नकारात्मक धुंधला नींव, तकनीक, फायदे और नुकसान

नकारात्मक धुंधला हो जाना यह कुछ सूक्ष्मजीवों में कैप्सूल की उपस्थिति को उजागर करने के लिए एक विशेष रंग विधि है-मुख्य रूप से स्ट्रेप्टोकोकस न्यूमोनिया, क्लेबसिएला न्यूमोनिया और क्रिप्टोकोकस नियोफ़ॉर्मन्स-, नैदानिक ​​नमूनों या शुद्ध संस्कृतियों से.

आमतौर पर नकारात्मक धुंधला लगाने के लिए इस्तेमाल किया जाने वाला प्रत्यक्ष नमूना मस्तिष्कमेरु द्रव है। यह तकनीक विशेष रूप से मैनिंजाइटिस के प्रकल्पित निदान के लिए एक त्वरित विकल्प का प्रतिनिधित्व करती है क्रिप्टोकोकस नियोफ़ॉर्मन्स.

इसी तरह, इस दाग को सामान्य रूप से थूक और बाँझ तरल पदार्थों पर लगाया जा सकता है, साथ ही पुरानी संस्कृतियों से प्राप्त उपभेदों पर भी लगाया जा सकता है। यह तकनीक इसके निष्पादन के लिए नाइग्रोसिन या चीनी स्याही का उपयोग करती है; इसलिए, यह लागू करने के लिए एक बहुत ही सरल और आर्थिक पद्धति है जो थोड़े समय में महान नैदानिक ​​मूल्य की जानकारी प्रदान करता है.

इस अर्थ में, कोई भी प्रयोगशाला इस रंग प्रदर्शन करने में सक्षम है। बेशक, प्रयोगशाला में एक सक्षम कर्मचारी होना चाहिए, के खमीर को पहचानने में सक्षम क्रिप्टोकोकस नियोफ़ॉर्मन्स अलग या नवोदित और उन्हें ल्यूकोसाइट्स और कलाकृतियों से अलग करता है जो नमूना पेश कर सकता है.

सूची

• 1 फाउंडेशन
• 2 तकनीक
  • 2.1 सामग्री
  • २.२ नमूने के लिए विनिर्देशों
  • 2.3 प्रत्यक्ष नमूनों के साथ तकनीक का निष्पादन
  • 2.4 संस्कृति से उपभेदों के साथ तकनीक का निष्पादन
  • 2.5 एक माइक्रोस्कोप में अवलोकन
• 3 फायदे
• 4 नुकसान
• 5 भारतीय स्याही से धुंधला हो जाना
• 6 संदर्भ

आधार

निग्रोसिन और भारतीय स्याही एक समान तरीके से कार्य करते हैं; इसलिए, दोनों में से किसी भी एक पदार्थ का परस्पर उपयोग किया जा सकता है.

इस तकनीक को नकारात्मक धुंधला कहा जाता है क्योंकि यह रंग की बाकी तकनीकों के विपरीत कार्य करता है। इसमें जो कुछ भी शेष है वह संरचना है जो मांगी जा रही है या जिसे आप देखना चाहते हैं; वह है, सूक्ष्मजीव.

इसलिए, रंग एक गहरे रंग में धब्बा नीचे रंगाई पर आधारित है। इस परिदृश्य में छायांकित संरचनाओं को हल्के या रंगहीन रंग में हाइलाइट किया जाएगा.

सामान्य तौर पर, यीस्ट को रिफ्लेक्ट किया जाता है, जो एक स्पष्ट प्रभामंडल से घिरा होता है जो कैप्सूल से मेल खाता है। ऐसा इसलिए होता है क्योंकि चीनी स्याही और निग्रोसिन ऐसे पदार्थ होते हैं जो पॉलीसेकेराइड को भेदने में असमर्थ होते हैं जो जीवित सूक्ष्मजीवों का कैप्सूल बनाते हैं.

यह ध्यान देने योग्य है कि अन्य संरचनाएं जो प्रत्यक्ष नमूने में मौजूद हो सकती हैं, जैसे कि ल्यूकोसाइट्स या लाल रक्त कोशिकाएं, घुसना नहीं करती हैं.

अब, यदि सूक्ष्मजीव मर गए हैं, तो टिंचर उनके अंदर घुस सकता है, ऐसे में सूक्ष्मजीवों की व्यवहार्यता का मूल्यांकन करने के लिए यह धुंधला भी उपयोगी है.

तकनीक

सामग्री

nigrosine

निग्रोसिन के पास इसके काले रंग का नाम है। यह एक सिंथेटिक पदार्थ है जो कार्बनिक यौगिकों के मिश्रण को गर्म करके प्राप्त किया जाता है - जैसे नाइट्रोबेनज़िन, एनिलिन और एनिलिन हाइड्रोक्लोराइड - एक प्रतिक्रिया में उत्प्रेरक (लोहा या तांबा) का उपयोग करना।.

चीनी स्याही

चीनी स्याही एक ऐसा पदार्थ है जिसका उपयोग मुख्य रूप से एशियाई लोग लिखने, कला और एक रंग की पेंटिंग बनाने के लिए करते हैं। यह चीनी संस्कृति में बहुत लोकप्रिय है.

यह स्क्वीराइज्ड कोयले से मिलाया जाता है, जो कि छोटे राल वाले पेड़ों के जलने के उत्पाद के साथ मिलाया जाता है.

