ईसी शोरबा नींव, तैयारी और उपयोग करता है

ईसी शोरबा या शोरबा एस्केरिचिया कोलाई यह एक चुनिंदा तरल संस्कृति का माध्यम है। यह माध्यम पानी और खाद्य नमूनों में सबसे संभावित संख्या (एनएमपी) की तकनीक द्वारा, जहां मुख्य एजेंट शामिल है, की गिनती के लिए मानक विधियों द्वारा मानक तरीकों की सिफारिश की जाती है। एस्केरिचिया कोलाई.

ईसी शोरबा ट्रिप्टीन, लैक्टोज, पित्त लवण, डिपोटेशियम फॉस्फेट, मोनोपोटेशियम फॉस्फेट, सोडियम क्लोराइड और पानी से बना है। इसका सूत्र रणनीतिक रूप से कुल और फेकल कोलीफॉर्म के विकास के पक्ष में है और अन्य सूक्ष्मजीवों के विकास को रोकने के लिए बनाया गया है.

जीवाणु एस्केरिचिया कोलाई पानी और खाद्य स्रोतों में एक संदूषक के रूप में मौजूद मुख्य फेकल कोलीफॉर्म है, जिससे महत्वपूर्ण जठरांत्र प्रभावित होता है.

यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि इसके कई सीरोटाइप हैं एशेरचिया कोलाई; उनमें से हम एंटेरोहेमोरेजिक (EHEC), एंटरोइनवेसिव (EIEC), एंटरोपैथोजेनिक (EPEC), एंटरोटोक्सिजेनिक (ETEC) और एंटरोएग्रिगेटिव (EAEC) का उल्लेख कर सकते हैं.

इस साधन में उन सभी के विकास की अनुमति देने की क्षमता है, लेकिन उनके बीच अंतर करने में सक्षम होने के बिना। ऐसा करने के लिए, अतिरिक्त परीक्षण किए जाने चाहिए.

कुल और फेक कॉलिफोर्म की खोज के लिए सबसे संभावित संख्या (एनएमपी) द्वारा पानी और भोजन का सूक्ष्मजीवविज्ञानी अध्ययन एक प्रोटोकॉल है जो कई चरणों के अनुरूप है; प्रकल्पित चरण, पुष्टिकरण चरण और समापन चरण। ईसी शोरबा पुष्टिकरण चरण में उपयोग किया जाता है.

सूची

• 1 फाउंडेशन
  • १.१ ईसी शोरबा
  • 1.2 ईसी शोरबा novobiocin के साथ संशोधित
• 2 तैयारी
  • 2.1 ईसी शोरबा
  • 2.2 ईसी शोरबा novobiocin के साथ संशोधित
• 3 का उपयोग करें
  • 3.1 कुल और fecal कोलीफॉर्म का विश्लेषण
• 4 गुणवत्ता नियंत्रण
• 5 सिफारिशें
• 6 संदर्भ

आधार

ईसी शोरबा

ईसी माध्यम कुल और फेकल कोलीफॉर्म के इष्टतम विकास के लिए आवश्यक पोषण तत्व प्रदान करने पर आधारित है, जिसमें जीवाणु शामिल हैं एस्केरिचिया कोलाई.

ये पोषक तत्व ट्रिप्टीन द्वारा प्रदान किए जाते हैं, पेप्टाइड्स और अमीनो एसिड का एक उत्कृष्ट स्रोत हैं। इसके अलावा, इसमें लैक्टोज भी होता है, एक किण्वनीय कार्बोहाइड्रेट जो ऊर्जा प्रदान करता है और यह दिखाने की अनुमति देता है कि क्या बैक्टीरिया गैस पैदा करता है.

दूसरी ओर, मध्यम में पित्त लवण होते हैं जो चयनात्मक चरित्र प्रदान करते हैं, क्योंकि यह ग्राम-सकारात्मक सूक्ष्मजीवों के विकास को रोकता है जो नमूना में मौजूद हो सकते हैं।.

