आगर टीसीबीएस फाउंडेशन, तैयारी और उपयोग

टीसीबीएस आगर एक अत्यधिक चयनात्मक और विभेदक ठोस संस्कृति माध्यम है, जिसका उपयोग विशेष रूप से विब्रियो बैक्टीरिया के अलगाव और संस्कृति के लिए किया जाता है विब्रियो कोलेरी, वी। वल्निकस और वी। Parahaemolyticus इस जीनस के प्रमुख रोगजनकों के रूप में.

संक्षिप्त रूप से टीसीबीएस का मतलब थायोसल्फेट साइट्रेट पित्त सुक्रोज है। इस अग्र को विब्रियोस के लिए चयनात्मक माध्यम के रूप में भी जाना जाता है। मूल सूत्र नाकानिशी द्वारा बनाया गया था और बाद में कोबायाशी द्वारा संशोधित किया गया था.

यह यीस्ट एक्सट्रैक्ट, मीट पेप्टोन, ट्रिप्टीन, सोडियम साइट्रेट, सोडियम थायोसल्फेट, ऑक्स पित्त, सुक्रोज, सोडियम क्लोराइड, फेरिक साइट्रेट, ब्रोमोथाइमॉल ब्लू, थाइमोल ब्लू और अगर से बना है.

यह रचना पानी, मल और खाद्य नमूनों से विब्रियो प्रजातियों के पर्याप्त विकास की अनुमति देती है; को छोड़कर विब्रियो होलिसा, वह इस माध्यम में नहीं बढ़ता है। इसके अलावा, टीसीबीएस माध्यम अन्य बैक्टीरिया के साथ, विशेष रूप से कोलीफॉर्म में वृद्धि को रोकने में सक्षम है.

गंभीर गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल और अतिरिक्त-आंतों की समस्याओं के कारण जो कि जीनस विब्रियो की कुछ प्रजातियों का उत्पादन करते हैं, उनका निदान बहुत महत्वपूर्ण है। मानव मुख्य रूप से कच्चे या अधपके समुद्री भोजन या दूषित पानी के सेवन से संक्रमित होता है, लेकिन घावों के संक्रमण से भी.

इस वजह से, नैदानिक ​​प्रयोगशालाओं को तरल मल के नमूनों की स्टूल संस्कृतियों के अध्ययन में टीसीबीएस अगर शामिल करना चाहिए, विशेष रूप से चावल के पानी की उपस्थिति के साथ। खासकर अगर रोगी समुद्र के पानी के संपर्क में रहा हो या समुद्री भोजन या मछली का सेवन करता हो.

सूची

• 1 फाउंडेशन
• 2 तैयारी
• 3 का उपयोग करें
• 4 बीज
• 5 सीमा
• 6 गुणवत्ता नियंत्रण
• 7 संदर्भ

आधार

खमीर निकालने, मांस पेप्टोन, और ट्रिप्टीन इस माध्यम के पोषक स्रोत हैं। हालांकि, अधिकांश बैक्टीरिया के लिए टीसीबीएस एगर एक अमानवीय माध्यम है.

इसकी उच्च चयनात्मकता सोडियम साइट्रेट और बैल पित्त के अतिरिक्त द्वारा दी गई है; दोनों निरोधात्मक एजेंट हैं जो मध्यम को एक क्षारीय पीएच भी प्रदान करते हैं, साथ में वनस्पतियों के विकास को रोकते हैं और विकास के पक्ष में हैं वी। हैजा, अन्य प्रजातियों के बीच। यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि विब्रियो कोलेरा नाराज़गी के लिए बहुत संवेदनशील है.

इसके भाग के लिए, सोडियम क्लोराइड ऑस्मोटिक रूप से मध्यम तक संतुलित करता है। इसके अलावा, जैसे-जैसे इसकी सांद्रता अधिक होती है, यह एक अवरोधक एजेंट के रूप में भी काम करता है, जो कि हेलोफिलिक बैक्टीरिया के विकास के पक्ष में है.

