सरल धुंधला क्या है? शीर्ष सुविधाएँ

साधारण धुंधला हो जाना एक तीव्र और सरल धुंधला प्रक्रिया है जिसमें एक एकल डाई का उपयोग किया जाता है, इसीलिए इसे सरल कहा जाता है। यह मुख्य रूप से एक नमूने में मौजूद कोशिकाओं के आकारिकी और संगठन को निर्धारित करने के लिए उपयोग किया जाता है.

स्वाभाविक रूप से कोशिकाओं में रंग नहीं होता है, इसलिए उन्हें माइक्रोस्कोप में देखा जाने पर किसी तरह से दिखाई देना आवश्यक है.

इस बात पर जोर देना महत्वपूर्ण है कि साधारण धुंधला में उपयोग किए जाने वाले रंजक सकारात्मक आवेश (cationic) के साथ बुनियादी होने चाहिए, ताकि वे सहज रूप से कोशिका भित्ति और साइटोप्लाज्म से बंध सकें.

इन सेलुलर संरचनाओं को नकारात्मक रूप से चार्ज किया जाता है। यही कारण है कि डाई, सकारात्मक रूप से चार्ज किया जाता है, कोशिकाओं के प्रति आकर्षित होता है और अनायास उन्हें बांधता है। इस प्रकार, एक नमूने में मौजूद सभी कोशिकाएं तेजी से रंगीन होती हैं.

डाईज़ का उपयोग साधारण धुंधला में किया जाता है

कई बुनियादी रंजक हैं जिन्हें माइक्रोबायोलॉजी प्रयोगशाला में इस्तेमाल किया जा सकता है। सबसे अधिक उपयोग किया जाता है:

- मेथिलीन नीला.

- क्रिस्टल बैंगनी.

- मैलाकाइट ग्रीन.

- बेसिक फुच्सिन.

ये सभी डाई बैक्टीरिया में अच्छी तरह से काम करते हैं क्योंकि उनके पास रंगीन आयनों (क्रोमोफोरस) का आरोप लगाया जाता है.

इनमें से अधिकांश रंगों का धुंधला समय अपेक्षाकृत कम होता है। वे आमतौर पर डाई की आत्मीयता के आधार पर 30 सेकंड से 2 मिनट तक होते हैं.

यह ध्यान रखना महत्वपूर्ण है कि साधारण धुंधला द्वारा एक नमूना रंगने से पहले, इसे बढ़ाया जाना चाहिए और ग्लास स्लाइड (स्लाइड) पर तय किया जाना चाहिए; विस्तारित और निश्चित नमूने को स्मीयर कहा जाता है.

एक साधारण धुंधला प्रदर्शन करने के लिए 6 चरणों

चरण 1

स्लाइड को एक धुंधला रैक पर रखें और वांछित डाई लागू करें। इसी समय को छोड़ दें.

आमतौर पर, साधारण धुंधला उपयोग किए गए रंग के आधार पर कुछ सेकंड या कुछ मिनट लगते हैं.

अवलोकन

इस चरण में डाई का उपयोग करने के लिए अनुशंसित समय से अधिक नहीं होना महत्वपूर्ण है, क्योंकि क्रिस्टल शीट पर बन सकते हैं, जो "कलाकृतियों" के रूप में जाने जाते हैं जो कोशिकाओं के आकारिकी को विकृत करते हैं।.

चरण 2

ध्यान से स्लाइड के धब्बा को एक बोतल से आसुत जल से, या धीरे-धीरे बहने वाले नल के पानी से भी धोएं, जब तक कि अपवाह पारदर्शी न हो जाए। इसमें आमतौर पर 5 से 10 सेकंड लगते हैं.

अवलोकन

स्मीयर पर सीधे पानी की धारा को लागू न करें, नमूना के नुकसान से उसी के बल को रोकने के लिए.

यदि आपके पास आसुत जल नहीं है, तो आप बिना किसी समस्या के नल के पानी का उपयोग कर सकते हैं क्योंकि यह धुंधला परिणाम को प्रभावित नहीं करेगा.

चरण 3

एक दिशा में और बिना रगड़ के शोषक कागज तौलिये से स्लाइड को सुखाएं। सुनिश्चित करें कि स्लाइड के नीचे साफ है.

चरण 4

माइक्रोस्कोप में दाग धब्बा का निरीक्षण करें। उस क्षेत्र का ठीक से पता लगाने के लिए सबसे दूर के उद्देश्यों के साथ शुरू करें जिसे आप अधिक विस्तार से देखना चाहते हैं। नमूना के करीब और करीब पाने के लिए उद्देश्य बदलें.

अवलोकन

उच्चतम आवर्धन (आमतौर पर 100X) के साथ लेंस के उपयोग के लिए, विसर्जन तेल का उपयोग किया जाना चाहिए, क्योंकि यह प्रकाश को बेहतर ढंग से घुसने में मदद करता है और छवि को तेज करने के लिए। यह एक coverslip का उपयोग करने के लिए आवश्यक नहीं है.

चरण 5

अंत में, एक उपयुक्त कंटेनर में सभी नमूनों को त्याग दें जिसे ठीक से "बायोझार्ड" के रूप में लेबल किया गया है.

संदर्भ

1. (2001). माइक्रोबायोलॉजिकल अनुप्रयोग: जनरल माइक्रोबायोलॉजी में प्रयोगशाला मैनुअल (8 ^वें एड।)। मैकग्रा-हिल कंपनियां.
2. हरिशा, एस। (2006). प्रैक्टिकल बायोटेक्नोलॉजी का एक परिचय (1^सेंट)। फ़ायरवॉल मीडिया.
3. मोयेस, आर। बी।, रेनॉल्ड्स, जे।, और ब्रेकवेल, डी। पी। (2009)। बैक्टीरिया का प्रारंभिक धुंधला: सरल दाग. माइक्रोबायोलॉजी में वर्तमान प्रोटोकॉल, (SUPPL 15), 1-5.
4. पोमेरविल, जे। (2013). अल्कोमो की प्रयोगशाला बुनियादी बातों के माइक्रोबायोलॉजी (10^वें)। जोन्स एंड बार्टलेट लर्निंग.
5. प्रेस्कॉट, एच। (2002). माइक्रोबायोलॉजी में प्रयोगशाला व्यायाम (5 ^वें)। मैकग्रा-हिल कंपनियां.
6. सुंबाली, जी। और मेहरोत्रा, आर। (2009). माइक्रोबायोलॉजी के सिद्धांत (1^सेंट)। टाटा मैकग्रा-हिल एजुकेशन.