शेयर:
आगर एंडो फाउंडेशन, तैयारी और उपयोग
एंडो अगर या मध्यम एंडो एक निश्चित डिग्री के साथ एक ठोस, अंतर संस्कृति माध्यम है। मूल फार्मूला 1904 में एंडो द्वारा बनाया गया था ताकि लैक्टोज किण्वन करने वाले जीवाणुओं को गैर-किण्वन करने वाले जीवाणुओं से अलग किया जा सके। शुरुआत में इसे अलग-थलग करने के लिए डिज़ाइन किया गया था साल्मोनेला टाइफी, लेकिन बाद में माध्यम का उद्देश्य कोलीफॉर्म की तलाश में बदल गया.
एंडो एगर के सिद्धांत को बनाए रखा गया है, लेकिन इसके निर्माण में वर्षों में असंख्य परिवर्तन हुए हैं। वर्तमान में, माध्यम पेप्टाइड पचा हुआ पशु ऊतक, लैक्टोज, डिपोटेशियम हाइड्रोजन फॉस्फेट, सोडियम सल्फाइट, बेसिक फुचिन और अगर से बना है।.
माध्यम का मुख्य उपयोग परिवार एन्टरोबैक्टीरिया और पास के अन्य परिवारों से संबंधित ग्राम नकारात्मक बेसिली के अलगाव और भेदभाव से जुड़ा हुआ है।.
लंबे समय तक इसका उपयोग पानी, डेयरी और खाद्य नमूनों में कोलीफॉर्म का पता लगाने में किया गया था, लेकिन आजकल इस माध्यम का उपयोग इसी तरह के अन्य कार्यों द्वारा विस्थापित किया गया है। हालांकि, कुछ माइक्रोबायोलॉजी प्रयोगशालाएं नैदानिक उत्पत्ति के नमूनों से एंटरोबैक्टीरिया के अलगाव के लिए इस अगर का उपयोग करती हैं.
सूची
- 1 फाउंडेशन
- 2 तैयारी
- २.१ एंडो अगर
- २.२ अगर-एम-एंडो का वेरिएंट
- 3 का उपयोग करें
- 4 गुणवत्ता नियंत्रण
- 5 सीमाएँ
- 6 संदर्भ
आधार
एंडो एगर में पेप्टोन होते हैं जो अमीनो एसिड, नाइट्रोजन, कार्बन और ऊर्जा के स्रोत के रूप में काम करते हैं, जो सूक्ष्मजीवों के विकास के लिए आवश्यक हैं.
दूसरी ओर, अगरर का थोड़ा चुनिंदा चरित्र सोडियम सल्फाइट और बुनियादी फ़्यूचिन के अतिरिक्त द्वारा प्रदान किया जाता है; दोनों घटक आंशिक रूप से या पूरी तरह से अधिकांश ग्राम पॉजिटिव बैक्टीरिया के विकास को रोकते हैं.
विभेदक चरित्र किण्वित कार्बोहाइड्रेट की उपस्थिति द्वारा दिया जाता है, जो इस मामले में लैक्टोज और बुनियादी फुकसिन है, जो पीएच के संकेतक के रूप में भी काम करता है.
ग्राम-नेगेटिव बैक्टीरिया जो इस अग्र पर बढ़ते हैं और किण्वन में सक्षम हैं लैक्टोज मजबूत गुलाबी कालोनियों का निर्माण करेगा; के पैथोग्नोमोनिक होने के नाते एस्केरिचिया कोलाई हरे धात्विक चमक वाले इंद्रधनुषी रंग के साथ गहरे लाल रंग की कालोनियों का निर्माण। यह कार्बोहाइड्रेट के किण्वन से एसिड के उच्च उत्पादन के कारण है.
यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि कालोनियों के आसपास का माध्यम भी एक मजबूत गुलाबी रंग में बदल जाता है। जबकि लैक्टोज के गैर-किण्वन ग्राम-नेगेटिव बेसिली मध्यम या बेरंग के समान पीला गुलाबी कालोनियों.
