MacConkey Agar नींव, तैयारी और उपयोग करता है



MacConkey agar यह एक ठोस संस्कृति माध्यम है जो ग्राम नकारात्मक बेसिली के अनन्य अलगाव की अनुमति देता है। इस कारण यह एक चयनात्मक माध्यम है और लैक्टोज के किण्वन और गैर-किण्वन बेसिली के बीच अंतर करने की भी अनुमति देता है, जो इसे एक अंतर माध्यम बनाता है। यह एक माइक्रोबायोलॉजी प्रयोगशाला में सबसे अधिक उपयोग किए जाने वाले संस्कृति मीडिया में से एक है.

इस माध्यम का उपयोग मुख्य रूप से परिवार से संबंधित ग्राम नकारात्मक बेसिली के अलगाव के लिए किया जाता है Enterobacteriaceae, अवसरवादी और एंटरोपैथोजेनिक प्रजातियों सहित.

यह जठरांत्र संबंधी मार्ग में रहने वाले अन्य एंटीक बेसिली को अलग करने के लिए भी इस्तेमाल किया जा सकता है, लेकिन इससे संबंधित नहीं है Enterobacteriaceae, जैसे एरोमोनस एसपी, प्लासीमोनस एसपी, दूसरों के बीच में.

अंत में, यह अन्य ग्राम-नकारात्मक, गैर-किण्वन ग्लूकोज बेसिली को अलग कर सकता है जो पर्यावरण, पानी या मिट्टी में पाए जाते हैं, लेकिन जो कभी-कभी अवसरवादी रोगजनकों जैसे हो सकते हैं स्यूडोमोनास सपा, एसिनोबैक्टीरियम एसपी, क्षारीय एसपी, क्रोमोबैक्टीरियम वायलेसम, स्टेनोट्रोफोमोनास माल्टोफिलिया, दूसरों के बीच में.

सूची

  • 1 फाउंडेशन
    • १.१ मैकोनीज आगर
  • 2 तैयारी
  • 3 पारंपरिक MacConkey अगर का उपयोग
  • 4 MacConkey agar के अन्य संस्करण
    • 4.1 सोर्बिटोल के साथ मैककॉन्की अगर
    • 4.2 क्रिस्टल के बिना MacConkey Agar, या नमक
    • ४.३ मैककॉन्फ़र अगर सेफ़ोरज़ोन के साथ
    • 4.4 MacConkey Agar 10% समुद्र के पानी v / v के साथ तैयार किया गया
  • 5 संदर्भ

आधार

MacConkey Agar

इस माध्यम की नींव को इसके घटकों के विवरण के माध्यम से समझाया जा सकता है, क्योंकि प्रत्येक का एक उद्देश्य है जो इसकी एक संपत्ति निर्धारित करता है.

पित्त लवण और बैंगनी क्रिस्टल

इस अर्थ में, MacConkey agar की एक जटिल रचना है। सबसे पहले इसमें पित्त लवण और वायलेट क्रिस्टल होते हैं.

ये तत्व ग्राम-पॉजिटिव बैक्टीरिया के विकास को रोकने और कुछ ग्राम-नेगेटिव बैसिली की मांग के लिए जिम्मेदार हैं। बदले में यह ग्राम नकारात्मक बेसिली के विकास का पक्षधर है जो इन पदार्थों से प्रभावित नहीं हैं। इसलिए यह एक चुनिंदा माध्यम है.

यह अन्य मीडिया की तुलना में थोड़ा चयनात्मक कहा जाता है जो ग्राम-पॉजिटिव बैक्टीरिया के विकास को रोकता है और अधिकांश ग्राम-नकारात्मक बैक्टीरिया को भी रोकता है.

यह विशिष्ट जीनस के लिए अत्यंत चयनात्मक है, जैसे कि अलगाव के लिए TCBS agar विब्रियो कोलेरा और अन्य इसी तरह के हेलोफिलिक और क्षारीय प्रजातियों.

पेप्टोन्स, पॉलिपेक्टोन्स और लैक्टोज

इस माध्यम में विकसित होने वाले सूक्ष्मजीवों के लिए आवश्यक पोषक तत्व प्रदान करने वाले पदार्थ शामिल हैं, जैसे पेप्टोन, पॉलीपेक्टोन्स और लैगोज.

