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बेयर्ड पार्कर आगर नींव, तैयारी और उपयोग
बेयर्ड पार्कर एगर यह एक ठोस, चयनात्मक और अंतर संस्कृति माध्यम है। यह 1962 में सकारात्मक स्टैफिलोकोकस गिनती का पता लगाने और कोगुलेज़ के लिए बनाया गया था (स्टैफिलोकोकस ऑरियस).
यह कैसिइन अग्नाशय हाइड्रोलाइजेट, मांस निकालने, खमीर निकालने, लिथियम क्लोराइड, ग्लाइसिन, सोडियम पाइरूवेट, पोटेशियम टेल्यूराइट, अगर और अंडे की जर्दी इमल्शन से बना है.
बेयर्ड पार्कर एगर की क्षमता पर आधारित है एस ऑरियस टेलुराइट को कम करने और लेसितिण का उत्पादन करने के लिए। दोनों गुण इस प्रजाति के लिए विशिष्ट विशेषताओं के साथ एक कॉलोनी उत्पन्न करते हैं। इसलिए, यह इस सूक्ष्मजीव का पता लगाने में बहुत प्रभावशीलता प्रदान करता है.
की विशिष्ट कॉलोनियों एस ऑरियस वे काले या गहरे भूरे रंग के होते हैं, एक रंगहीन सीमा और उनके चारों ओर एक स्पष्ट प्रभामंडल होता है, जो बाकी सूक्ष्मजीवों से खुद को अलग करता है। यह रोगज़नक़ नैदानिक नमूनों, पानी, सौंदर्य प्रसाधन और कच्चे या पके हुए खाद्य पदार्थों में पाया जा सकता है.
इसका निदान या पता लगाना बहुत महत्वपूर्ण है, क्योंकि यह विभिन्न प्रकार के विकृति पैदा करता है, जैसे कि फूड पॉइजनिंग, स्कैल्ड स्किन सिंड्रोम, टॉक्सिक शॉक सिंड्रोम, फोड़े, मेनिनजाइटिस, सेप्टिसीमिया, एंडोकार्डिटिस, आदि।.
सूची
- 1 फाउंडेशन
- १.१ पोषण शक्ति
- 1.2 चयनात्मक
- १.३ विभेद
- 2 तैयारी
- 2.1 अंडे की जर्दी पायस
- 2.2 पोटेशियम टेलुराइट 1% w / v
- २.३ संस्कृति माध्यम की तैयारी
- 3 का उपयोग करें
- 3.1 नैदानिक नमूने
- 3.2 खाद्य नमूने
- 3.3 पानी के नमूने
- 4 गुणवत्ता नियंत्रण
- 5 सिफारिशें
- 6 संदर्भ
आधार
पौष्टिक शक्ति
कैसिइन अग्नाशय हाइड्रोलाइजेट, मांस निकालने और खमीर निकालने पोषक तत्वों, विटामिन और खनिजों के स्रोत हैं जो सामान्य माइक्रोबियल विकास के लिए आवश्यक हैं, जबकि पाइरूवेट और ग्लाइसिन यौगिक हैं जो विशिष्ट वृद्धि के पक्ष में हैं स्टैफिलोकोकस ऑरियस.
चयनात्मक
बेयर्ड पार्कर एगर चयनात्मक है क्योंकि इसमें ऐसे पदार्थ शामिल हैं जो विकास को बढ़ावा देने के साथ-साथ वनस्पतियों की वृद्धि को रोकते हैं एस ऑरियस. अवरोधक यौगिक लिथियम क्लोराइड और पोटेशियम टेलराइट हैं.
अंतर
इसका मतलब है कि अंतर करने की अनुमति देता है एस ऑरियस कोगुलेज़ के बाकी नकारात्मक स्टेफिलोकोसी. एस ऑरियस काले धातु मुक्त टेलूरियम को टेलुराइट को कम करने की क्षमता है, जो काले या गहरे भूरे रंग की कालोनियों का निर्माण करता है.
इसी तरह, अंडे की जर्दी एंजाइम लेसितिण और लाइपेस की उपस्थिति का प्रमाण करने के लिए सबस्ट्रेट्स प्रदान करती है. एस ऑरियस यह सकारात्मक लेसितिण है और इसलिए कॉलोनी के चारों ओर एक स्पष्ट प्रभामंडल देखा जाएगा, यह दर्शाता है कि लेसिथिन हाइड्रोलाइज्ड था.
इस अर्थ में, काले या गहरे भूरे रंग की कालोनियों के इस अग्र में उपस्थिति प्रकाश प्रभामंडल के साथ उज्ज्वल दिखाई देती है एस ऑरियस.