डीपोटेशियम हाइड्रोजन फॉस्फेट माध्यम के पीएच को संतुलित करता है और अगर वह घटक है जो ठोस स्थिरता प्रदान करता है.
तैयारी
एंडो आगर
निर्जलित माध्यम का 41.5 ग्राम वजन और आसुत जल के 1 लीटर में भंग। मध्यम भंग होने तक मिश्रण को अक्सर हिलाकर गर्म करें। आटोक्लेव में 121 डिग्री सेल्सियस पर 15 एलबी दबाव पर 15 मिनट के लिए बाँझ करें.
आटोक्लेव से हटाते समय, लगभग 45-50 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर ठंडा करने की अनुमति दें, मिश्रण को परोसने से पहले समरूप बनाना। बाँझ पेट्री डिश में 20 मिलीलीटर डालो.
प्लेटों को फ्रिज में जमने से पहले एक बॉक्स में लपेटें या स्टोर करें या डार्क पेपर से लपेटें। तैयार माध्यम को सीधी रोशनी से बचाना बहुत जरूरी है। एक अनुशंसित अभ्यास वह सटीक मात्रा तैयार करना है जिसकी आवश्यकता होने वाली है.
यदि एक रेफ्रिजरेटर में संग्रहीत किया जाता है, तो प्लेटों को उपयोग करने से पहले टेम्पर्ड किया जाना चाहिए.
मध्यम का पीएच 7.2 से 7.6 के बीच होना चाहिए और तैयार माध्यम का रंग हल्का गुलाबी है।.
वेरिएंट अगर एम-एंडो
एंडो एगर (एम-एंडो) का एक और संस्करण है जो मैकार्थी, डेलाने और ग्रासो के फार्मूले का पालन करता है, जिसमें अधिक यौगिक होते हैं और तैयारी के तरीके में भिन्नता होती है।.
इस प्रकार में शामिल हैं: लैक्टोज, ट्रिप्टोज, कैसिइन का एंजाइमैटिक पाचन, जानवरों के ऊतक का एंजाइमैटिक पाचन, सोडियम क्लोराइड, डिबासिक पोटेशियम फॉस्फेट, सोडियम सल्फाइट, यीस्ट एक्सट्रैक्ट, पोटेशियम फॉस्फेट मोनोबेसिक, बेसिक फ्युचिन, सोडियम डीऑक्सीकलेट, लॉरिल सल्फेट। सोडियम और अगर की.
इस मामले में, हम निर्जलित माध्यम के 51 ग्राम का वजन करते हैं और इसे आसुत जल के 1 लीटर में 20 मिलीलीटर इथेनॉल से निलंबित कर देते हैं.
जब तक मध्यम पूरी तरह से भंग नहीं हो जाता है तब तक थोड़ा गर्म करें। ज़्यादा गरम न करें और एक आटोक्लेव में बाँझ न करें। मिश्रण समरूप होने के बाद, बाँझ पेट्री डिश में परोसें और जमने दें.
उपयोग
कुछ देशों में यह अभी भी पानी और खाद्य नमूनों में कुल और फेकल कोलीफॉर्म की गिनती के लिए उपयोग किया जाता है, खासकर की उपस्थिति एस्केरिचिया कोलाई मल संदूषण के मुख्य संकेतक के रूप में.
कीटाणुशोधन और अपशिष्ट उपचार कार्यक्रमों की निगरानी और नियंत्रण के साथ-साथ पीने के पानी की गुणवत्ता के मूल्यांकन के लिए अमेरिकन पब्लिक हेल्थ एसोसिएशन (APHA) द्वारा एम-एंडो अगर की सिफारिश की जाती है.
सबसे अधिक उपयोग की जाने वाली विधि झिल्ली निस्पंदन है, 2 से 4 घंटे के लिए लॉरिल सल्फेट शोरबा के साथ नमूने के संवर्धन के बाद.