एक प्रोटीन जिलेटिन के साथ हाइड्रोकार्बन (वनस्पति तेलों) के भक्षण की कालिख से इसे तैयार करना भी संभव है, जो कार्बन कणों की वर्षा को रोकने के लिए इसे सही स्थिरता देता है.

नमूने के लिए विनिर्देशों

- उपवास की आवश्यकता नहीं है.

- सीएसएफ, थूक या बाँझ तरल के नमूने में कम से कम 1 मिलीलीटर मात्रा होनी चाहिए और प्रयोगशाला में तुरंत कमरे के तापमान पर स्थानांतरित किया जाना चाहिए।.

- सीएसएफ और बाँझ तरल नमूनों को एक विशेष चिकित्सक द्वारा लिया जाना चाहिए.

- यह एक संदिग्ध तनाव की एक शुद्ध संस्कृति भी हो सकती है जो उपर्युक्त रोगजनकों से जुड़ा हुआ है.

प्रत्यक्ष नमूनों के साथ तकनीक का निष्पादन

- नमूनों को सेंट्रीफ्यूग किया जाना चाहिए, फिर सतह पर तैरनेवाला त्याग दिया जाता है और तलछट ले जाया जाता है.

- सेंट्रीफ्यूग्ड मैटेरियल (तलछट) की एक बूंद और चीनी स्याही या निग्रोसिन की एक बूंद को साफ स्लाइड पर रखा जाता है।.

- इसे अच्छी तरह से मिलाया जाना चाहिए और एक कवर स्लिप के साथ कवर किया जाना चाहिए, जिससे किनारों के बिना ड्रॉप एक पतली फिल्म की तरह फैल सकती है.

- इसके बाद तैयारी माइक्रोस्कोप में मुहिम शुरू की है.

- यदि तैयारी बहुत गहरा है, तो इसे पानी से पतला किया जा सकता है.

संस्कृति से उपभेदों के साथ तकनीक का निष्पादन

- एक युवा फसल का एक बहुत छोटा हिस्सा एक बोने की सुई के साथ लिया जाता है और चीनी स्याही की एक बूंद में भंग कर दिया जाता है जो पहले एक शांत स्लाइड पर रखा गया था.

- शीर्ष पर एक coverslip रखा गया है.

- यह माइक्रोस्कोप में 10X और फिर 40X पर देखा जाता है.

आप आसुत जल में कॉलोनी के एक हिस्से को भी भंग कर सकते हैं, और वहां से एक बूंद लें और इसे स्याही के साथ मिलाएं। इस तरह से तैयारी इतनी मोटी नहीं होगी, जिससे अलगाव में संरचनाओं का निरीक्षण करना संभव होगा; यदि एग्लोमरेशंस हैं, तो यह अच्छी तरह से मनाया नहीं जाएगा.

एक अन्य कार्यप्रणाली निम्नलिखित है:

- स्लाइड के एक छोर पर निलंबन में संस्कृति की एक बूंद रखें.

- उसी छोर पर निग्रोसिन की एक बूंद रखें और मिलाएं.

- एक अन्य स्लाइड की मदद से, नमूने का विस्तार करें जैसे कि आप एक हेमटोलॉजिकल स्मीयर कर रहे थे.

- खुर्दबीन के नीचे सूखने और निरीक्षण करने दें.

एक माइक्रोस्कोप में अवलोकन

पहले आपको क्षेत्र के बारे में व्यापक दृष्टिकोण रखने के लिए 10X उद्देश्य के साथ ध्यान केंद्रित करना चाहिए। इसके बाद आपको खोज करनी चाहिए कि क्या स्पष्ट स्थान हैं; यदि हैं, तो विवरण देखने के लिए 40X पर ध्यान केंद्रित करें.

लाभ

- इसे निष्पादित करना आसान है.

- यह एक आर्थिक तकनीक है.

- इस विधि के लिए जरूरी नहीं है कि धब्बा गर्मी या रसायनों के लिए तय किया जाए; इसलिए, सूक्ष्मजीव विकृतियों के बिना देखे जाते हैं.

- ताजा तैयारी को सूखने की आवश्यकता नहीं है, इसलिए इसे तुरंत मनाया जा सकता है, जिससे परिणाम जल्दी से उत्पन्न हो सकते हैं.

हानि

एक बार इकट्ठे होने के बाद, ताजा तैयारी तुरंत देखी जानी चाहिए; यदि उन्हें सूखने दिया जाता है, तो उन्हें और एक नए का निरीक्षण करना संभव नहीं है.

भारतीय स्याही के साथ ऊतक धुंधला हो जाना

एक और कार्य जो चीनी स्याही पूरा कर सकती है वह पैथोलॉजी प्रयोगशालाओं में है। यह ट्यूमर के नमूनों पर लागू किया जाता है ताकि ट्यूमर के रिसेप्शन के मार्जिन को चिह्नित करने के लिए शल्य चिकित्सा से हटा दिया जाए.

चिह्नित ऊतक को एसिटिक एसिड के साथ छिड़का जाता है। यह एक मोर्डेंट के रूप में कार्य करता है और जब बायोप्सी तैयारी के लिए ऊतक को नियमित प्रसंस्करण के अधीन किया जाता है तो स्याही को आने से रोकता है.

प्रक्रिया में अल्कोहल और xylene में ऊतक को स्नान करने और फिर पैराफिन मोम में इम्बाइबिंग शामिल है। यह अंकन ऊतक का अवलोकन करते समय पैथोलॉजिस्ट का मार्गदर्शन करता है, यह दर्शाता है कि सर्जिकल रिसेशन या ब्याज के अन्य बिंदु कहां हैं.

संदर्भ

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