आधा सिम नींव, तैयारी और उपयोग करता है

आधा सिम यह एक अर्धवृत्ताकार और विभेदक अगार है, जिसे विशेष रूप से कुछ बैक्टीरिया की पहचान में मदद करने के लिए डिज़ाइन किया गया है, मुख्य रूप से परिवार एंटरोबैक्टीरिया। यह ट्रिप्टीन, पेप्टोन, आयरन सल्फेट, अमोनियम सल्फेट, सोडियम थायोसल्फेट और अगर से बना है।.

यह माध्यम तीन महत्वपूर्ण परीक्षणों के निष्पादन की अनुमति देता है: हाइड्रोजन सल्फाइड (एच) का उत्पादन₂एस), इंडोल गठन और गतिशीलता, इसलिए संक्षिप्त सिम। इसकी महान उपयोगिता के कारण एक जीवाणु विज्ञान प्रयोगशाला में इसकी कमी नहीं हो सकती है.

अन्य मीडिया के विपरीत, यह अर्ध-ठोस होना चाहिए ताकि कुछ जीवाणुओं की गति क्षमता का पता चल सके। इस अर्थ में, यह परीक्षण एंटरोबैक्टीरिया के लिए बहुत अच्छी तरह से काम करता है, लेकिन ग्राम-नकारात्मक, गैर-किण्वन बेसिली में नहीं, जहां अन्य तरीकों का उपयोग करना पसंद किया जाता है, उदाहरण के लिए, लंबित ड्रॉप.

सिम माध्यम कुछ विशिष्ट गुणों को अलग करने की अनुमति देता है जो दूसरों के संबंध में कुछ बैक्टीरिया की विशेषता रखते हैं। उदाहरण के लिए एस्केरिचिया कोलाई यह H होने से प्रतिष्ठित है₂एस (-), इंडोल (+) और गतिशीलता (+), जबकि प्रोटीन मिराबिलिस यह एच₂एस (+), इंडोल (-), गतिशीलता (+).

सूची

• 1 फाउंडेशन
  • १.१ शक्ति स्रोत
  • 1.2 हाइड्रोजन सल्फाइड का उत्पादन
  • 1.3 इंडोल गठन
  • 1.4 मोटापन
• 2 तैयारी
  • 2.1 आधा सिम
  • २.२ कोवाक का अभिकर्मक
  • 2.3 एर्लिच अभिकर्मक
• ३ उपयोग
  • ३.१ बीज
• 4 गुणवत्ता नियंत्रण
• 5 सीमाएँ
• 6 संदर्भ

आधार

यह एक संस्कृति माध्यम है जिसे विभेदक माना जाता है, क्योंकि इसका उपयोग उन सूक्ष्मजीवों के बीच अंतर करने में सक्षम होता है जो उन लोगों से हाइड्रोजन सल्फाइड का उत्पादन करने में सक्षम हैं जो ऐसा नहीं करते हैं; उन लोगों को भी उजागर करता है जो फार्म को उन लोगों के ट्रिप्टोफैन से अलग करते हैं जो इसे नहीं बनाते हैं, और अंत में मोटर बैक्टीरिया से मकसद को अलग करते हैं.

शक्ति का स्रोत

किसी भी संस्कृति माध्यम के रूप में, इसमें आवश्यक पोषक तत्व प्रदान करने वाले तत्व होते हैं ताकि गैर-मांग वाले सूक्ष्मजीव विकसित हो सकें। इन तत्वों को पेप्टोन और ट्रिप्टिना द्वारा दर्शाया जाता है.

इस माध्यम द्वारा मूल्यांकन की गई विशेषताओं की उपस्थिति या अनुपस्थिति का निरीक्षण करने में सक्षम होने के लिए पर्यावरण में सूक्ष्मजीव का विकास आवश्यक है.

हाइड्रोजन सल्फाइड का उत्पादन

एग्रीमेंट सिम का एस अक्षर हाइड्रोजन सल्फाइड (एच) के उत्पादन को संदर्भित करता है₂एस)। हाइड्रोजन सल्फाइड बनाने में सक्षम बैक्टीरिया सोडियम थायोसल्फेट के सल्फर को ले जाएगा.

एक बार H बनता है₂एस - रंगहीन गैसें - यह माध्यम में मौजूद लोहे के नमक के साथ प्रतिक्रिया करता है, जिससे फेरस सल्फाइड बनता है, स्पष्ट रूप से दिखाई देता है (काला अवक्षेप)। बैक्टीरिया जो एच नहीं बनाते हैं₂एस, मूल रंग (बेज) के बीच में छोड़ दें.

काले अवक्षेप की उपस्थिति गतिशीलता की व्याख्या में बाधा डाल सकती है। हालांकि, यह ज्ञात है कि अधिकांश एच-उत्पादक एंटरोबैक्टीरिया है₂एस पॉजिटिव मोटिव हैं, जैसे साल्मोनेला, प्रोटीन और सिट्रोबैक्टीरिया। इसके अलावा, काला अवक्षेप जो लगभग पूरे माध्यम को कवर करता है, सकारात्मक गतिशीलता का सुझाव देता है.