यह सबसे संभावित संख्या तकनीक (NMP) द्वारा भोजन और पानी के सूक्ष्मजीवविज्ञानी विश्लेषण में ईएमबी आगर के विकल्प के रूप में भी इस्तेमाल किया जा सकता है, विशेष रूप से पूर्ण पुष्टिकरण चरण में उपस्थिति की पुष्टि करने के लिए ई। कोलाई टर्बिड ईसी शोरबा से.
गुणवत्ता नियंत्रण
तैयार किए गए एंडो एगर बैच की गुणवत्ता का मूल्यांकन करने के लिए, ज्ञात या प्रमाणित नियंत्रण उपभेद बोए जाते हैं.
इस उद्देश्य के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है कि उपभेदों में से हैं: एस्केरिचिया कोलाई एटीसीसी 25922, एस्केरिचिया कोलाई एटीसीसी 11775, एंटरोबैक्टीरिया क्लोकै एटीसीसी 13047, क्लेबसिएला निमोनिया एटीसीसी 13883, साल्मोनेला टाइफिम्यूरियम एटीसीसी 14028, शिगेला फ्लेक्सनेरी एटीसीसी 12022, प्रोटीन मिराबिलिस ATCC 14153 और एंटरोकोकस फेसेलिस एटीसीसी 11700.
एरोबियोसिस में 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर थकावट द्वारा बुवाई की जाती है.
अपेक्षित परिणाम हैं:
- को एस्केरिचिया कोलाई: कॉलोनी मजबूत लाल, धात्विक चमक के साथ.
- को ई। क्लोके और के। निमोनिया कालोनियों को गुलाबी म्यूकोइड होना चाहिए.
- एस के मामले में. टाइफिमुरियम, एस। फ्लेक्सनेरी और पी। मिराबिलिस उपनिवेश आमतौर पर हल्के गुलाबी या रंगहीन होते हैं.
- अंत में, ई। मल यह आंशिक रूप से बाधित होने की उम्मीद है, इसलिए इसकी वृद्धि मजबूत गुलाबी रंग की बहुत छोटी कॉलोनियों के साथ खराब होनी चाहिए.
सीमाओं
-एंडो माध्यम में कम चयनात्मक शक्ति होती है, इसलिए, यह संभव है कि कुछ ग्राम सकारात्मक सूक्ष्मजीव जैसे कि स्टेफिलोकोकस, एंटरोकोकस और यहां तक कि खमीर भी बढ़ सकते हैं.
-अन्य बैसिली एंटरोबैक्टीरियासी परिवार से संबंधित नहीं हैं, उदाहरण के लिए, इस माध्यम में विकसित हो सकते हैं स्यूडोमोनास सपा और एरोमोनास सपा. इन उपभेदों की विशेषताएं रंगहीन अनियमित उपनिवेश हैं.
-तैयार किया गया यह माध्यम प्रकाश के प्रति बहुत संवेदनशील है, इसलिए, लंबे समय तक इसका संपर्क संकेतक प्रणाली को बिगड़ता है, इस माध्यम से अपरिवर्तनीय रूप से.
-माध्यम के घटकों को कार्सिनोजेनिक माना जाता है, इसलिए सीधे संपर्क से बचा जाना चाहिए.
-निर्जलित माध्यम बहुत हीड्रोस्कोपिक है और इसे कमरे के तापमान पर अपने मूल कंटेनर में रखा जाना चाहिए, कसकर बंद और शुष्क वातावरण में।.
संदर्भ
- बीडी प्रयोगशालाओं एंडो आगर। 2013. पर उपलब्ध: bd.com
- नियोजन प्रयोगशालाएँ एम एंडो आगर। पर उपलब्ध: foodsafety.neogen.com
- "आगर एंडो।" विकिपीडिया, मुक्त विश्वकोश. 7 सितंबर 2017, 08:27 यूटीसी। 28 फरवरी 2019, 22:55। में उपलब्ध: en.wikipedia.
- मर्क प्रयोगशाला। एंडो अगर 2019. पर उपलब्ध: merckmillipore.com
- प्रयोगशालाओं तकनीकी शीट। एम -एंडो आगर एलईएस। 2015 में उपलब्ध: liofilchem.net