पौष्टिक अगर नींव, तैयारी और उपयोग
पौष्टिक अगर यह एक गैर-विचारात्मक और गैर-अंतर ठोस संस्कृति माध्यम है। इस वातावरण में पोषण के दृष्टिकोण से मांग नहीं करने वाले सभी प्रकार के बैक्टीरिया बढ़ते हैं.
यह एक सरल साधन है और इसके नाम के बावजूद, अन्य समान मीडिया की तुलना में कम पोषक मूल्य होता है, जैसे कि ब्रेन हार्ट इनफ्यूजन एगर या ट्रायप्टिसेज़ सोया अगर.
प्रयोगशाला में इसकी उपयोगिता बहुत विविध है। मुख्य रूप से प्रजातियों के उपसंस्कृति के लिए उपयोग किया जाता है, उपभेदों का रखरखाव, कालोनियों की गिनती, दूसरों के बीच रक्त एग तैयार करने के लिए एक आधार के रूप में।.
इसी तरह, अपने हल्के बेज रंग के कारण, कुछ जीवाणु उपभेदों द्वारा उत्पन्न वर्णक का उत्पादन, जैसे कि हरे रंग का वर्णक स्यूडोमोनास एरुगिनोसा, द्वारा निर्मित ईंट लाल रंगद्रव्य सेराटिया मार्सेन्सेंस कमरे के तापमान पर, सुनहरे पीले रंग का रंग स्टैफिलोकोकस ऑरियस, दूसरों के बीच में.
इसके अलावा, यह बाजार में पाए जाने वाले सबसे किफायती मीडिया में से एक है.
सूची
- 1 फाउंडेशन
- २ रचना
- 3 तैयारी
- 4 उपयोग
- 4.1 रक्त अगार की तैयारी के लिए आधार के रूप में
- 4.2 बीजाणु बनाने वाले जीवाणुओं के फैलाव को उत्तेजित करें
- 4.3 तनाव का रखरखाव
- 4.4 कॉलोनी की गिनती
- 4.5 नैदानिक परीक्षणों का निष्पादन
- 4.6 मेसोफिलिक एरोबिक मनोरंजक खारा पानी की वसूली (समुद्र तट)
- 5 संदर्भ
आधार
जैसा कि पहले ही उल्लेख किया गया है, यह एक बहुत ही सरल साधन है जो प्रतिबंध के बिना और बिना जटिल प्रतिक्रियाओं के बैक्टीरिया के विकास के लिए पोषक पदार्थ प्रदान करने पर आधारित है.
जैसा कि माध्यम पारभासी है, यह गहराई से बुवाई की विधि से उपनिवेशों की गिनती के लिए आदर्श है.
रचना
यह मुख्य रूप से मांस निकालने या खमीर निकालने, पेप्टोन या अग्नाशय जिलेटिन डाइजेस्ट, अगर-अगर, सोडियम क्लोराइड और आसुत जल से बना है.
मांस या खमीर और पेप्टोन का अर्क कार्बन और आवश्यक खनिजों (नाइट्रोजन, फास्फोरस और सल्फर) के स्रोतों का प्रतिनिधित्व करता है, जिसका उपयोग बैक्टीरिया द्वारा ऊर्जा स्रोत और विकास कारकों के रूप में किया जाएगा।.
इसी तरह, अगर-अग्र, जिलेटिन की जगह, सभी ठोस मीडिया का आधार है, जो कि रॉबर्ट कोच द्वारा अपने मीडिया को ठोस स्थिरता देने के लिए उपयोग किया जाने वाला पहला आधार यौगिक था।.
आगर एक पॉलीसेकेराइड है जो गैलेक्टोज, गैलेक्टोमेन्नन, एग्रोसे और एग्रोपेक्टिन से बना है। यह 40 ° C पर सेट होता है और 100 ° C के करीब पिघलता है.
इसके भाग के लिए, सोडियम क्लोराइड जीवाणु विकास के लिए आवश्यक ऑस्मोलारिटी के साथ माध्यम प्रदान करता है.