लैक्टोज, माध्यम के लिए एक अंतर माध्यम होने के लिए महत्वपूर्ण बिंदु है, क्योंकि सूक्ष्मजीव जो लैक्टोज को किण्वित करने की क्षमता रखते हैं, वे मजबूत गुलाबी उपनिवेश विकसित करेंगे.

कुछ बैक्टीरिया धीरे-धीरे या कमजोर रूप से लैक्टोज को किण्वित कर सकते हैं, जिससे पीली गुलाबी कॉलोनियां विकसित हो सकती हैं और सकारात्मक लैक्टोज रह सकती हैं.

जो कि किण्वन नहीं करते हैं वे लैक्टोज ऊर्जा स्रोत के रूप में पेप्टोन का उपयोग करते हैं, अमोनिया का उत्पादन करते हैं, माध्यम को क्षारीय करते हैं। इसलिए, उपनिवेशों की उत्पत्ति रंगहीन या पारदर्शी होती है.

PH संकेतक

रंग परिवर्तन एक अन्य आवश्यक यौगिक के माध्यम से हासिल किया गया है जिसमें मैककॉन्की अगर है। यह यौगिक पीएच संकेतक है, जो इस मामले में तटस्थ लाल है.

लैक्टोज का किण्वन मिश्रित एसिड के उत्पादन को उत्पन्न करता है। वे 6.8 से नीचे पीएच पर मध्यम अम्लीय करते हैं।.

यह पीएच संकेतक को एक तीव्र गुलाबी रंग की ओर मुड़ने का कारण बनता है। अंतिम पीएच के आधार पर रंग की तीव्रता भिन्न हो सकती है.

आसुत जल, सोडियम क्लोराइड और अगर

दूसरी ओर, इसमें आसुत जल और सोडियम क्लोराइड शामिल हैं जो कि हाइड्रेशन और ऑस्मोटिक संतुलन को माध्यम देते हैं। अंत में, माध्यम में अगर शामिल है, जो आधार है जो ठोस माध्यम की स्थिरता प्रदान करता है.

तैयार MacConkey agar माध्यम का अंतिम pH 7.1 key 0.2 तक समायोजित होना चाहिए।.

तैयारी

MacConkey agar के एक लीटर के लिए, निर्जलित माध्यम का 50 ग्राम तौला जाना चाहिए, फिर एक फिओला में रखा जाता है और एक लीटर आसुत जल में भंग होता है। 10 मिनट के आराम के बाद इसे 1 मिनट तक लगातार उबालने तक गर्म किया जाता है.

फिर आटोक्लेव में फियोला रखें और 20 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर बाँझ करें। समय के अंत में, इसे आटोक्लेव से हटा दिया जाता है और 45 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर ठंडा करने की अनुमति दी जाती है, फिर एक लामिना का प्रवाह हुड के अंदर या बन्सेन बर्नर के सामने बाँझ पेट्री डिश में परोसा जाता है।.

एक प्लेट धारक को औंधा में जमने और स्टोर करने की अनुमति दें और उपयोग करने तक 2-8 डिग्री सेल्सियस पर सर्द करें.

MacConkey agar को प्राप्त करने के लिए जो प्रोटियस जीनस द्वारा निर्मित स्वारिंग प्रभाव को रोकता है, एक कम नमक MacConkey agar का उपयोग किया जाता है।.

पारंपरिक MacConkey agar का उपयोग

MacConkey agar प्रयोगशाला में प्राप्त नैदानिक ​​नमूनों की बुवाई के लिए व्यवस्थित संस्कृति मीडिया के सभी सेट में शामिल है। यह खाद्य सूक्ष्म जीव विज्ञान और पर्यावरणीय सूक्ष्म जीव विज्ञान में भी उपयोगी है.

इस माध्यम में विकसित होने वाली ग्राम नकारात्मक बेसिली की विविधता फेनोटाइपिक विशेषताओं को व्यक्त करती है जो प्रजातियों में विवादास्पद निदान की मदद करती है। उदाहरण के लिए, कालोनियों का आकार, रंग, स्थिरता और गंध कुछ ऐसी विशेषताएं हैं जो मार्गदर्शन कर सकती हैं.

इस वातावरण में, की प्रजातियां एस्केरिचिया कोलाई, क्लेबसिएला सपा और Enterobacter सपा मजबूत गुलाबी उपनिवेशों का निर्माण करें, जो उपजी पित्त के एक क्षेत्र से घिरा हुआ है.

