Agar BHI नींव, तैयारी और उपयोग करता है



BHI अगर या ब्रेन हार्ट इन्फ्यूजन अगर एक पौष्टिक ठोस संस्कृति माध्यम है। स्पेनिश में हम इसे ब्रेन हार्ट इनफ्यूजन एगर के रूप में संदर्भित करते हैं। यह एक गैर-चयनात्मक संस्कृति माध्यम है, जिसका अर्थ है कि सभी प्रकार के ग्राम सकारात्मक और ग्राम नकारात्मक बैक्टीरिया विकसित हो सकते हैं, साथ ही साथ कुछ खमीर और फिलामेंटस कवक.

यह वील ब्रेन और हार्ट इन्फ्यूजन, जानवरों के ऊतकों के पेप्टिक हाइड्रोलाइजेट, कैसिइन अग्नाशय हाइड्रोलाइजेट, सोडियम क्लोराइड, ग्लूकोज, डिसोडियम फॉस्फेट और अगर से बना है।.

यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि BHI agar बैक्टीरियोलॉजी प्रयोगशालाओं में सबसे लगातार संस्कृति मीडिया में से एक है। इसे प्राथमिक संस्कृति के रूप में पूरक के बिना इस्तेमाल किया जा सकता है, अन्य चयनात्मक मीडिया में प्राप्त कालोनियों की उपसंस्कृति या प्रयोगशाला में उपभेदों के रखरखाव के लिए.

दूसरी ओर, यह समृद्ध मीडिया की तैयारी में एक आधार के रूप में इस्तेमाल किया जाने वाला एक आदर्श माध्यम है, जैसे कि रक्त अगर और चॉकलेट पवार। दोनों सूक्ष्मजीवों को पोषण के दृष्टिकोण से अलग करने के लिए आदर्श हैं। हालांकि, यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि चूंकि इसमें ग्लूकोज होता है इसलिए यह हेमोलिसिस के पैटर्न का पालन करने के लिए पर्याप्त नहीं है.

इसी तरह, BHI agar का उपयोग आम मीडिया में कठिन विकास के रोगजनक सूक्ष्मजीवों के अलगाव के लिए विशेष साधनों की तैयारी के लिए किया जा सकता है: हीमोफिलस सपा, फ्रांसिसेला ट्यूलेंसिस, कोरिनेबैक्टीरियम डिप्थीरिया और हिस्टोप्लाज्मा कैप्सुलैटम.

एंटीबायोटिक एडिटिव बीएचआई अगर के साथ कवक के अलगाव के लिए एक चयनात्मक माध्यम बन जाता है.

सूची

  • 1 फाउंडेशन
  • 2 तैयारी
    • २.१ वशीकरण
    • २.२ प्लेट्स
    • 2.3 रक्त अगर की तैयारी
  • ३ उपयोग
    • ३.१ पूरक के बिना उपयोग करें
    • 3.2 अन्य मीडिया की तैयारी के लिए आधार के रूप में
  • 4 गुणवत्ता नियंत्रण
  • 5 संदर्भ

आधार

यह सूक्ष्मजीवों को अलग-थलग करने के लिए एक पौष्टिक संस्कृति का माध्यम है, जो रक्त और अन्य पोषक तत्वों की खुराक के साथ इसके संवर्धन को बढ़ाने में सक्षम है।.

यह एक गैर-चयनात्मक संस्कृति माध्यम है, इसलिए यह अधिकांश ग्राम सकारात्मक और ग्राम नकारात्मक बैक्टीरिया, साथ ही साथ कुछ कवक के विकास की अनुमति देता है। हालांकि, यह एंटीबायोटिक दवाओं के अतिरिक्त के साथ चयनात्मक बन सकता है.

इस माध्यम में बछड़े के मस्तिष्क और हृदय के जलसेक, जानवरों के ऊतकों से पेप्टाइड हाइड्रोलाइजेट और कैसिइन अग्नाशय हाइड्रोलाइजेट शामिल हैं; ये सभी यौगिक विटामिन, अमीनो एसिड, नाइट्रोजन और कार्बन के स्रोत के रूप में कार्य करते हैं.

ग्लूकोज एक कार्बोहाइड्रेट है जो कि सूक्ष्मजीवों को ऊर्जा प्रदान करता है जब वे इसे किण्वित करते हैं। जबकि, सोडियम क्लोराइड और डिसोडियम फॉस्फेट आसमाटिक संतुलन को बनाए रखते हैं और तटस्थता के लिए एक पीएच प्रदान करते हैं। अंत में, अग्र माध्यम को ठोस स्थिरता देता है.