यदि एक वर्षा क्षेत्र बनता है, तो यह इंगित करता है कि लिप्से गतिविधि है। के कुछ उपभेद एस ऑरियस वे सकारात्मक लाइपेज और अन्य नकारात्मक हैं.
इस घटना में कि एस ऑरियस यदि लाइपेज सकारात्मक है, तो काले या गहरे भूरे रंग की कॉलोनी के आसपास एक अपारदर्शी क्षेत्र देखा जाएगा, और फिर लेसितिण की कार्रवाई के कारण स्पष्ट प्रभामंडल होगा।.
के अलावा अन्य बैक्टीरिया की कालोनियों एस ऑरियस इस माध्यम में विकसित करने में सक्षम रंगहीन या भूरे रंग की कालोनियों का विकास होगा, जो बिना प्रभामंडल के है.
एटिपिकल ब्लैक कॉलोनियों को भी रंगहीन सीमा के साथ या बिना, लेकिन स्पष्ट प्रभामंडल के बिना मनाया जा सकता है। इन कॉलोनियों को ध्यान में नहीं रखा जाना चाहिए, वे इसके अनुरूप नहीं हैं एस ऑरियस.
तैयारी
अंडे की जर्दी पायस
एक ताजा चिकन अंडा लें, इसे अच्छी तरह से धोएं और 70% शराब में 2 से 3 घंटे रखें। फिर, अंडा सड़न से खुल जाता है और अंडे का सफेद भाग सावधानी से जर्दी से अलग हो जाता है। बाद में 50 मिलीलीटर जर्दी ली जाती है और 50 मिलीलीटर बाँझ शारीरिक समाधान के साथ मिलाया जाता है.
1% w / v पर पोटेशियम टेलराइट
कुछ वाणिज्यिक घराने 1% पोटेशियम टेल्यूराइट बेचने के लिए तैयार हैं। मध्यम जमने से पहले इसे माध्यम में जोड़ा जाता है.
प्रयोगशाला में इस घोल को तैयार करने के लिए 1.0 ग्राम पोटेशियम टेल्यूराइट का वजन करें और पानी के एक हिस्से में घोलें। इसके बाद पानी की मात्रा 100 मिलीलीटर तक पूरी हो जाती है। निस्पंदन विधि द्वारा समाधान को निष्फल किया जाना चाहिए.
संस्कृति माध्यम तैयार करना
निर्जलित माध्यम का 60 ग्राम वजन और आसुत जल के 940 मिलीलीटर में भंग। लगभग 5 से 10 मिनट के लिए मिश्रण को आराम पर छोड़ दें.
विघटन प्रक्रिया को बेहतर बनाने के लिए अक्सर मध्यम सरगर्मी करके गर्मी लागू करें। एक मिनट के लिए उबलने दें। 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर आटोक्लेव में बाँझ.
45 डिग्री सेल्सियस के तापमान तक पहुंचने तक खड़े रहने दें और अंडे की जर्दी इमल्शन के 50 मिलीलीटर और 1% टेलराइट के 10 मिलीलीटर जोड़ें। अच्छी तरह से मिलाएं और बाँझ पेट्री डिश पर 15 से 20 मिलीलीटर की सेवा करें.
उपयोग करने तक एक फ्रिज में सॉल्वैंट्स और स्टोर में उल्टे ऑर्डर को ठोस बनाने की अनुमति दें.
तैयार माध्यम का अंतिम पीएच 6.8 prepared 0.2 पर होना चाहिए.
नमूना लगाने से पहले, तब तक प्रतीक्षा करें जब तक कि प्लेट परिवेश का तापमान न ले ले। स्ट्रिगेशन या ड्रिग्ल्स्की स्पैटुला के साथ सतह पर बुवाई करके प्लेटों को बोएं.
निर्जलित माध्यम का रंग हल्का तन है और तैयार माध्यम का रंग हल्का अम्बर है.
उपयोग
नैदानिक नमूने
नैदानिक नमूने सीधे प्लेट के एक छोर पर सामग्री के हिस्से का निर्वहन करके बीजित किए जाते हैं, और वहां से थकावट के आधार पर निकलता है। 35-37 डिग्री सेल्सियस पर 24 से 48 घंटे के लिए सेते हैं.
भोजन के नमूने
भोजन के नमूने का वजन 10 ग्राम और 0.1% पेप्टोनेटेड पानी के 90 मिलीलीटर में होमोजेनाइज, यदि आवश्यक हो, तो वहां से पतला तैयार किया जाता है। तैयार समाधान के 0.3 मिलीलीटर के साथ तीन प्रतियों में प्लेटों को इंजेक्ट करें, और एक Drigalski स्पैटुला के साथ सतह पर बोना। 35-37 डिग्री सेल्सियस पर 24 से 48 घंटे के लिए सेते हैं.
