Agar Hektoen नींव, तैयारी और उपयोग करता है
हेकटन अगार या एंटेरिक हेक्टोन अगार एक ठोस, चयनात्मक और विभेदक संस्कृति माध्यम है। यह जेन और मेत्ज़ेर द्वारा हेक्टोइन इंस्टीट्यूट में बनाया गया था, जो जिनेगा और साल्मोनेला के एंटरोपैथोजेनिक बैक्टीरिया के अलगाव के लिए था।.
माध्यम प्रोटीस पेप्टोन, यीस्ट एक्सट्रैक्ट, पित्त लवण, लैक्टोज, सुक्रोजिन, सैलिसिन, सोडियम थायोसल्फेट, सोडियम क्लोराइड, आयरन साइट्रेट, अमोनियम साइट्रेट, ब्रोमोथाइमॉल ब्लू, एसिड फुकसिन और अगर से बना है। यह सूत्रीकरण इस माध्यम में बढ़ने में सक्षम बाकी जीवाणुओं से जेनेरा शिगेला और साल्मोनेला को अलग करने की अनुमति देता है.
यद्यपि हेकुटेन एगर के समान फ़ंक्शन के साथ अन्य साधन हैं, यह अन्य साधनों की तुलना में अधिक लाभ प्रस्तुत करता है, खासकर जब आप शिगेला प्रजातियों को पुनर्प्राप्त करना चाहते हैं।.
दूषित भोजन के सेवन से मनुष्यों में दोनों जनन की गंभीर जठरांत्र संबंधी समस्याएं पैदा होती हैं; इसलिए ट्रांसमिशन फेकल - मौखिक है। यही कारण है कि हेकुटेन एगर का उपयोग मुख्य रूप से मल और खाद्य नमूनों के सूक्ष्मजीवविज्ञानी विश्लेषण में इंगित किया गया है।.
सूची
- 1 फाउंडेशन
- 2 तैयारी
- 3 का उपयोग करें
- 4 गुणवत्ता नियंत्रण
- 5 सीमाएँ
- 6 संदर्भ
आधार
हेक्टोन अगार में पोषक तत्वों के स्रोत के रूप में पेप्टोन और खमीर निकालने होते हैं, जो माइक्रोबियल विकास के लिए आवश्यक तत्व प्रदान करते हैं.
हालांकि, इसमें पित्त लवण भी होते हैं जो कुछ बैक्टीरिया, विशेष रूप से ग्राम पॉजिटिव और कुछ ग्राम नकारात्मक के विकास को रोककर कार्य करते हैं। यह इस कारण से है कि इसे एक चयनात्मक माध्यम माना जाता है.
दूसरी ओर, हेक्टोन अगार एक अंतर माध्यम है। इस संपत्ति को लैक्टोज, सैकरोरा और सैलिसिन जैसे किण्वित कार्बोहाइड्रेट की उपस्थिति के साथ-साथ पीएच इंडिकेटर सिस्टम के साथ ब्रोमोथाइमोल ब्लू और एसिड फुकसिन द्वारा दर्शाया गया है।.
इस माध्यम से बढ़ने में सक्षम सभी बैक्टीरिया जो जीनस साल्मोनेला से संबंधित नहीं हैं और शिगेला जीनस प्रोटीन के अपवाद के साथ सामन या नारंगी कालोनियों का विकास करेंगे। यह मौजूद एक या कई कार्बोहाइड्रेट के किण्वन के कारण होता है, जो मध्यम को अम्लीय करता है, जिससे पीएच संकेतक बंद हो जाता है.
इसके भाग के लिए, जीनस शिगेला और साल्मोनेला उपस्थित कार्बोहाइड्रेट में से किसी के लिए किण्वन करने में सक्षम नहीं हैं, केवल पेप्टोनस को एक ऊर्जा स्रोत के रूप में उपयोग करते हैं, जो पर्यावरण को क्षारीय करता है और इसलिए इसकी उपनिवेश नीले-हरे होते हैं.