सुक्रोज किण्वित चीनी है जो ब्रोमोथाइमोल और थाइमोल ब्लू के नीले पीएच संकेतकों के साथ मिलकर मध्यम को अंतर चरित्र प्रदान करते हैं। इस कारण से, इसका अर्थ है कि गैर-किण्वन उपभेदों से सुक्रोज किण्वन उपभेदों को अलग करना संभव है.

सुक्रोज किण्वन उपभेदों की उपनिवेश एक पीले रंग का विकास करते हैं और एसिड के उत्पादन के कारण मध्यम से हरे से पीले रंग में बदल जाएंगे। गैर-किण्वक पारभासी होते हैं और माध्यम मूल रंग (हरा) रहता है.

इसी तरह, इस माध्यम में सल्फर और फेरिक साइट्रेट के स्रोत के रूप में सोडियम थायोसल्फेट शामिल हैं। दोनों हाइड्रोजन सल्फाइड (रंगहीन गैस) पैदा करने में सक्षम बैक्टीरिया दिखाते हैं। द एच₂एस थियोसल्फेट से बनता है और बाद में फेरिक साइट्रेट के साथ एक दृश्यमान काले अवक्षेप रूपों के साथ प्रतिक्रिया करता है.

अंत में, अगर वह माध्यम है जो ठोस स्थिरता देता है.

तैयारी

निर्जलित माध्यम का 89 ग्राम वजन और आसुत जल के एक लीटर में भंग। हीटिंग और लगातार आंदोलन से विघटन में मदद करें। मिश्रण को 2 मिनट तक उबाला जा सकता है.

यह माध्यम आटोक्लेव नहीं है। इसके विघटन के बाद इसे सीधे बाँझ प्लेटों पर परोसा जाता है। जमने पर, वे एक उल्टे तरीके से पट्टिका निर्माताओं में व्यवस्थित होते हैं और एक रेफ्रिजरेटर (2-8 डिग्री सेल्सियस) में संग्रहीत होते हैं, जिसका वे उपयोग करते हैं.

तैयारी के बाद का माध्यम पीएच 8.6 after 0.2 पर होना चाहिए.

निर्जलित माध्यम का रंग हल्का बेज या हरा-बेज है, और मध्यम का रंग वन हरा या नीला हरा है.

नमूनों को बोने से पहले तड़के को छोड़ना महत्वपूर्ण है.

उपयोग

विब्रियोस के अलगाव के लिए सबसे आम नमूना मूत्रवर्धक मल हैं.

यदि वे चयनात्मक माध्यम पर तुरंत बीज नहीं चढ़ा सकते हैं तो मल के नमूने को कैरी ब्लेयर के मध्य में ले जाया जाना चाहिए.

संस्कृति की संवेदनशीलता को बढ़ाने के लिए, मल को पीएच 8.4 पर पेप्टोन पानी के माध्यम से 8 घंटे के लिए एक संवर्धन माध्यम के रूप में पारित किया जा सकता है, वहां से इसे टीसीबीएस माध्यम तक पहुंचाया जाता है।.

यह भी ध्यान में रखा जाना चाहिए कि विब्रियोस के कुछ उपभेदों से प्रतिरक्षाविज्ञानी रोगियों में सेप्टिसीमिया हो सकता है, इसलिए उन्हें रक्त संस्कृतियों से अलग किया जा सकता है। इसी तरह, समुद्र से पानी और भोजन के नमूनों का विश्लेषण किया जा सकता है जब हैजा रोग की महामारी का प्रकोप होता है.

लगाए

अध्ययन के तहत नमूने का इनोकुलम प्रमुख होना चाहिए, बीजारोपण थकावट द्वारा स्ट्रिपिंग की विधि द्वारा किया जाता है। एरोबायोसिस में 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर प्लेटें लगाई जाती हैं.

की उपनिवेशवादी उपनिवेश विब्रियो कोलेरा वे मध्यम आकार के, चिकने, अपारदर्शी, पतले किनारों और पीले रंग के होते हैं क्योंकि वे सुक्रोज का किण्वन करते हैं।.

