आगर थायर मार्टिन नींव, तैयारी और उपयोग करता है

थायर मार्टिन आगर यह के अलगाव के लिए एक अत्यधिक पौष्टिक और चयनात्मक ठोस माध्यम है निसेरिया मेनिंगिटिडिस और निसेरिया गोनोरिया; दोनों को रोगजनक या चिकित्सकीय रूप से महत्वपूर्ण निसेरिया के रूप में जाना जाता है.

थायर मार्टिन अगर की सबसे महत्वपूर्ण विशेष विशेषताओं में से एक इसकी उच्च पोषण सामग्री है। यह संपत्ति अपरिहार्य है, क्योंकि न्यूसिसर्स पोषण के दृष्टिकोण से बहुत सूक्ष्मजीवों की मांग कर रहे हैं और इसलिए आम मीडिया में विकसित नहीं होते हैं.

दूसरी ओर, क्योंकि ये सूक्ष्मजीव सामान्य रूप से गैर-बाँझ क्षेत्रों में पाए जाते हैं, इनहिबिटर का जोड़ जो जीनस नीसेरिया के विकास को प्रभावित किए बिना, वनस्पतियों के विकास को बाधित करता है, आवश्यक है।.

यह एगर जीसी आधार अगर, हीमोग्लोबिन, अतिरिक्त पोषण की खुराक और निरोधात्मक पदार्थों (एंटीबायोटिक्स और एंटीफंगल) के एक परिसर से बना है। वाणिज्यिक घर प्रत्येक पूरक को अलग से बेचते हैं.

इस माध्यम में लगाया जाने वाला नमूना उस सूक्ष्मजीव पर निर्भर करेगा जो मांगा जा रहा है। को नेइसेरिया gonorrhoeae आदर्श नमूने योनि और मूत्रमार्ग स्राव हैं। जबकि के लिए निसेरिया मेनिंगिटिडिस सबसे अधिक उपयोग किए जाने वाले नमूने CSF, ग्रसनी और नासोफेरींजल एक्सयूडेट हैं.

सूची

• 1 फाउंडेशन
  • 1.1 जीसी आधार अगर
  • 1.2 हीमोग्लोबिन
  • १.३ संवर्धन पूरक
  • 1.4 अवरोधक
• 2 तैयारी
  • 2.1 मूल थायर मार्टिन आगर
  • 2.2 आगर थायर मार्टिन संशोधित
• 3 का उपयोग करें
• 4 गुणवत्ता नियंत्रण
• 5 सीमाएँ
• 6 संदर्भ

आधार

नीसेरियस सूक्ष्मजीवों को परेशान के रूप में वर्गीकृत किया गया है और इसलिए उनका अलगाव मुश्किल है। इस कारण से, थायर मार्टिन एक जटिल माध्यम है और इसके प्रत्येक घटक एक फ़ंक्शन को पूरा करते हैं जिसे नीचे समझाया गया है:

जीसी कोर अगार

जीसी अगर में प्रोटीज पेप्टोन, कॉर्न स्टार्च, सोडियम क्लोराइड, डिपोटेशियम फॉस्फेट, मोनोपोटेशियम फॉस्फेट और अगर-एगर शामिल हैं। इसके घटक माइक्रोबियल विकास के लिए मूल पोषक तत्व प्रदान करते हैं, विषाक्त फैटी एसिड को बेअसर करते हैं, आसमाटिक संतुलन बनाए रखने में योगदान करते हैं, पीएच को परिभाषित करते हैं और पर्यावरण को ठोस स्थिरता प्रदान करते हैं.

हीमोग्लोबिन

हीमोग्लोबिन कारकों को क्रमशः वी और एक्स (निकोटिनामाइड एडेनिन डाइन्यूक्लियोटाइड एनएडी और हेमिन प्रदान करता है)। इसलिए, इस वातावरण में, हीमोफिलस प्रजातियां भी बढ़ती हैं। हेमोग्लोबिन को निर्जलित रूप में व्यावसायिक रूप से प्राप्त किया जा सकता है या मध्यम में ताजा डीफिब्रिनेटेड गोजातीय रक्त जोड़ा जा सकता है.

संवर्धन पूरक

दूसरी ओर, थायर-मार्टिन माध्यम में एक संवर्धन पूरक जोड़ा जाना चाहिए, क्योंकि आधार अगर में निहित पोषक तत्व नीसेरिया जीनस की आवश्यकताओं के लिए पर्याप्त नहीं हैं।.

सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला संवर्धन पूरक को आइसोवाइटलेक्स कहा जाता है। इसमें ग्लुटामाइन, एडेनिन, एनएडी, कोकारबॉक्साइलेज, ग्वानिन, फेरिक नाइट्रेट, पी-एमिनो बेंजोइक एसिड, विटामिन बी 12, थियामिन और ग्लूकोज शामिल हैं। ये सभी यौगिक रोगजनक नीसेरिया के समुचित विकास के लिए आवश्यक हैं.

अवरोधकों

क्योंकि यह एक अत्यधिक पौष्टिक माध्यम है, अवरोधकों का उपयोग क्षेत्र के सामान्य वनस्पतियों के सूक्ष्मजीवों के विकास को रोकने के लिए किया जाना चाहिए और इस प्रकार जीनस नीसेरिया के अलगाव का पक्ष लिया जाता है।.

अवरोधक परिसर वैनकोमाइसिन, कोलिस्टिन और निस्टैटिन से बना है। वैनकोमाइसिन ग्राम-पॉजिटिव बैक्टीरिया के विकास को रोकता है, कोलिस्टिन ग्राम-नकारात्मक बैक्टीरिया जैसे कि स्यूडोमोनास और कुछ सैप्रोफाइटिक नीसेरिया के विकास को रोकता है, और यीस्ट के रूप में निस्टैटिन काम करता है कैंडिडा अल्बिकंस.

हालाँकि, तब थायर मार्टिन आगर को संशोधित किया गया था; परिवर्तन में ट्राइमेथोप्रिम के अलावा, अगर की मात्रा में वृद्धि और अतिरिक्त ग्लूकोज को शामिल किया गया। इन परिवर्तनों ने प्रजातियों की वसूली में महत्वपूर्ण सुधार किया निसेरिया गोनोरिया.

यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि ट्राइमेथोप्रिम, प्रोटियस जीनस के विकास को रोकता है और इसके परिणामस्वरूप स्वीमिंग का गठन होता है। इस अर्थ में, एंटीबायोटिक्स मध्यम थायर मार्टिन को चयनात्मक प्रकृति प्रदान करते हैं.

तैयारी

मूल थायर मार्टिन आगर

-जीसी आगर

निर्जलित जीसी माध्यम का 8.2 ग्राम वजन और 100 मिलीलीटर में निलंबित। मिक्स और 1 मिनट के लिए उबाल लें लगातार सरगर्मी से इसकी संपूर्णता में भंग करने के लिए। 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर एक आटोक्लेव में मिश्रण बाँझ.

-2% हीमोग्लोबिन

एक समान मिश्रण बनाने के लिए 2 ग्राम या 3 मिलीलीटर गर्म आसुत जल में 2 ग्राम निर्जलित हीमोग्लोबिन को निलंबित करें। 100 मिलीलीटर की मात्रा को पूरा करने के लिए थोड़ा और पानी डालें। स्टरलाइज़ करने से पहले निलंबन सजातीय होना चाहिए.

15 मिनट के लिए आटोक्लेव में बाँझ.

-संवर्धन पूरक

उसी वाणिज्यिक घर द्वारा प्रदान की गई मंदता के साथ वाणिज्यिक सड़क का पुनर्निर्माण करें। अच्छी तरह से मिलाएं। उपयोग किए जाने वाले मंदक की मात्रा किट निर्देशों में निर्दिष्ट की जाएगी।.

-निषेध पूरक वी.सी.एन. (वैनकोमाइसिन, कोलिस्टिन, निस्टैटिन)

वाणिज्यिक घर द्वारा प्रदान की गई मंदता के साथ शीशी का पुनर्निर्माण करें। अच्छी तरह से मिलाएं। उपयोग किए जाने वाले मंदक की मात्रा किट निर्देशों में निर्दिष्ट की जाएगी।.

-तैयार

जीसी अगार के प्रत्येक 100 मिलीलीटर के लिए निम्नानुसार आगे बढ़ें:

जब जीसी आगर आटोक्लेव छोड़ देता है, तो लगभग 50 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर ठंडा होने दें और तैयार हीमोग्लोबिन समाधान के 2 मिलीलीटर, संवर्धन पूरक के 2 मिलीलीटर (आइसोबिटैलेक्स या ब्रेटालेक्स), और निषेध के 2 मिलीलीटर जोड़ें। बाँझ पेट्री डिश में मिलाएं और परोसें.

उपयोग करने तक रेफ्रिजरेटर में जमने और संग्रहीत करने की अनुमति दें.