अंत में, पानी lyophilized यौगिकों को हाइड्रेट और भंग करने का कार्य करता है। तटस्थ पीएच में समायोजित आसुत जल का उपयोग किया जाना चाहिए। नल के पानी का उपयोग नहीं किया जाना चाहिए क्योंकि इसमें कैल्शियम और मैग्नीशियम होता है जो मध्यम में फॉस्फेट के साथ प्रतिक्रिया कर सकता है और अघुलनशील लवण बनाता है.
तैयारी
एक लीटर पौष्टिक अगर के लिए, निर्जलित माध्यम के 31 ग्राम का वजन किया जाना चाहिए। इसे एक फियोला में रखा जाता है और एक लीटर आसुत जल में घोल दिया जाता है। 5 मिनट के आराम के बाद, एक गर्मी स्रोत पर गर्म करें और लगातार मिलाएं जब तक कि यह 1 या 2 मिनट के लिए उबल न जाए.
फिर फियोला को एक आटोक्लेव में रखें और 20 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर बाँझ करें.
समय के अंत में, इसे आटोक्लेव से हटा दिया जाता है और बाँझ पेट्री डिश में एक लामिना का प्रवाह हुड या बेंसन बर्नर का उपयोग करके परोसा जाता है।.
यदि पेट्री डिश डिस्पोजेबल (प्लास्टिक) हैं, तो मध्यम को वितरित किया जाना चाहिए, जब अगर तापमान में लगभग 50 डिग्री सेल्सियस का तापमान होता है, ताकि उन्हें अत्यधिक गर्मी से विकृत होने से बचाया जा सके।.
एक प्लेट धारक को औंधा में जमने और स्टोर करने की अनुमति दें और उपयोग करने तक 2-8 डिग्री सेल्सियस पर सर्द करें.
बोए जाने से पहले प्लेटों को टेम्पर्ड किया जाना चाहिए। अगर वे दूषित या निर्जलित हैं, तो पौष्टिक अगर प्लेटों का उपयोग नहीं किया जाना चाहिए.
तैयार माध्यम के पीएच को 7.3 medium 0.2 तक समायोजित किया जाना चाहिए.
अनुप्रयोगों
यह माइक्रोबायोलॉजी प्रयोगशाला में उपयोग किया जाने वाला सबसे सरल संस्कृति माध्यम है। गैर-मांग वाले बैक्टीरिया की वृद्धि के लिए इसका सूत्रीकरण उत्कृष्ट है.
इसके मुख्य उपयोग नीचे दिए गए हैं:
रक्त अगर की तैयारी के लिए एक आधार के रूप में
इस माध्यम का उपयोग कभी-कभी रक्त एगर को तैयार करने के लिए एक आधार के रूप में किया जाता है, हालांकि यह सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला आधार नहीं है.
बीजाणु बनाने वाले बैक्टीरिया के फैलाव को उत्तेजित करें
यह कल्चर माध्यम विशेष रूप से उपयोगी है जैसे कि बीजाणु बनाने वाले जीवाणुओं के फैलाव को प्रोत्साहित करने के लिए बेसिलस सपा.
ऐसा करने के लिए, जीनस का एक तनाव बोया जाता है रोग-कीट और एरोबायोसिस में 37 डिग्री सेल्सियस पर 24 घंटे के लिए ऊष्मायन किया गया। एक बार जब कॉलोनियों को बड़ा किया जाता है, तो प्लेट को तापमान से तनाव के अधीन किया जाता है, अर्थात, स्टोव का तापमान बढ़ाकर 44 ° C कर दिया जाता है और इसे 24 घंटे तक छोड़ दिया जाता है या इसे 24 घंटे के लिए रेफ्रिजरेटर में रखा जाता है.
फसल के अंत में, संस्कृतियों को बढ़ाया जाता है और ग्राम दाग या शेफ़र-फुल्टन बीजाणु दाग के साथ दाग दिया जाता है। उनमें, एंडोस्पोरस (बेसिलस के अंदर बीजाणु) और एक्सोस्पोर्स (बेसिलस के बाहर बीजाणु) के साथ बेसिली देखी जाएगी।.