इसी तरह से, की प्रजाति वी। एल्गिनोलिटिकस, वी। फ्लुवियलिस, वी। हैरी, वी। सिनसिनाटीसिस, वी। फर्निसी, वी। मेट्सनिकिकोवी और कुछ वि। विष्णुकस. Vibrios की अन्य प्रजातियाँ नैदानिक ​​रूप से महत्वपूर्ण हैं वी। Parahaemolyticus ऑलिव ग्रीन कालोनियों के रूप में विकसित, सुक्रोज को किण्वित न करें.

दूसरी ओर, हमें यह ध्यान में रखना चाहिए कि एयरोमेनस और प्लासीओमोनस के कुछ उपभेद जो ऑक्सीडेज हैं (+) इस माध्यम में बढ़ सकते हैं, पीले रंग की कॉलोनियों को विकसित कर सकते हैं जो चिकित्सक को भ्रमित कर सकते हैं। जबकि स्यूडोमोनास के कुछ उपभेद भी ऑक्सीडेज (+) हरे रंग की कॉलोनियों के साथ-साथ बढ़ते हैं वी। Parahaemolyticus.

सीमा

ऑक्सीडेज टेस्ट जो जीनस विब्रियो के लिए सकारात्मक है, उसे कभी भी टीसीबीएस एगर से प्राप्त कालोनियों से नहीं करना चाहिए, क्योंकि प्राप्त परिणाम एक गलत नकारात्मक होगा। माध्यम में यौगिक इस परीक्षण में दृढ़ता से हस्तक्षेप करते हैं। इसलिए, यह रक्त अगर पर उपसंस्कृतियों से किया जाना चाहिए.

गुणवत्ता नियंत्रण

यह साबित करने के लिए कि माध्यम अच्छी स्थिति में है, यह ज्ञात या प्रमाणित नियंत्रण उपभेदों को रोपित करने और उचित विकास होने पर निरीक्षण करने की सलाह दी जाती है.

इसके लिए:

-विब्रियो कोलेरा - संतोषजनक वृद्धि (पीली कॉलोनियाँ, पारभासी सीमा).

-विब्रियो पैराहामोलिटिकस - संतोषजनक वृद्धि (ग्रीन सेंटर और पारभासी सीमा के साथ कॉलोनी).

-विब्रियो एल्जिनोलिटिकस एटीसीसी 17749 - संतोषजनक वृद्धि (कॉलोनी के चारों ओर एक ही रंग के बालों के साथ पीले रंग की कॉलोनियां).

-एंटरोकोकस फेसेलिस ATCC 29212 - कुल या आंशिक निषेध (छोटी पीली या पारभासी उपनिवेश).

-स्यूडोमोनास एरुगिनोसा ATCC 27853- आंशिक या कुल अवरोध (नीली उपनिवेश).

-एस्केरिचिया कोलाई ATCC 25922 - पूरी तरह से बाधित.

-प्रोटीन मिराबिलिस ATCC 43071 - कुल या आंशिक निषेध। (छोटे उपनिवेश केंद्र हरे पारभासी धार).

एक असंबद्ध माध्यम के ऊष्मायन में परिवर्तन नहीं होना चाहिए.

संदर्भ

1. डीम्को फ्रांसिस्को सोरिया मेलगुइज़ो प्रयोगशालाएँ। टीसीबीएस आगर। 2009. पर उपलब्ध: f-soria.es
2. बीडी प्रयोगशाला। BD। TCBS Agar 2003. पर उपलब्ध: bd.com
3. प्रयोगशालाओं ब्रिटानिया। टीसीबीएस मीडियम। 2015 में उपलब्ध: britanialab.com
4. अकुमेडिया प्रयोगशालाएँ टीसीबीएस आगर। 2016. पर उपलब्ध: foodsafety.neogen.com
5. फोर्ब्स बी, साहम डी, वीसफेल्ड ए (2009)। बेली एंड स्कॉट का माइक्रोबायोलॉजिकल निदान। 12 एड। संपादकीय पानामेरिकाना एस.ए. अर्जेंटीना.
6. कोनमैन ई, एलन एस, जैंडा डब्ल्यू, श्रेकेनबर्गर पी, विन्न डब्ल्यू (2004)। माइक्रोबायोलॉजिकल निदान। 5 वां संस्करण। संपादकीय पानामेरिकाना एस.ए. अर्जेंटीना.