तैयारी

निर्जलित माध्यम का 52 ग्राम वजन और आसुत जल के एक लीटर में भंग। मिश्रण को उबाल आने तक उबालने की प्रक्रिया के दौरान अक्सर उबालने तक गर्म करें.

आप बिना एडिटिव्स के बीएचआई अगर के वेजेज या प्लेट्स तैयार कर सकते हैं.

चोक

वेजेज की तैयारी के लिए, प्रत्येक ट्यूब के आधे हिस्से को भरने तक तैयारी परोसें, 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर आटोक्लेव में कवर करें और स्टरलाइज़ करें, जब तक कि वे एक आधार पर झूठ बोलने के लिए बाहर न निकल जाएं। फिर उपयोग करने तक एक रेफ्रिजरेटर में स्टोर करें.

प्लेटें

भंग किए गए मिश्रण को 15 मिनट के लिए 121 ° C पर आटोक्लेव किया जाता है, जब यह निकलता है तो इसे 50 ° C तक ठंडा करने की अनुमति दी जाती है और मध्यम 20 मिलीलीटर बाँझ पेट्री डिश में परोसा जाता है। जब तक उनका उपयोग नहीं किया जाता है, तब तक उन्हें एक रेफ्रिजरेटर में जमने, उलटने और संग्रहीत करने की अनुमति दी जाती है। रोपण से पहले प्लेटों को कमरे का तापमान लेने दें.

मध्यम का पीएच 7.4। 0.2 होना चाहिए.

अप्रस्तुत माध्यम बेज है और तैयार प्रकाश एम्बर है.

रक्त अगर की तैयारी

मध्यम स्टरलाइज़ करने के बाद, लगभग 45 से 50 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर ठंडा करें, इस समय रक्त (50 मिलीलीटर) जोड़ें, धीरे से समरूपता में मिलाएं और प्रत्येक पेट्री डिश में 20 मिलीलीटर की सेवा करें। यदि प्लेट पर बुलबुले बनते हैं, तो बर्नर की लौ को बुलबुले को खत्म करने के लिए जल्दी से पास किया जाना चाहिए.

इसी तरह, मिश्रण के 45 से 50 डिग्री सेल्सियस के तापमान तक पहुंचने पर संबंधित एडिटिव्स को जोड़कर विशेष मीडिया तैयार किया जा सकता है.

माध्यम चेरी लाल है.

अनुप्रयोगों

सप्लीमेंट के बिना उपयोग करें

बिना एडिटिव्स के BHI agar एक प्राथमिक संस्कृति के रूप में उपयोगी है और सूक्ष्मजीवों के शुद्ध उपभेदों को रोपण के लिए है जो हाल की पहचान के लिए मध्यम या मध्यम रूप से हैं.

जैसा कि यह एक हल्के रंग का माध्यम है, यह पिगमेंट का अवलोकन करने के लिए आदर्श है और इसलिए भी कि इसमें हस्तक्षेप करने वाले पदार्थ नहीं होते हैं, इसका उपयोग जैव रासायनिक परीक्षण, जैसे ऑक्सीडेज और उत्प्रेरित करने, या इससे उत्पन्न होने वाली कालोनियों के लिए अन्य जैव रासायनिक परीक्षणों को माउंट करने के लिए किया जा सकता है। अगर.

इसी तरह, BHI agar wedges प्रयोगशाला में एक निर्धारित समय (जीवाणुनाशक) के लिए व्यापक रूप से उपभेदों के रखरखाव के लिए उपयोग किया जाता है.

बैक्टीरियल उपभेदों के साथ सतह पर लगाए गए प्लेटों या वेज को 24 से 48 घंटों के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया जाता है। जबकि, कवक में तापमान और ऊष्मायन समय उस कवक के प्रकार पर निर्भर करेगा जो मांगा गया है.

अन्य मीडिया की तैयारी के लिए आधार अगर के रूप में

इसके साथ आधार को समृद्ध और चयनात्मक मीडिया तैयार किया जा सकता है.

समृद्ध

इसका मुख्य कार्य माइक्रोबायोलॉजी प्रयोगशालाओं में नियमित उपयोग के लिए रक्त अगर की तैयारी के आधार के रूप में सेवा करना है। विशेष रूप से, BHI बेस के उपभेदों के अलगाव के लिए अनुकूल है स्ट्रेप्टोकोकस सपा. हालांकि, यह हेमोलिसिस पैटर्न के अवलोकन के लिए उपयुक्त नहीं होने का नुकसान है क्योंकि इसमें ग्लूकोज होता है.

