अगर बंद नींव, उपयोग और तैयारी

सीएलईडी अगर (सिस्टीन-लैक्टोज-इलेक्ट्रोलाइट्स-डिफिसिएंट) एक अंतर ठोस संस्कृति माध्यम है, जिसका उपयोग मूत्र पथ के संक्रमण के निदान के लिए किया जाता है। संस्कृति माध्यम की संरचना मूत्र रोगजनकों की अच्छी वृद्धि के लिए डिज़ाइन की गई है और कॉलोनी बनाने वाली इकाइयों (सीएफटी) के परिमाण के लिए आदर्श है।.

सीएलईडी संस्कृति माध्यम गैर-चयनात्मक है, क्योंकि ग्राम-नकारात्मक और ग्राम-सकारात्मक सूक्ष्मजीव भी इसमें विकसित हो सकते हैं। लेकिन यह एक समस्या नहीं है, क्योंकि अधिकांश मूत्र पथ के संक्रमण एक प्रकार के सूक्ष्मजीव के कारण होते हैं.

पॉलीमाइक्रोबियल संक्रमण के मामले में 2 या 3 अलग-अलग बैक्टीरिया प्राप्त किए जा सकते हैं, लेकिन यह बहुत दुर्लभ है और अधिकांश समय यह दूषित नमूने हैं.

इस माध्यम में विकसित होने वाले ग्राम-नकारात्मक बैक्टीरिया में परिवार से संबंधित बेसिली हैं Enterobacteriaceae और अन्य एंटेरिक बेसिली, यूरोपाथोजेन को मूत्र के नमूनों में सबसे अधिक बार पृथक किया जाता है: एस्चेरिचिया कोली, क्लेबसेला निमोनिया, प्रोटीस मिराबिलिस, मॉर्गनेल्ला मॉर्गानी, स्यूडोमोनास एरुगिनोसा, दूसरों के बीच में.

इसी तरह, ग्राम-पॉजिटिव बैक्टीरिया के बीच जो इस माध्यम में विकसित हो सकते हैं स्ताफ्य्लोकोच्चुस, स्टाफीलोकोकस saprophyticus, उदर गुहा faecalis, स्ट्रेप्टोकोकस agalactiae, Corynebacterium एसपी, लैक्टोबैसिलस एसपी और वे भी जटिल की तरह खमीर विकसित कर सकते हैं कैंडिडा अल्बिकंस.

हालांकि, माध्यम की रासायनिक संरचना के कारण यह कुछ मांग वाले आनुवांशिक रोगजनकों की वृद्धि की अनुमति नहीं देता है, जैसे कि निसेरिया गोनोरिया, गर्द्नेरेल्ला वेजिनेलिस, दूसरों के बीच में.

सूची

• 1 CLED agar का फाउंडेशन
• CLED agar (Bevis) के 2 फाउंडेशन
• ३ उपयोग
  • 3.1 मूत्र के नमूने बुवाई
  • ३.२ व्याख्या
  • ३.३ पहचान
• 4 तैयारी
• 5 संदर्भ

CLED agar का फाउंडेशन

सीएलईडी संस्कृति माध्यम में ऊर्जा स्रोत मांस का अर्क, कैसिइन अग्नाशय हाइड्रोलाइजेट और जिलेटिन हाइड्रोलाइजेट होता है। वे बिना बैक्टीरिया के विकास के लिए पोषक तत्व प्रदान करते हैं.

इसमें सिस्टीन भी शामिल है, एक अमीनो एसिड जो कोलीफॉर्म की वृद्धि की अनुमति देता है, अपने छोटे आकार से अलग.

इसी तरह, लैक्टोज में किण्वित कार्बोहाइड्रेट होते हैं, इस कारण से यह माध्यम अंतर है; गैर-किण्वन लैक्टोज से किण्वन बैक्टीरिया को भेद करने में सक्षम होना.

किण्वन बैक्टीरिया, पीले कालोनियों के विकास के लिए एसिड उत्पादन का पीएच बनाने बारी जबकि गैर उत्साहवर्द्धक बैक्टीरिया पर्यावरण में परिवर्तन पैदा न करें, इस प्रकार मूल अगर के रंग, हरी लेने.

पीएच संकेतक की उपस्थिति के लिए किण्वन प्रतिक्रिया का पता चला है, जो इस माध्यम में ब्रोमोथाइमोल नीला है.