इसी तरह, डिपोटेशियम फॉस्फेट और मोनोपोटेशियम फॉस्फेट एक पीएच संतुलन प्रणाली के रूप में कार्य करते हैं। यह प्रणाली आवश्यक है, क्योंकि शोरबा में निहित लैक्टोज सूक्ष्मजीवों द्वारा किण्वित होने पर माध्यम को अम्लीकृत करता है, लेकिन इसकी पूर्ति फॉस्फेट लवण द्वारा की जाती है.

इसलिए, ये तत्व आवश्यक हैं, क्योंकि अनियंत्रित अम्लता मांगी गई सूक्ष्मजीवों के समुचित विकास को प्रभावित कर सकती है.

इसके भाग के लिए, सोडियम क्लोराइड ऑस्मोटॉलिक रूप से मध्यम को स्थिर करता है, जबकि पानी मौजूद विलेय का विलायक है और माध्यम को तरल स्थिरता प्रदान करता है.

EC शोरबा novobiocin के साथ संशोधित

ओक्रेंड और रोज़ ने ईसी शोरबा की एक किस्म बनाई, जिसे ईसी शोरबा को नोवोबीसिन के साथ संशोधित कहा जाता है। संशोधन में पित्त लवण की सांद्रता को कम करने और 20 मिलीग्राम / डीएल के नोवोबीसिन को शामिल किया गया.

इस संशोधन के उपभेदों की वसूली के पक्ष में है एस्केरिचिया कोलाई एन्टेरोहेमोरेजिक (O157: H7).

यह बैक्टीरियल सीरोटाइप गंभीर रक्तस्रावी बृहदांत्रशोथ का कारण बनता है जो हेमोलिटिक यूरीमिक सिंड्रोम (एचओएस) का कारण बन सकता है; जो बदले में तीव्र गुर्दे की विफलता उत्पन्न कर सकता है, उच्च मृत्यु दर के साथ जो बुजुर्गों में 50% तक पहुंच सकता है.

दूषित भोजन की खपत के कारण इस जीवाणु द्वारा सालाना होने वाली रुग्णता और मृत्यु दर के कारण, संयुक्त राज्य अमेरिका का कृषि विभाग (यूएसडीए) व्यापक रूप से इस साधनों के उपयोग की सिफारिश करता है.

तैयारी

ईसी शोरबा

निर्जलित माध्यम का 37.4 ग्राम वजन और आसुत जल के 1 लीटर में भंग। मिश्रण को 5 मिनट के लिए आराम करने के लिए छोड़ देना चाहिए। इसके बाद, गर्मी स्रोत में, घुलने पर अक्सर घुल जाता है.

एक बार भंग होने पर, इसे पहले एक डरहम ट्यूब के साथ वातानुकूलित टेस्ट ट्यूब में वितरित किया जाता है। 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर एक आटोक्लेव में बाँझ.

माध्यम का पीएच 6.9। 0.2 होना चाहिए। निर्जलित माध्यम का रंग बेज है और तैयार हल्का एम्बर है.

वाइन को एक रेफ्रिजरेटर में संग्रहीत किया जाता है जब तक कि उनका उपयोग नहीं किया जाता है। उपयोग के समय शोरबा कमरे के तापमान पर होना चाहिए.

दूसरी ओर, ईसी शोरबा भी डबल एकाग्रता में तैयार किया जा सकता है.

EC शोरबा novobiocin के साथ संशोधित

निर्जलित माध्यम का 36.7 ग्राम वजन और 1 लीटर पानी में भंग। बाकी तैयारी वही है जो ऊपर वर्णित है.

उपयोग

कुल और फेकल कोलीफॉर्म का विश्लेषण

ईसी शोरबा NMP विधि द्वारा कॉलिफोर्म के अध्ययन के पुष्टिकारक चरण के लिए आदर्श है, दोनों पानी के नमूनों में, जैसे कि दवा उत्पादों और भोजन में.

आलसी टर्बिड और गैस उत्पादन शोरबा को प्रकल्पित चरण में प्राप्त किया जाना चाहिए, 2% चमकीले हरे रंग के पित्त और ईसीजी में पुनर्जीवित किया जाना चाहिए.

कुल कोलीफॉर्म के लिए चुनाव आयोग के शोरबा को एरोबायोसिस में 37 ° C पर 24 से 48 घंटों के लिए और फेकल कोलीफॉर्म के लिए 44 डिग्री सेल्सियस पर 24 से 48 घंटे के लिए एरोबियोसिस में लगाया जाता है।.