तैयार माध्यम का रंग चेरी लाल है। माध्यम का अंतिम पीएच 7.2 medium 0.2 है

संशोधित थायर मार्टिन आगर

निर्जलित जीसी माध्यम का 8.2 ग्राम वजन और 100 मिलीलीटर में निलंबित। एगर का 1 ग्राम जोड़ें और ग्लूकोज की 0.3 ग्राम जोड़ें। मिक्स और 1 मिनट के लिए उबाल लें लगातार सरगर्मी से इसकी संपूर्णता में भंग करने के लिए। 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर एक आटोक्लेव में मिश्रण बाँझ.

ऊपर वर्णित के रूप में हीमोग्लोबिन और संवर्धन पूरक तैयार करें.

उपयोग किया जाने वाला निषेध अनुपूरक V.C.N.T (वैनकोमाइसिन, कोलिस्टिन, निस्टैटिन, ट्राइमेथोप्रिम) है.

-तैयार

मूल थायर मार्टिन आगर के लिए वर्णित के रूप में आगे बढ़ें.

उपयोग

नमूनों को बोने से पहले थायर मार्टिन अगर को तड़का लगाना चाहिए। आमतौर पर इस्तेमाल किए जाने वाले नमूने ग्रसनी एक्सुडेट्स, नाक एक्सयूडेट्स, योनि, मूत्रमार्ग और / या गुदा स्राव और सीएसएफ हैं।.

ताजे लिए गए नमूनों का उपयोग करें और अगर पर मजबूत इनोकुला बनाएं। नमूनों को सीधे सामग्री के निर्वहन द्वारा बोया जाता है और फिर सतह पर उतार-चढ़ाव द्वारा अलग किया जाता है.

माइक्रोएरोफिलिक जार (5% सीओ) में 24 से 48 घंटों के लिए प्लेटों को 35-37 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया जाता है₂)। ऊष्मायन अवधि के अंत में, प्लेटों की जांच छोटे, ग्रे और कभी-कभी म्यूकोइड जैसी कॉलोनियों के लिए की जाती है।.

संदिग्ध कॉलोनियों में ग्राम और पुष्टिकरण जैव रासायनिक परीक्षण करें.

गुणवत्ता नियंत्रण

थायर मार्टिन अगर की गुणवत्ता नियंत्रण करने के लिए, निम्नलिखित माइक्रोबियल उपभेदों का उपयोग किया जा सकता है.

निसेरिया गोनोरिया एटीसीसी 49226 और निसेरिया मेनिंगिटिडिस एटीसीसी 13090; दोनों उपभेदों में एक संतोषजनक विकास की उम्मीद है.

निम्नलिखित उपभेदों को भी शामिल किया जाना चाहिए: स्टेफिलोकोकस एपिडर्मिडिस एटीसीसी 14990, एस्केरिचिया कोलाई एटीसीसी 25922, प्रोटीन मिराबिलिस एटीसीसी 43071 और कैंडिडा अल्बिकंस एटीसीसी 10231. उन सभी में इस माध्यम में कुल या आंशिक निषेध अपेक्षित है.

सीमाओं

-यह ध्यान में रखना चाहिए कि बैक्टीरिया जो अवरोधकों के लिए प्रतिरोधी हैं, वे मध्यम में विकसित हो सकते हैं।.

-के उपभेद हैं नेइसेरिया gonorrhoeae जो इस्तेमाल की जाने वाली वैनकोमाइसिन की सांद्रता के प्रति संवेदनशील हो सकता है। इस कारण से यह समानांतर में isovitalex के साथ पूरक चॉकलेट अगर का उपयोग करने के लिए अनुशंसित है, लेकिन अवरोधकों के बिना.

-निस्टैटिन के लिए प्रतिरोधी खमीर के उपभेद हैं जो इस माध्यम में बढ़ सकते हैं और रोगजनक नीसेरिया, विशेष रूप से गोनोकोसी के अलगाव के साथ हस्तक्षेप कर सकते हैं।.

संदर्भ

1. Valtek नैदानिक ​​प्रयोगशालाएँ। आगर थायर-मार्टिन ।2016। में उपलब्ध: com
2. प्रयोगशालाओं ब्रिटानिया। थायर मार्टिन संशोधित माध्यम। 2010. उपलब्ध: britanialab.com
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6. फोर्ब्स बी, साहम डी, वीसफेल्ड ए (2009)। बेली एंड स्कॉट का माइक्रोबायोलॉजिकल निदान। 12 एड। संपादकीय पानामेरिकाना एस.ए. अर्जेंटीना.