इंडोल प्रशिक्षण

संक्षिप्त सिम का दूसरा अक्षर "I" है, जो इंडोल के गठन का प्रतिनिधित्व करता है.

इस अर्थ में, tripteína, पोषक तत्व का एक स्रोत होने के अलावा, एक और मौलिक कार्य को पूरा करता है। यह पेप्टोन ट्रिप्टोफैन नामक एक एमिनो एसिड में समृद्ध है, इसलिए, यह बैक्टीरिया को दिखा सकता है जो ट्रिप्टोफेन का उत्पादन करते हैं.

यह एंजाइम अमीनो एसिड ट्रिप्टोफैन की कतरन के लिए जिम्मेदार है, जिसके परिणामस्वरूप इंडोल (रंगहीन पदार्थ), पाइरुविक एसिड और अमोनियम का गठन होता है।.

इसीलिए, इस प्रतिक्रिया को प्रदर्शित करने के लिए एक खुलासा पदार्थ (एर्लिच अभिकर्मक या कोवाक का अभिकर्मक) जोड़ना आवश्यक है। या तो कोई इण्डोल के साथ प्रतिक्रिया करता है, अगर की सतह पर एक अंगूठी के आकार का लाल-फुचिया पदार्थ बनाता है। यदि फुकिया अंगूठी दिखाई देती है तो इंडोल परीक्षण को सकारात्मक माना जाता है.

जिन बैक्टीरिया में यह एंजाइम नहीं होता है, वे अंगूठी नहीं बनाएंगे और एक नकारात्मक इण्डोल परीक्षण के रूप में व्याख्या की गई है.

यह इंगित करना महत्वपूर्ण है कि इंडोल परीक्षण की व्याख्या करने के लिए अंतिम होना चाहिए, क्योंकि एक बार अभिकर्मक जुड़ने के बाद, मध्यम बादल बन जाता है जिससे गतिशीलता की कल्पना करना मुश्किल हो जाता है.

गतिशीलता

अंत में सिम शब्द के अक्षर "M" का अर्थ है गतिशीलता। गतिशीलता का मूल्यांकन करने में सक्षम होने के लिए, यह माध्यम रणनीतिक रूप से अर्ध-ठोस है, क्योंकि यह विशेषता यह सुनिश्चित करने के लिए आवश्यक है कि जीवाणु संचलन है या नहीं। फ्लैजेला वाले बैक्टीरिया वे होते हैं जो इस सकारात्मक परीक्षण को देते हैं.

एक सकारात्मक परीक्षण स्पष्ट होगा जब टर्बिडिटी देखी जाती है, दोनों प्रारंभिक इनोकुलम में, और इसके आसपास। जबकि, गैर-मोबाइल बैक्टीरिया केवल प्रारंभिक इनोकुलम पथ में विकसित होते हैं.

तैयारी

आधा सिम

निर्जलित माध्यम का 30 ग्राम वजन और आसुत जल के एक लीटर में भंग। मिश्रण को 5 मिनट के लिए खड़े रहने के लिए छोड़ दिया जाता है और फिर उबलने के लिए गर्म किया जाता है, जब तक पूरी तरह से भंग न हो जाए।.

15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर कपास के ढक्कन और आटोक्लेव के साथ परीक्षण ट्यूबों में मिश्रण को वितरित करें। आटोक्लेव से ट्यूब रैक निकालें और इसे एक ईमानदार स्थिति में जमने दें, ताकि माध्यम एक ब्लॉक के आकार में हो।.

भंडारण के लिए, इसका उपयोग होने तक रेफ्रिजरेटर में रखा जाता है। तैयार माध्यम में 7.3 must 0.2 का अंतिम पीएच होना चाहिए.

मध्यम को निष्क्रिय करने के समय, इसे कमरे के तापमान पर होना चाहिए। माध्यम का रंग बेज है.

कोवाक की अभिकर्मक

150 मिलीलीटर एमाइल या आइसोमाइल या ब्यूटाइल अल्कोहल को मापें। (उल्लिखित तीन में से एक का उपयोग करें).

पी-डाइमिथाइलिनोबेंज़लडिहाइड के 10 ग्राम को भंग करें। फिर, धीरे-धीरे केंद्रित हाइड्रोक्लोरिक एसिड के 50 मिलीलीटर जोड़ें.

उपयोग के लिए तैयार अभिकर्मक रंगहीन या हल्का पीला है। इसे एक एम्बर बोतल में रखा जाना चाहिए और एक रेफ्रिजरेटर में संग्रहीत किया जाना चाहिए। गहरे भूरे रंग का होने पर उपयोग न करें; यह इंगित करता है कि यह क्षतिग्रस्त है। एंटरोबैक्टीरिया से निपटने के दौरान यह अभिकर्मक पसंद किया जाता है.