दूसरी ओर, माध्यम की कम इलेक्ट्रोलाइट सांद्रता जीनस के विशिष्ट आक्रामक विकास को रोकती है रूप बदलनेवाला प्राणी, झुंड प्रभाव कहा जाता है। यह अन्य साधनों के संबंध में एक फायदा पैदा करता है, क्योंकि यह यूएफसी की गिनती की अनुमति देता है, जिसमें यह भी शामिल है कि प्रोटियस जीनस मौजूद हैं.

हालांकि, इलेक्ट्रोलाइट्स की कम एकाग्रता जीनस की कुछ प्रजातियों के विकास को रोकती है शिगेला, अन्य साधनों के संबंध में यह एक नुकसान है.

CLED agar (बेविस) का आधार

बेविस द्वारा बनाए गए इस माध्यम का एक संस्करण या संशोधन है, जिसने मूल संरचना में मूल फुकसिन एसिड रचना (एंड्रेड सूचक) को शामिल किया है। यह गैर-किण्वन बैक्टीरिया से किण्वन को अलग करने के लिए ब्रोमोथाइमॉल ब्लू के साथ मिलकर काम करता है.

पारंपरिक विधि और संशोधित रंग के बीच अंतर कालोनियों को अपना रहा है। लैक्टोज बैक्टीरिया किण्वन के मामले में, कालोनियों, एक गुलाबी या लाल प्रभामंडल के साथ एक लाल नारंगी का विकास करते हुए nonfermenters नीले-भूरे रंग के होते हैं.

अनुप्रयोगों

CLED agar का उपयोग विशेष रूप से मूत्र के नमूनों की बुवाई के लिए किया जाता है। इस माध्यम का उपयोग विशेष रूप से यूरोपीय प्रयोगशालाओं में अक्सर होता है, जबकि अमेरिका में इसका उपयोग कम होता है.

नमूने का संग्रह विश्वसनीय परिणाम प्राप्त करने के लिए कुछ मापदंडों को पूरा करना चाहिए, जिसमें शामिल हैं:

• सैंपल लेने से पहले एंटीबायोटिक्स न लें.
• अधिमानतः सुबह के पहले घंटे से मूत्र लें, क्योंकि यह अधिक केंद्रित है, जब इनवेसिव विधियों द्वारा नमूने लेना संभव नहीं है.
• नमूना लेने से पहले जननांगों को अच्छी तरह से धो लें.
• पहले पेशाब की धारा को त्यागें और फिर कंटेनर को रखें.
• बाँझ लेबल वाले कंटेनरों में मूत्र के 25 से 30 मिलीलीटर के बीच इकट्ठा करें.
• बर्फ में घिरे प्रयोगशाला में तुरंत ले जाएं.
• इसे अधिकतम 24 घंटों के लिए 4 डिग्री सेल्सियस पर 2 घंटे के उत्सर्जन या प्रशीतित करने से पहले संसाधित किया जाना चाहिए.

मूत्र के नमूने बुवाई

मूत्र का नमूना 1:50 पतला होना चाहिए.

कमजोर पड़ने के लिए, रोगी के मूत्र के 0.5 मिलीलीटर को रखें और बाँझ शारीरिक समाधान के 24.5 मिलीलीटर के साथ पतला करें.

पतला मूत्र के 0.1 मिलीलीटर को मापने और CLED माध्यम पर एक drigalski रंग के साथ प्रति सतह बोना। यह उपनिवेशों की गिनती के लिए संकेतित बीजारोपण विधि है। इसीलिए इसका उपयोग मूत्र के नमूनों में किया जाता है, क्योंकि परिणाम CFU / ml में व्यक्त किए जाने चाहिए.

इन कालोनियों की मात्रा के लिए, आगे बढ़ने के लिए इस प्रकार है: कालोनियों गिनती और प्लेट 10 से गुणा करें और फिर 50 इस CFU / एमएल मूत्र की संख्या प्राप्त.

व्याख्या

100,000 CFU / ml -Indica मूत्र संक्रमण से ऊपर की गिनती

1000 CFU / ml से नीचे की गिनती - कोई संक्रमण नहीं

1000-10,000 CFU / ml -Doubtful, संभावित संदूषण के बीच गिनती, नमूना लेना दोहराएं.

पहचान

CLED agar पर उगाए गए उपनिवेशों को एक ग्राम बनाया जाना चाहिए और सूक्ष्मजीवों की रूप-रेखात्मक विशेषताओं के आधार पर एक निश्चित उपसंस्कृति का प्रदर्शन किया जाता है.