साथ ही इस माध्यम में हाइड्रोजन सल्फाइड (रंगहीन गैस) बनाने में सक्षम बैक्टीरिया को अलग किया जा सकता है। सोडियम थायोसल्फेट सल्फर के स्रोत के रूप में कार्य करता है जबकि आयरन साइट्रेट खुलासा एजेंट है। दोनों यौगिकों से लोहे के सल्फाइड के एक काले अवक्षेप का निर्माण संभव हो जाता है जो प्रतिक्रिया का सबूत देता है.
कॉलोनी के केंद्र में काले रंग का अवक्षेप एक पारदर्शी प्रभामंडल के साथ होता है, जो मछली की आंख को दिखाता है। यह विशेषता जीनस साल्मोनेला की उपस्थिति का सुझाव देती है.
अंत में, सोडियम क्लोराइड ऑस्मोटिक संतुलन बनाए रखता है और अगरर माध्यम को ठोस स्थिरता देता है.
तैयारी
निर्जलित माध्यम का 76 ग्राम वजन और आसुत जल के एक लीटर में भंग। मिश्रण को जोर से हिलाएं और फिर इसे 10 से 15 मिनट के लिए आराम दें। यह गर्म और उबला हुआ हो सकता है, इसके पूर्ण विघटन तक रोटरी आंदोलनों को दे सकता है। यह माध्यम स्वावलंबी नहीं है.
जब माध्यम लगभग 45 डिग्री सेल्सियस के तापमान तक पहुंच जाता है, तो 20 मिलीलीटर की मात्रा सीधे बाँझ पेट्री डिश में डाली जाती है।.
अगर को जमने दिया जाता है। उस समय वे उपयोग के लिए तैयार हैं। उन्हें तुरंत उपयोग करने की सलाह दी जाती है। यदि वे संभव नहीं हैं, तो उन्हें उपयोग किए जाने तक एक रेफ्रिजरेटर में रखा जाना चाहिए.
कमरे का तापमान लेने के लिए उन्हें लगाने से पहले प्लेटों को रेफ्रिजरेटर से जल्दी से हटा दिया जाना चाहिए.
मध्यम का पीएच 7.5। 0.2 होना चाहिए। निर्जलित माध्यम का रंग बैंगनी है और तैयार भूरा हरा है.
उपयोग
स्टेक और भोजन के नमूनों में जीनस शिगेला और साल्मोनेला के बैक्टीरिया की खोज के लिए हेकोटोइन अगर का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है।.
यदि नमूना पहले से विशेष शोरबा में समृद्ध हो, जैसे कि सेलेनाइट शोरबा, सेलेनाइट सिस्टीन शोरबा, टेट्राथिओनेट शोरबा, आदि में इन जीवाणुओं को अलग करने की संभावना बहुत बढ़ जाती है।.
इनोक्यूलम मजबूत होना चाहिए और बीजारोपण स्ट्रिपिंग द्वारा किया जाता है। एरोबायोसिस में 24 से 48 घंटों के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर प्लेटें लगाई जाती हैं.
ऊष्मायन की सिफारिश 48 घंटों के लिए की जाती है क्योंकि इस समय उनकी व्याख्या और भेदभाव के लिए उपनिवेशों की विशेषताएं स्पष्ट हैं.
गुणवत्ता नियंत्रण
इस माध्यम पर गुणवत्ता नियंत्रण करने के लिए, प्रमाणित जीवाणु उपभेदों का उपयोग किया जाता है, जैसे: साल्मोनेला टाइफिम्यूरियम एटीसीसी 14028, साल्मोनेला एंटरिटिडिस एटीसीसी 13076, शिगेला फ्लेक्सनेरी एटीसीसी 12022 और शिगेला सोनैनी एटीसीसी 25931.