एर्लिच अभिकर्मक

पी-डाइमिथाइलामिनोबेंज़ाल्डिहाइड का 2 ग्राम वजन और 190 मिलीलीटर पूर्ण एथिल अल्कोहल में भंग करें और 40 मिलीलीटर केंद्रित हाइड्रोक्लोरिक एसिड के साथ धीरे-धीरे मिलाएं। कोवैक की अभिकर्मक उसी तरह रखें। अहर्निश अभिकर्मक का उपयोग गैर-किण्वन और अवायवीय जीवाणुओं के लिए अधिक किया जाता है.

अनुप्रयोगों

सिम माध्यम जीवाणु विज्ञान प्रयोगशालाओं में अत्यधिक उपयोग किया जाता है। यह एक लाभ के रूप में है कि एक ही ट्यूब में एंटरोबैक्टीरिया की पहचान में तीन आवश्यक विशेषताओं को देखा जा सकता है.

लगाए

इस माध्यम को बोने का सही तरीका सुई का उपयोग करना है, जिसके साथ अध्ययन किए जाने वाले शुद्ध कॉलोनी के एक हिस्से को मध्यम रूप से केंद्र में डाला जाता है और डाला जाता है। एक ही जोर लगाना होगा। पंचर ट्यूब के नीचे तक नहीं पहुंचना चाहिए, सही बात केवल दो तिहाई गहराई को कवर करना है.

इनोकुलम को दोहराना उचित नहीं है, क्योंकि इससे सकारात्मक गतिशीलता की गलत व्याख्या हो सकती है। टीकाकृत माध्यम 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर एरोबियोसिस में ऊष्मायन किया जाता है.

यदि एच का उत्पादन किया गया था या नहीं, तो यह उस समय मनाया जाता है₂एस और प्रेरणा पढ़ी जाती है। अंत में इंडोल का पता चलता है, एर्लिच या कोवाक के अभिकर्मक की 3 से 4 बूंदों को मिलाकर, इसे मिश्रित और मिश्रित किया जाता है.

गुणवत्ता नियंत्रण

बाँझपन नियंत्रण के रूप में, एक या दो ट्यूबों को 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर एक ओवन में बिना टीकाकरण के ऊष्मायन किया जाता है। उम्मीद है कि इस समय के बाद रंग में कोई वृद्धि या परिवर्तन नहीं होगा.

गुणवत्ता नियंत्रण के रूप में, प्रमाणित ज्ञात उपभेदों का उपयोग किया जा सकता है, जैसे: एस्केरिचिया कोलाई एटीसीसी 25922, एंटरोबैक्टर एरोजेन एटीसीसी 13048, क्लेबसिएला निमोनिया एटीसीसी 13883, साल्मोनेला टाइफिम्यूरियम एटीसीसी 14028, शिगेला सोनैनी एटीसीसी 29930, प्रोटीन वल्गरिस एटीसीसी 13315.

अपेक्षित परिणाम हैं: एस्केरिचिया कोलाई एच₂एस नकारात्मक, अकर्मण्य और सकारात्मक गतिशीलता, एंटरोबैक्टर एरोजेन केवल सकारात्मक गतिशीलता, साल्मोनेला टाइफिम्यूरियम एच₂नकारात्मक इंडोल के साथ एस और सकारात्मक गतिशीलता. प्रोटीन वल्गरिस सभी सकारात्मक, जबकि क्लेबसिएला निमोनिया और शिगेला सोनैनी सभी नकारात्मक.

सीमाओं

-के कुछ उपभेद मॉर्गनेल्ला मॉर्गानी, अन्य उपभेदों में मेलेनिन के उत्पादन के कारण इस माध्यम में एक भूरा वर्णक पैदा कर सकता है, यह फेरस सल्फाइड के अवक्षेपण के साथ भ्रमित नहीं होना चाहिए। अनुभवहीन पेशेवरों में यह स्थिति एच परीक्षण की व्याख्या में गलत सकारात्मक उत्पन्न कर सकती है₂एस.

-सख्त एरोबिक बैक्टीरिया केवल ट्यूब की सतह पर बढ़ेगा, जिससे गतिशीलता की व्याख्या करना मुश्किल हो जाता है.

संदर्भ

1. बीडी प्रयोगशालाओं बीबीएल सिम मीडियम। 2008. पर उपलब्ध: bd.com
2. नियोजन प्रयोगशालाएँ सिम मीडियम। पर उपलब्ध: foodsafety
3. डीम्को फ्रांसिस्को सोरिया मेलगुइज़ो। सिम मीडियम। 2009. पर उपलब्ध: http://f-soria.es
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6. कोनमैन ई, एलन एस, जैंडा डब्ल्यू, श्रेकेनबर्गर पी, विन्न डब्ल्यू (2004)। माइक्रोबायोलॉजिकल निदान। 5 वां संस्करण। संपादकीय पानामेरिकाना एस.ए. अर्जेंटीना.