उदाहरण के लिए, यदि यह एक ग्राम नकारात्मक बेसिलस है, तो इसे मैककॉन्की अगर पर बोया जाएगा, जहां किण्वन या लैक्टोज का नहीं है, की पुष्टि की जाती है। इसके अलावा, ऑक्सीडेज़ टेस्ट करने के लिए एक पौष्टिक अगर जुड़ा होता है.

मामले में ग्राम ने ग्राम पॉजिटिव कोकसी का खुलासा किया है तो इसे नमकीन मैनिटोल अगर में और पोषक तत्वों की मात्रा में उपसंस्कृत किया जा सकता है। उत्तरार्द्ध में, उत्प्रेरक परीक्षण किया जाता है। अंत में, यदि यीस्ट का अवलोकन किया जाता है, तो इसे एक साबुद अगार पर बोया जाएगा.

कई प्रयोगशालाएं सीएलएड माध्यम के उपयोग को कम करती हैं और मूत्र के नमूनों को बोने के लिए केवल रक्त अगर, मैककॉन्की और पोषक तत्वों का उपयोग करना पसंद करती हैं।.

तैयारी

एक लीटर आसुत जल के साथ एक शीशी में, 36.2 ग्राम पाउडर सीएलईडी अगर मिलाएं। 5 मिनट के आराम के बाद, 1 घंटे के लिए उबलने तक लगातार मिश्रण, गर्म अगर को गर्म करें.

फिर आटोक्लेव में 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर बाँझ। एक बार समय समाप्त होने के बाद, इसे आटोक्लेव से हटा दिया जाता है और 45 डिग्री सेल्सियस के तापमान तक पहुंचने तक ठंडा होने दिया जाता है। इसके बाद प्रत्येक बाँझ पेट्री डिश में 15 - 20 मिलीलीटर के बीच परोसा जाता है.

प्लेटों को परोसने की प्रक्रिया को एक लामिना का प्रवाह हुड के अंदर या संदूषण से बचने के लिए ब्यूसेन बर्नर के सामने किया जाना चाहिए.

परोसे गए प्लेटों को जमने दिया जाता है, प्लेट धारक को उल्टे क्रम में इस्तेमाल किया जाता है और फ्रिज में स्टोर किया जाता है (2-8 ° C).

तैयार माध्यम का अंतिम पीएच 7.3 prepared 0.2 होना चाहिए.

संदर्भ

1. मूत्र पथ के संक्रमण के सूक्ष्मजीवविज्ञानी निदान के लिए सिफारिशें. चिल। infectol.  2001; 18 (1): 57-63। पर उपलब्ध: scielo.org.
2. Panchi J. माइक्रोबियल एजेंट की पहचान मूत्राशय कैथीटेराइजेशन से गुजरने वाले आंतरिक रोगियों में मूत्र संक्रमण के कारण। 2016. क्लिनिकल लेबोरेटरी में लाइसेंस के पद के लिए आवेदन करने के लिए स्नातक काम। अम्बातो का तकनीकी विश्वविद्यालय। इक्वेडोर.
3. प्रयोगशालाओं ब्रिटानिया। आधा बंद। पर उपलब्ध: britanialab.com.
4. रेनिलैब लेबोरेटरीज उपयोग के लिए निर्देश, सीएलईडी आगर। 2013 में उपलब्ध: www.renylab.ind.br.
5. सांस्कृतिक प्रयोगशालाओं माइक्रोबायोलॉजी का मूल मैनुअल। पर उपलब्ध: ictsl.net.
6. म्यूनोज़ पी, क्रेकेनैडो ई, रोड्रिग्ज़-क्रेक्सिम्स एम, डिआज़ एमडी, विसेंट टी, बूजा ई। मूत्र संस्कृति दिनचर्या में सीएलईडी अगर विकल्प। एक संभावित और तुलनात्मक मूल्यांकन। डायग्नोस्टिक माइक्रोबॉयल इन्फेक्ट डिस। 1992; 15 (4): 287-90.
7. गार्सिया पी, परेडेस एफ, फर्नांडीज डेल बारियो एम। (1994)। व्यावहारिक नैदानिक ​​माइक्रोबायोलॉजी। कैडिज़ विश्वविद्यालय, द्वितीय संस्करण। UCA प्रकाशन सेवा.