

यह उजागर करना महत्वपूर्ण है कि इस माध्यम में शिगेला जीनस विकसित नहीं होता है और न ही साल्मोनेला टाइफिम्यूरियम, या साल्मोनेला पैराटीफी. इसलिए, यदि इन सूक्ष्मजीवों को अलग करने की इच्छा है, तो अन्य साधनों का उपयोग किया जाना चाहिए, जैसे कि एक्सएलडी अगर, अन्य।.

सूची

• 1 फाउंडेशन
  • १.१ उज्ज्वल हरी अगर
  • 1.2 उज्ज्वल हरी अगर (बीजीए) के वेरिएंट
• 2 तैयारी
• 3 उपयोग / अनुप्रयोग
• 4 गुणवत्ता नियंत्रण
• 5 संदर्भ

आधार

चमकीला हरा अगर

माध्यम बनाने वाले प्रत्येक घटक में एक विशिष्ट कार्य होता है जो अगर की विशेषताओं और गुणों को निर्धारित करता है.

प्लुरिप्पटन और खमीर का अर्क पोषक तत्वों का स्रोत है जहां से सूक्ष्मजीव अपने विकास के लिए आवश्यक नाइट्रोजन और खनिज लेते हैं। लैक्टोज और सुक्रोज सूक्ष्मजीवों के लिए ऊर्जा स्रोत हैं जो उन्हें किण्वित करने में सक्षम हैं.

चमकीला हरा अवरोधक पदार्थ है जो ग्राम-पॉजिटिव बैक्टीरिया के विकास को रोकता है और बड़ी संख्या में ग्राम-नकारात्मक सूक्ष्मजीव हैं.

सोडियम क्लोराइड माध्यम को आसमाटिक स्थिरता प्रदान करता है। जबकि फिनोल लाल पीएच का संकेतक है, यह कार्बोहाइड्रेट के किण्वन से एसिड के उत्पादन का पता लगाने पर रंग बदल जाता है.

लैक्टोज और सुक्रोज की गैर-किण्वन कालोनियां लाल रंग की पृष्ठभूमि पर सफेद रंग, गुलाबी या पारदर्शी के इस माध्यम में बढ़ती हैं। उदाहरण के लिए, जीनस साल्मोनेला के बैक्टीरिया.

जबकि लैक्टोज-किण्वन करने वाले बैक्टीरिया या सुक्रोज इस माध्यम में बढ़ने में सक्षम होते हैं, वे पीले-हरे रंग की पृष्ठभूमि पर हरी-पीली या हरी-पीली कॉलोनियों का विकास करते हैं। उदाहरण के लिए, एस्केरिचिया कोलाई और क्लेबसिएला निमोनिया.

चमकीले हरे अगर (बीजीए) के वेरिएंट

चमकीले हरे अगर के अन्य रूप हैं; novobiocin हरी अगर उज्ज्वल ग्लूकोज (NBG) और novobiocin अगर उज्ज्वल हरी ग्लिसरॉल लैक्टोज (NBGL).

नोवोबोसिन अगर चमकीले हरे रंग का ग्लूकोज (NBG)

इसमें ट्राइप्टिसेज़ सोया अगर, फेरिक अमोनियम साइट्रेट, सोडियम थायोसल्फेट पेंटाहाइड्रेट, फिनोल लाल, ग्लूकोज, चमकीला हरा, नोवोबीसिन और आसुत जल शामिल हैं.

मल के नमूनों से साल्मोनेला कालोनियों के अलगाव के लिए कार्य करता है.

इस मामले में चमकीले हरे और नवोबोसिन ऐसे अवरोधक पदार्थ हैं जो ग्राम पॉजिटिव बैक्टीरिया और कुछ ग्राम नकारात्मक सूक्ष्मजीवों के विकास को रोकते हैं.

सोडियम थायोसल्फेट सल्फर का स्रोत है और फेरिक साइट्रेट लोहे का स्रोत है, दोनों ही फेरिक सल्फाइड के एक काले अवक्षेप के गठन के माध्यम से हाइड्रोजन सल्फाइड के उत्पादन को प्रकट करने के लिए आवश्यक हैं.

ग्लूकोज किण्वित कार्बोहाइड्रेट है और फिनोल लाल पीएच संकेतक है.

इस माध्यम में साल्मोनेला उपनिवेश एक लाल केंद्र से घिरे एक काले केंद्र के साथ बड़े विकसित होते हैं और उसके बाद एक स्पष्ट दृश्य क्षेत्र होता है। के कुछ उपभेद सिट्रोबैक्टीरिया फ्रीन्डि साल्मोनेला के समान कालोनियों का उत्पादन.

चमकीले हरे रंग की नोवोबीसिन अगर ग्लिसरॉल लैक्टोज (NBGL)

इस माध्यम में ट्रायप्टिसेज़ सोया अगर, फेरिक अमोनियम साइट्रेट, सोडियम थायोसल्फेट, लैक्टोज, ग्लिसरॉल, चमकीला हरा, नोवोबीसिन और डिस्टिल्ड वाटर शामिल हैं।.