के अलगाव के लिए खरगोश या घोड़े के रक्त अगर की तैयारी में भी इसका उपयोग किया जाता है हीमोफिलस सपा. बेहतर परिणामों के लिए आप एक संवर्धन पूरक (IsoVitaleX) जोड़ सकते हैं.

यदि नमूने श्वसन पथ से आगर में आते हैं, तो बैक्ट्रासीन को साथ की वनस्पतियों को बाधित करने और उपभेदों की वसूली की संभावना को बढ़ाने के लिए जोड़ा जा सकता है हीमोफिलस सपा.

दूसरी ओर, रक्त अगर (मेमने या मानव) को आइस्यूराइट सिस्टीन से अलग करने के लिए तैयार किया जा सकता है कोरिनेबैक्टीरियम डिप्थीरिया. इसी तरह, यह अलग करने के लिए सिस्टीन और ग्लूकोज के साथ खरगोश रक्त अगर तैयार करने के लिए उपयोगी है फ्रांसिसेला तुलारेंसिस.

रक्त अगर प्लेटों की सीडिंग थकावट द्वारा की जाती है और माइक्रोएरोफिलिक (5-10% सीओ) में 24-48 घंटों के लिए 35-37 डिग्री सेल्सियस पर आरोपित होती है।2).

चयनात्मक

एंटीबायोटिक दवाओं के अतिरिक्त के साथ यह माध्यम कवक के अलगाव के लिए साबुर्ड अगर की जगह ले सकता है.

क्लोरहेफेनिकॉल के साथ बीएचआई अगर का संयोजन - जेंटामाइसिन या पेनिसिलिन -, स्ट्रेप्टोमाइसिन और घोड़े का खून अलगाव के लिए आदर्श है हिस्टोप्लाज्मा कैप्सुलैटम.

सूक्ष्मजीव को अलग-थलग करने के लिए, 35-37 डिग्री सेल्सियस पर या एरोबायोसिस में कमरे के तापमान पर ऊष्मायन की सिफारिश की जाती है। कभी-कभी दोनों तापमान रेंज में ऊष्मायन आवश्यक होता है, इसके लिए 2 प्लेटों का उपयोग किया जाता है.

कुछ फफूंद जैसे ट्राइकोफाइटन मेंटाग्रोफाइट्स उन्हें 7 दिनों तक कमरे के तापमान पर ऊष्मायन किया जाना चाहिए.

गुणवत्ता नियंत्रण

तैयार किए गए प्रत्येक बैच से 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर 1 प्लेट या पच्चर को उकसाने की सिफारिश की जाती है और यह सत्यापित करें कि कोई विकास नहीं है; विशेष रूप से महत्वपूर्ण जब रक्त अगर तैयार है, क्योंकि यह एक आसानी से दूषित माध्यम है.

दूसरी ओर, ज्ञात या प्रमाणित मानक उपभेदों का टीकाकरण और उनके विकास को देखकर माध्यम की गुणवत्ता का मूल्यांकन किया जा सकता है.

इस अर्थ में, बिना एडिटिव्स, उपभेदों के बीएचआई अगर का मूल्यांकन करने के लिए एस्केरिचिया कोलाई एटीसीसी 25922, स्टैफिलोकोकस ऑरियस एटीसीसी 25923 या कैंडिडा अल्बिकंस ATCC 10231. वे 24 से 48 घंटों के लिए एरोबायोसिस में 37 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन करते हैं। सभी मामलों में संतोषजनक वृद्धि की उम्मीद है.

रक्त अगर प्लेटों के तनाव का मूल्यांकन करने के लिए  स्ट्रेप्टोकोकस पाइोजेन्स एटीसीसी 19615, स्ट्रेप्टोकोकस निमोनिया एटीसीसी 6305 या ट्रिकोफाइटन मेंटैग्राफाइटिस एटीसीसी 9533.

बैक्टीरियल उपभेदों को माइक्रोएरोफिलिक में 37 डिग्री सेल्सियस पर 24 घंटे के लिए ऊष्मायन किया जाता है, जबकि कवक को एक नम कक्ष में 7 दिनों तक कमरे के तापमान पर लगाया जाता है। सभी मामलों में संतोषजनक वृद्धि की उम्मीद है.

संदर्भ

  1. प्रयोगशालाओं ब्रिटानिया। ब्रेन हार्ट इन्फ्यूजन आगर। 2015 में उपलब्ध: britanialab.com.
  2. बीडी प्रयोगशालाओं ब्रेन हार्ट इन्फ्यूजन (BHI) आगर। 2013. पर उपलब्ध: bd.com.
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