दोनों मामलों में इसकी व्याख्या निम्न तरीके से की जाती है: गैस उत्पादन के साथ टर्बिड ट्यूब को सकारात्मक माना जाता है। यदि 24 घंटे में गैस का उत्पादन नहीं होता है, तो ऊष्मायन 48 घंटे तक जारी रहता है.

EC पॉजिटिव ब्रॉथ पूरी तरह से कन्फर्मेटरी फेज से गुजरता है, जिसमें चयनात्मक मीडिया जैसे मैक कोन्क एगर, ईएमबी एगर या एंडो एगर में शामिल किया जाता है।.

यदि शोरबा का इस्तेमाल किया जाता है, तो ईसी को नोवोबीसिन के साथ संशोधित किया जाता है, सकारात्मक नलिकाएं को सॉर्बिटोल पर मैक कोन्क अगर पर फिर से लगाने की सिफारिश की जाती है.

गुणवत्ता नियंत्रण

तैयार माध्यम के प्रत्येक बैच पर गुणवत्ता नियंत्रण किया जाना चाहिए। सबसे पहले, माध्यम की बाँझपन का मूल्यांकन किया जाना चाहिए। इस अर्थ में, एक या दो शोरबा एरोबायोसिस में 37 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर टीका लगाए बिना ऊष्मायन किए जाते हैं। अपेक्षित परिणाम एक पारदर्शी शोरबा है, बिना फाड़ या रंग परिवर्तन के.

दूसरे, ज्ञात उपभेदों की वृद्धि का मूल्यांकन किया जाना चाहिए, जिसके लिए निम्नलिखित बैक्टीरिया का उपयोग किया जा सकता है: एस्केरिचिया कोलाई, एटीसीसी 8739, एस्केरिचिया कोलाई एटीसीसी 25922, साल्मोनेला टाइफिम्यूरियम एटीसीसी 14028.

सभी मामलों में एक संतोषजनक माइक्रोबियल विकास की उम्मीद की जाती है, जिसके लिए गैस उत्पादन के साथ एक अशांत शोरबा का निरीक्षण किया जाता है ई। कोलाई और साल्मोनेला के लिए गैस के बिना.

अन्य उपभेदों को नियंत्रण में शामिल किया जा सकता है: स्टैफिलोकोकस ऑरियस एटीसीसी 25923, एंटरोकोकस फेसेलिस ATCC 29212. इन उपभेदों को पूरी तरह से रोकना चाहिए.

सिफारिशें

-कोलीफॉर्म के अध्ययन के लिए डरहम ट्यूबों की नियुक्ति आवश्यक है.

-स्टरलाइज़ करने से पहले टेस्ट ट्यूब में माध्यम को वितरित करें, उसके बाद कभी नहीं.

-यदि माध्यम की 3 महीने से अधिक की तैयारी है, तो इसका उपयोग न करें.

-यदि माध्यम की सामान्य विशेषताओं में कोई परिवर्तन हो तो उपयोग न करें.

संदर्भ

1. प्रयोगशालाओं ब्रिटानिया। ईसी माध्यम। 2015 में उपलब्ध: britanialab.com
2. ई। कोलाई enterohemorrhagic। खाद्य सुरक्षा और सार्वजनिक स्वास्थ्य केंद्र। 2010. उपलब्ध: cfsph.iastate.edu
3. नियोजन निगम मीडियम ई.सी. पर उपलब्ध: foodsafety.neogen.com
4. Neogen। माध्यम ईसी को नोवोबीसिन के साथ संशोधित किया गया। पर उपलब्ध: foodsafety.neogen.com
5. Jure M, Condorí S, Leotta G, Chinen I, Miliwebsky E, Allori C, Aulet O, Castillo M. डिटेक्शन, अलगाव और का लक्षण वर्णन एस्केरिचिया कोलाई तुसूमन प्रांत के कॉन्सेपियन में कसाई की दुकानों से ताजा जमीन गोमांस से शिगा विष का उत्पादक. आरजी द्वारा रेव माइक्रोगोल; 2010, 42 (4): 284-287। यहाँ उपलब्ध है: www.scielo.org.