यह कार्यप्रणाली प्राप्त विशिष्ट कालोनियों को गिनने की अनुमति देती है और उपस्थिति के समय आदर्श होती है एस ऑरियस ऊपर 10 सीएफयू प्रति जी / एमएल नमूना.
यदि आपको संदेह है कि की राशि एस ऑरियस यह छोटा है या वनस्पतियों के साथ बहुत कुछ है, यह 10% NaCl और 1% सोडियम पाइरूवेट के साथ tripticase सोया शोरबा में नमूना को समृद्ध करने का सुझाव दिया गया है। यह वृद्धि के पक्ष में होगा एस ऑरियस और साथ की वनस्पतियों के विकास को बाधित करेगा। बादल छाए रहने वाले ट्यूबों को बेयर्ड पार्कर आगर पर बीज दिया जाएगा.
पानी के नमूने
एक वैक्यूम निस्पंदन सिस्टम और निष्फल में, 100 मिलीलीटर पानी को फ़िल्टर्ड किया जाता है, और फिर 0.4 माइक्रोन माइक्रोप्रोसेस झिल्ली को एक बाँझ क्लैंप के साथ हटा दिया जाता है और बेयर्ड पार्कर प्लेट पर रखा जाता है। 35-37 डिग्री सेल्सियस पर 24 से 48 घंटे के लिए सेते हैं। यह तकनीक विशिष्ट कालोनियों की गिनती की अनुमति देती है एस ऑरियस.
गुणवत्ता नियंत्रण
बेयर्ड पार्कर अगर की गुणवत्ता का मूल्यांकन करने के लिए, ज्ञात उपभेदों का उपयोग किया जा सकता है, जैसे स्टैफिलोकोकस ऑरियस एटीसीसी 25923, स्टैफिलोकोकस ऑरियस एटीसीसी 6538, स्टेफिलोकोकस एपिडर्मिडिस एटीसीसी 12228, एस्केरिचिया कोलाई एटीसीसी 25922 या प्रोटीन मिराबिलिस एटीसीसी 43071.
के उपभेदों के मामले में एस ऑरियस एटीसीसी को टेलुराइट को कम करने के लिए जाना जाता है, और वे सकारात्मक लाइपेस और लेसिथिनसे हैं। इसलिए एक संतोषजनक विकास होना चाहिए और काले केंद्र और रंगहीन किनारे के साथ उत्तल उपनिवेशों को विकसित करना, एक अपारदर्शी प्रभामंडल और एक अन्य प्रभामंडल के साथ और अधिक बाहरी स्पष्ट होना.
दूसरी ओर, एस एपिडर्मिडिस इस माध्यम में गरीब विकास की उम्मीद की जाती है, भूरे-भूरे से काले रंग की कॉलोनियों के लिए, कोई स्पष्ट प्रभामंडल नहीं है.
को ई। कोलाई और पी। मिराबिलिस यह पूरी तरह या आंशिक रूप से बाधित होने की उम्मीद है। बढ़ने के मामले में, ब्राउन कॉलोनियां अपारदर्शी क्षेत्र के बिना विकसित होंगी, न ही स्पष्ट प्रभामंडल.
सिफारिशें
-टेलराइट और जर्दी को जोड़ने के बाद माध्यम को गर्म नहीं किया जाना चाहिए.
-अंडे की जर्दी पायस की तैयारी और माध्यम में इसके अलावा संदूषण का एक बहुत कमजोर कदम है। अत्यधिक सावधानी बरतनी चाहिए.
-अगर वहाँ की विशिष्ट उपनिवेशों की उपस्थिति है एस ऑरियस कहा जाता है कि तनाव के लिए एक coagulase परीक्षण बढ़ते द्वारा corroborated किया जाना चाहिए.
-यदि कोगुलेज़ के साथ संदिग्ध परिणाम हैं, तो अन्य पुष्टिकरण परीक्षण माउंट किए जाने चाहिए.
-के विशिष्ट कालोनियों की उपस्थिति को भ्रमित न करने के लिए सावधान रहें एस ऑरियस काले रंग के एटिपिकल कालोनियों के साथ.
संदर्भ
- विकिपीडिया योगदानकर्ता। बेयर्ड-पार्कर आगर। विकिपीडिया, मुक्त विश्वकोश। 15 मार्च 2017, 19:36 यूटीसी। पर उपलब्ध है: wikipedia.org/ 18 फरवरी, 2019 तक पहुँचा.
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- प्रयोगशालाओं ब्रिटानिया। बेयर्ड पार्कर एगर बेस। 2015 में उपलब्ध: britanialab.com
- फ्रांसिस्को सोरिया मेलगुइज़ो प्रयोगशालाएँ। 2009. बेयर्ड पार्कर आगर। यहाँ उपलब्ध है: http://f-soria.es/Inform
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