तनाव का रखरखाव
कुछ अनुसंधान प्रयोगशालाओं या विश्वविद्यालय शिक्षण सहायता प्रयोगशालाओं को अनुसंधान कार्य के लिए या शिक्षण प्रथाओं की तैयारी के लिए जीवाणु बैंक (बैक्टीरियोथेका) का उपयोग करने के लिए यथासंभव लंबे समय तक व्यावहारिक रूप से महत्वपूर्ण बैक्टीरिया को बनाए रखने की आवश्यकता होती है। छात्र इन सूक्ष्मजीवों में हेरफेर करना और पहचानना सीखेंगे.
पोषक आगर, साथ ही मस्तिष्क हृदय जलसेक अगर, का उपयोग इस उद्देश्य के लिए किया जा सकता है। अगर तैयार किया जाता है, बैक्लाइट-कैप्ड ट्यूबों में डाला जाता है और एक बेस पर झुका जाता है, इस तरह से कि एगर तल पर एक ब्लॉक बनाता है और सतह पर एक बेवल बनाता है (बांसुरी चोटी).
प्रत्येक ट्यूब को लगाए जाने वाले बैक्टीरिया का नाम और तारीख डालकर लेबल किया जाता है। बेज़ेल पर प्रत्येक बैक्टीरिया को 24 घंटों के लिए लगाया और ऊष्मायन किया जाएगा, एक बार कालोनियों के बढ़ने पर नलिकाओं को तापमान पर संग्रहीत किया जाता है.
जीवाणु के माध्यम से संदूषण और निर्जलीकरण से बचने के लिए और साथ ही बैक्टीरिया की मृत्यु से बचने के लिए बैक्टीरियोटेका को 1 से 3 महीने तक नवीनीकृत किया जाना चाहिए।.
इस तरह से केवल गैर-मांग वाले बैक्टीरिया को बनाए रखा जा सकता है.
कॉलोनी की गिनती
यद्यपि उपनिवेशों की गिनती के लिए विशेष साधन हैं, जैसे कि मानक गणना अगर, पोषक द्रव्य का उपयोग इस उद्देश्य के लिए किया जा सकता है, या तो सतह पर बुवाई करके ड्रिग्ल्स्की स्पैटुला या गहराई से। इसलिए, यह भोजन और पानी के सूक्ष्मजीवविज्ञानी विश्लेषण में बहुत उपयोगी है.
नैदानिक परीक्षणों का निष्पादन
क्योंकि यह एक ऐसा माध्यम है जिसमें रक्त, या कोई अन्य योजक नहीं होता है, यह उत्प्रेरित परीक्षण करने के लिए इस माध्यम में उपनिवेशों को लेना आदर्श है।.
इसी तरह, अपने स्पष्ट रंग के कारण, यह बिना किसी रोक-टोक के किसी क्षेत्र पर सीधे ऑक्सीडेज परीक्षण करने के लिए संकेत दिया जाता है।.
मेसोफिलिक एरोबिक मनोरंजक खारा पानी की वसूली (समुद्र तट)
समुद्र के पानी में मेसोफिलिक एरोबेस के मूल्यांकन के लिए 10% समुद्री जल से तैयार पोषक एगर उपयोगी है.
इस तरह, हम वास्तविक प्रदूषण के स्तर की सराहना कर सकते हैं जो पानी में इन सूक्ष्मजीवों के साथ है, क्योंकि इस प्रकार के नमूनों में पारंपरिक तरीके से तैयार किए गए संस्कृति मीडिया का उपयोग करते समय परिणामों को ओवरलैप किया जाता है।.
यह कॉर्टेज़ एट अल द्वारा प्रदर्शित किया गया था। 2013 में एक शोध पत्र में.
यह अचानक परिवर्तन के कारण पता लगाने योग्य है कि बैक्टीरिया अति-खारे वातावरण से कम नमक के वातावरण में जाते हैं, इसलिए सूक्ष्मजीव एक सुस्ती की स्थिति में प्रवेश करते हैं जिसमें वे व्यवहार्य हैं, लेकिन खेती योग्य नहीं है.
संदर्भ
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