जितने में, उतने बैक्टीरिया Citrobacter Sp, Providencia sp, Serratia sp और Hafnia sp वे 24 घंटे के बाद बिना रंग के दिखाई दे सकते हैं या 24 -48 घंटों में हल्के गुलाबी हो सकते हैं.

इसी तरह, जेनेरा प्रोटीन, एडवाडेसिएला, साल्मोनेला और शिगेला रंगहीन या पारदर्शी कालोनियों का निर्माण करते हैं.

MacConkey agar के अन्य संस्करण

MacConkey agar के अन्य प्रकार हैं जिनके विशिष्ट उद्देश्य हैं। आगे उनका उल्लेख किया गया है:

सोर्बिटोल के साथ मैककॉन्की अगर

इस माध्यम को एंटरोपैथोजेनिक स्ट्रेन को अलग करने के लिए डिज़ाइन किया गया था (एस्केरिचिया कोलाई Enterohemorrhagic O157: H7) के बाकी हिस्सों में एस्केरिचिया कोलाई.

यह माध्यम सोर्बिटोल के लिए कार्बोहाइड्रेट लैक्टोज को बदलता है। के उपभेद हैं ई। कोलाई enterohaemorrhagic O157: H7 बाकी हिस्सों से अलग है क्योंकि वे सोर्बिटोल किण्वन और इसलिए पारदर्शी कालोनियों प्राप्त कर रहे हैं, जबकि अन्य उपभेदों ई। कोलाई यदि वे सोर्बिटोल किण्वन करते हैं और उपनिवेश मजबूत गुलाबी होते हैं.

MacConkey Agar बिना क्रिस्टल वायलेट, या नमक के

यह agar क्लासिक MacConkey agar से बहुत अलग है, क्योंकि इसमें क्रिस्टल वायलेट नहीं है, ग्राम पॉजिटिव बैक्टीरिया बढ़ सकते हैं.

दूसरी ओर, नमक की अनुपस्थिति कुछ एंटेरिक बेसिली द्वारा निर्मित अगरबत्तियों पर झुंड की उपस्थिति को रोकती है, जैसे कि जीनस रूप बदलनेवाला प्राणी, और इस प्रकार ग्राम पॉजिटिव बैक्टीरिया सहित मौजूद सभी जीवाणुओं को अलग करने की सुविधा प्रदान करता है.

सेफेरोझोन के साथ मैककॉन्की अगर

MacConkey agar के इस वेरिएंट को शुरू में अलग करने के लिए डिज़ाइन किया गया था लारीबैक्टर होंगकोंगेंसिस और बाद में उन्होंने महसूस किया कि यह अलगाव के लिए उपयोगी था आर्कोबैक्टीर बटरेली। एकदोनों ही थोड़ा घुमावदार नकारात्मक ग्राम बेसिली हैं जो सेफ़ेरोपाज़ोन के लिए प्रतिरोधी हैं.

इन जीवाणुओं को हाल ही में एशियाई और यूरोपीय व्यक्तियों में प्राप्त गैस्ट्रोएंटेराइटिस और दस्त के कारणों के रूप में जोड़ा गया है, दो शक्तिशाली उभरते रोगजनकों के रूप में उभर रहे हैं.

एंटीबायोटिक जठरांत्र संबंधी मार्ग है, जो इन जीवाणुओं के विकास के पक्ष में है की वनस्पतियों के साथ बाधित कर सकते हैं, किसी का ध्यान नहीं है क्योंकि वे विकसित करने के लिए 72 घंटे की आवश्यकता को रोकने.

MacConkey Agar 10% समुद्री पानी v / v के साथ तैयार किया गया

इस प्रकार मल प्रदूषण का स्वास्थ्य बैक्टीरियल संकेतक, कुल coliforms और मनोरंजन नमक के पानी में मल coliforms सहित मूल्यांकन के लिए उपयोगी है (समुद्र तटों और बे).

2013 में कोरटेज एट अल से पता चला कि इस प्रकार से तैयार मध्यम काफी खारा वातावरण में इन सूक्ष्मजीवों की वसूली बढ़ जाती है, आसुत जल से तैयार MacConkey अगर के उपयोग के साथ तुलना में.

इसका कारण यह है संशोधित माध्यम में बैक्टीरिया है कि निद्रा की अवस्था में physiologically हैं के विकास "व्यवहार्य लेकिन गैर कृष्य" प्रेरित है इसलिए पारंपरिक में वसूली योग्य नहीं हैं.

संदर्भ

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