अपेक्षित परिणाम निम्नलिखित हैं: साल्मोनेला टाइफिमुरियम और साल्मोनेला एंटरिटिडिस वे काले केंद्र के साथ या उसके बिना हरे-नीले रंग की कॉलोनियों को विकसित करना चाहिए। जबकि शिगेला प्रजाति नीली-हरी कॉलोनियों के रूप में विकसित होगी.
आप के उपभेदों को भी शामिल कर सकते हैं एस्केरिचिया कोलाई एटीसीसी 29212, प्रोटीन मिराबिलिस, क्लेबसिएला निमोनिया एटीसीसी 700603, एंटरोकोकस फेसेलिस एटीसीसी 29212 और स्टैफिलोकोकस ऑरियस एटीसीसी 25923.
इन मामलों में देखी गई विशेषताएँ निम्नलिखित हैं: ई। कोलाई और के। निमोनिया इस माध्यम में वे सामन-टू-ऑरेंज कालोनियों का विकास करेंगे, जिनके चारों ओर एक ही रंग का एक अवक्षेप होगा। इस बीच, प्रोटीस एक काले केंद्र के साथ या उसके बिना नीली-हरी कॉलोनियों का विकास करेगा.
जब एस ऑरियस और ई। मल कभी-कभी बाधित होना चाहिए ई। मल पीले रंग की कॉलोनियों के रूप में विकसित करने के लिए प्रबंधन, बहुत छोटा है.
दूसरी ओर, क्योंकि यह माध्यम आटोक्लेव में निष्फल नहीं है, इसलिए माध्यम की बाँझता का मूल्यांकन करना महत्वपूर्ण है। इसलिए, तैयार किए गए प्रत्येक बैच को एरोबायोसिस में 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर टीका लगाए बिना एक से दो प्लेटों को ऊष्मायन किया जाना चाहिए.
स्पष्ट रूप से यह उम्मीद की जाती है कि प्लेट पर किसी भी प्रकार का कोई विकास न हो.
सीमाओं
-प्रोटीन की प्रजातियां इस वातावरण में विकसित हो सकती हैं और उनके उपनिवेशों की विशेषताओं को साल्मोनेला या शिगेला प्रजातियों के साथ भ्रमित किया जा सकता है। इस कारण से किसी भी संदिग्ध कॉलोनी की जैव रासायनिक परीक्षणों से पुष्टि की जानी चाहिए.
-इस माध्यम का उपयोग अन्य कम चयनात्मक आगारों के साथ करना आवश्यक है, क्योंकि यदि मांगी गई सूक्ष्मता कम सांद्रता में पाई जाती है तो वह इस माध्यम में विकसित नहीं हो सकती है.
-इसकी तैयारी के दौरान ज़्यादा गरम न करें, क्योंकि अत्यधिक गर्मी माध्यम की संरचना को बदल देती है.
-असामान्य रूप से लैक्टोज-किण्वन साल्मोनेला कालोनियों पर किसी का ध्यान नहीं जा सकता है.
संदर्भ
- विकिपीडिया योगदानकर्ता। हेकटॉन एंटरिक अगार। विकिपीडिया, मुक्त विश्वकोश। 13 मार्च, 2019, 23:38 यूटीसी। यहाँ उपलब्ध है: .wikipedia.org / 16 मार्च 2019 को अभिगम.
- बीडी प्रयोगशालाओं बीडी हेकटन एंटरिक अग्र (HE Agar)। 2013. पर उपलब्ध: bd.com
- प्रयोगशालाओं ब्रिटानिया। हेकटन एंटरिक अगार। 2015 में उपलब्ध: britanialab.com
- डीम्को फ्रांसिस्को सोरिया मेलगुइज़ो प्रयोगशालाएँ। आगर हेकटन अगार। यहां उपलब्ध है: f-soria.es
- Difco और BBL मैनुअल, हेक्टोएन एंटरिक अगार। द्वितीय संस्करण। इसमें उपलब्ध: bd.com/europe