पिछले एक के साथ इस माध्यम का अंतर यह है कि ग्लूकोज को लैक्टोज द्वारा बदल दिया जाता है और ग्लिसरॉल और फिनोल लाल का उपयोग नहीं किया जाता है.

हाइड्रोजन सल्फाइड के उत्पादन से, साल्मोनेला प्रजातियों को अलग करने के लिए माध्यम का उपयोग किया जाता है, कालोनियों का विकास काला होता है.

केवल उपनिवेश जो ग्लिसरॉल या लैक्टोज से एसिड का उत्पादन नहीं करते हैं वे एक एच उत्पादन प्राप्त करते हैं₂यह पर्याप्त है, क्योंकि कम पीएच एच के गठन में हस्तक्षेप करता है₂एस। इसका परिणाम अधिकांश प्रोटीन और सिट्रोबैक्टीरिया प्रजातियों के लिए रंगहीन कालोनियों में होता है.

तैयारी

-व्यावसायिक रूप से प्राप्त निर्जलित माध्यम का 58 ग्राम वजन। इसे एक लीटर डबल-डिस्टिल्ड पानी में मिलाएं। मिक्स करें, कुछ मिनट खड़े रहें और पूरी तरह से घुलने तक गर्मी स्रोत में तैयारी जमा करें.

-15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर आटोक्लेव, नसबंदी समय से अधिक नहीं है.

-बाँझ पेट्री डिश में भी गर्म होने दें। अंतिम पीएच 6.9। 0.2 होना चाहिए.

-उपयोग करने तक रेफ्रिजरेटर में जमने और संग्रहीत करने की अनुमति दें। प्लेटें लगाने से पहले कमरे का तापमान लेना चाहिए.

-पाउडर माध्यम हरा और एक नारंगी-भूरा या लाल-हरा रंग लेने के लिए तैयार है, जो पीएच और वाणिज्यिक घर पर निर्भर करता है। एक बहुत ही भूरा रंग सांकेतिक है कि अगर गरम किया गया था.

-एक बार अगर ठोस हो जाता है, तो इसे फिर से भरने की सिफारिश नहीं की जाती है, क्योंकि मध्यम खराब हो जाता है.

उपयोग / अनुप्रयोग

इस माध्यम का उपयोग मल के नमूनों और अन्य खाद्य पदार्थों से जीनस साल्मोनेला के उपभेदों की खोज के लिए किया जाता है।.

जैसा कि यह एक जगह पर अमानवीय वातावरण है, अगर प्रत्यक्ष नमूने का उपयोग किया जाता है, तो प्रचुर मात्रा में इनोकुलम लगाने की सलाह दी जाती है। अन्यथा, इस माध्यम में रोपण से पहले नमूनों का संवर्धन और संवर्धन किया जाना चाहिए.

जैसा कि साल्मोनेला के कुछ उपभेदों को बाधित या कठिनाई के साथ बढ़ता है, साल्मोनेला के लिए अन्य चयनात्मक agars के साथ इस माध्यम के साथ सलाह दी जाती है.

विशिष्ट साल्मोनेला के साथ सभी कॉलोनी निश्चित पहचान के लिए जैव रासायनिक परीक्षणों के अधीन होनी चाहिए.

गुणवत्ता नियंत्रण

उज्ज्वल हरी अगर माध्यम के अच्छे कामकाज का परीक्षण करने के लिए, एटीसीसी उपभेदों का उपयोग उस पर उसी के विकास का निरीक्षण करने के लिए किया जा सकता है।.

गुणवत्ता नियंत्रण के लिए उपयोग किए जाने वाले सबसे लगातार उपभेद हैं: साल्मोनेला एंटरिटिडिस एटीसीसी 13076, साल्मोनेला टाइफिम्यूरियम एटीसीसी 14028, प्रोटीन मिराबिलिस एटीसीसी 43071, क्लेबसिएला निमोनिया एटीसीसी 700603, एस्केरिचिया कोलाई एटीसीसी 25922,  शिगेला फ्लेक्सनेरी एटीसीसी 12022, स्टैफिलोकोकस ऑरियस एटीसीसी 6538.

पहले 3 को लाल पृष्ठभूमि पर गुलाबी या पारदर्शी सफेद रंग की कॉलोनियां देनी चाहिए। अच्छे विकास के साथ साल्मोनेला और विरल या नियमित वृद्धि के साथ प्रोटीन.

क्लेबसिएला और एस्केरिचिया को पीले रंग की पृष्ठभूमि के साथ पीले-पीले रंग की कालोनियों की उम्मीद है और शिगेला और स्टेफिलोकोकस के मामले में रोकना चाहिए.

निर्जलित माध्यम को कमरे के तापमान पर, एक सूखी जगह में संग्रहीत किया जाना चाहिए, क्योंकि मध्यम बहुत हीड्रोस्कोपिक है.

संदर्भ

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